猪瘟病毒流行病学、病原致病特性及猪瘟综合防制研究

猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的高度致死性、接触性传染病,严重危害全球养猪业的重要传染病,也是我国计划要消灭的重大动物疫病之一。近年流行态势十分复杂,本文就CSF的流行情况、病原致病特征及综合防治技术研究等方面进行全面概述,井为猪瘟的防制提出具体实施方案。     

猪瘟病毒野毒株TaqMan-MGB荧光定量PCR、鉴别方法的建立与应用

 【目的】建立一种快速、敏感、特异地检测猪瘟病毒野毒的一步TaqMan-MGB 荧光定量PCR方法,为临床鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒提供了准确可靠的工具。【方法】在猪瘟病毒基因组5′端非编码保守区设计一对猪瘟病毒通用引物和一条特异性MGB探针,通过优化,得到最佳反应体系和反应条件,进行特异性、灵敏度和临床样本符合检验。【结果】该方法在100～10-7范围内线性相关系数为0.998,检测极限达5.3×10-2pg 病毒核酸;对24个质控样本检测结果显示,该方法能检测除猪瘟兔化弱毒疫苗（HCLV）以外的猪瘟流野毒株,其它猪相关致病病原检测阴性;对122份疑似猪瘟样本检测的结果与本实验室建立的RT-nPCR方法的符合率为94.3％（115/122）,阳性和阴性符合率分别为86.4％（38/44）和98.7％（77/78）,Kappa值为0.87＞0.75。【结论】建立的一步TaqMan-MGB 荧光定量PCR方法能鉴别猪瘟野毒和HCLV疫苗毒,且特异性好、灵敏度高、与笔者先前建立的RT-nPCR方法对临床样本的检测结果具有高度的一致性。     

白居易的园林情结及其对传统私家园林的影响

本文阐述了唐朝诗人白居易的园林情结,剖析其园林思想,并归纳他的“中隐”思想和朴实造园手法对传统私家园林产生的深远影响。     

园林植物景观意境创造的研究

园林景观只有被赋予一定的思想意境，并与景观要素相融合，才能真正的体现园林艺术价值。而园林植物因为蕴涵着深厚的文化内涵，承裁着丰富的文化信息，常用来进行园林意境的创造。结合实例对我国古典园林、现代园林运用植物造景创造园林景观意境的方法进行研究，揭示园林未来的发展应结合时代特点，并借鉴优秀的传统艺术手法进行园林植物造景意境的创造，融合植物造景的科学性和艺术性于一体。     

把经营化管理的理念延伸到绿地建设之中——以四川大学华西医院绿地建设与管护为例

地处城市中心区的大医院面临日益突出的绿地用地与建设用地争地的矛盾。文章以四川大学华西医院绿地建设与管护为例，探讨如何把经营化管理的理念延伸到绿地建设之中，充分考虑降低绿地建设成本和今后养护成本的因素，力求最大化的发挥园林绿地的生态效益，为病患创造舒适、优美的治疗和康复环境。     

宁波天一阁园林艺术浅析

宁波天一阁藏书楼庭园是古典园林的一种形式。藏书楼的格局 ,体现了名称的精深寓意。天一阁原本是一个简单的江南私家园林 ,而在历代修葺过程中 ,不断扩充发展 ,从而形成现在的集藏书、书法、石刻、石构建筑和浙东民居建筑于一体的书城。园林的命名不仅是个简单的称呼 ,而且是统领整个园林规划设计的总纲 ;对古典园林的保护 ,除了保护原貌外 ,还应积极地充实发展。参 4     

Comparison of antibody values in sera of pigs vaccinated with a subunit or an attenuated vaccine against classical swine fever

Ten pigs, aged 85 days, were vaccinated with a subunit vaccine containing 32 g of classical swine fever virus glycoprotein E2 (gp E2) (group 1), and a further 10 pigs were vaccinated with a C strain vaccine (10^4±0.15 TCID₅₀/ml), produced by amplification in minipig kidney (MPK) cell culture (group 2). Nine non-vaccinated pigs served as a control group (group 3). Serum samples were collected before (day 0) and at 4, 10, 21 and 28 days after vaccination and were analysed by two commercially available enzyme immunoassays and by a neutralizing peroxidase-linked assay (NPLA). At the same times, peripheral blood was taken for determining the total leukocyte count and the body temperature was taken daily. Antibodies were not detected in serum samples collected before vaccination (day 0), and no side-effects that could be connected with vaccination were observed during the trial. Ten days after vaccination 6/10 pigs vaccinated with the subunit vaccine were seropositive. On days 21 and 28, the ratios of serologically positive to vaccinated pigs were 9/10 and 10/10, respectively. Four of the ten pigs that were vaccinated with the C strain vaccine were positive on day 21 and 9/10 on day 28. However, the results of the NPLA showed that only 4/10 pigs had an antibody titre >1:32 at the end of the trial in both the vaccinated groups, even though the subunit vaccine initiated an earlier and higher level of neutralizing antibodies than the vaccine produced from the C strain. Challenge was performed 28 days after vaccination on four randomly selected pigs from both vaccinated groups. The pigs survived the challenge without showing any clinical signs of classical swine fever (CSF), while two nonvaccinated control pigs died on the 10th and 12th days after infection.     

茶园生态系统服务功能

茶园生态系统是农业生态系统的组成之一，茶树及其间作植物与环境既有矛盾的一面，又有统一的一面，两者构成一个有机的整体。生物体必须与它的环境条件相适应才能生存和发展这一基本原理，无论自然生态系统或茶园生态系统都是一致的。人们认识到，茶园生态系统不仅向人类提供茶叶、其他的一些副产品，如水果、蔬菜、药材和家禽、家畜等，更重要的是它也维持了地球生命支持系统，即涵养水源、改良土壤、防止水土流失、减轻自然灾害、调节气候、净化环境、孕育和保存生物多样性等功能，以及具有观赏园林价值、展示传统文化、旅游休憩等社会功能。文中论述了茶园的生态服务功能、经济服务功能、社会服务功能。     

猪瘟病毒的分离鉴定及其E2基因序列分析

2004~2005年上海和江苏3家猪场发生仔猪急性死亡,用ELISA鉴别试剂盒证明为猪瘟感染。用PK15细胞分离病毒,传代至第3代无细胞病变,RT-PCR扩增E2基因为阳性,扩增片段经纯化后克隆入T载体并进行序列测定。通过DNAStar软件对3株病毒的基因序列进行了比较,同时构建了系统进化树,结果表明,三株病毒分离株均扩增出269bp片段并且核苷酸序列100%同源,这3株与Alfort、Shimen株、兔化弱毒株(HCLV)和Brescia4个标准毒株核苷酸序列同源性均在90%以上,说明在江苏、上海地区分离得到的3株猪瘟病毒与流行毒株在基因序列上没有发生大的变异。     

用荧光定量RT-PCR方法检测猪瘟病毒

为了建立能特异检测不同基因型猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV),同时又能区分其他瘟病毒的基因检测方法,本实验针对CSFV基因组5′端非编码区设计并合成了简并引物和TaqMan探针,在优化反应条件的基础上,成功地建立了特异检测CSFV的荧光定量RT-PCR检测方法。再以已知滴度的CSFV石门株血毒总RNA反转录产物建立标准品,该标准品可以用于定量临床样品中的CSFV滴度,所建立的荧光定量PCR方法可以灵敏地检测出10~(-0.82)个TCID_(50)病毒含量。最后用建立的方法对108份临床样品进行检测并同时进行病毒分离,荧光定量PCR方法检测出73份阳性样品且与病毒分离的符合率为100%,而常规RT-PCR只检测出54份阳性样品,表明本荧光定量RT-PCR法在检测猪瘟病料上具有潜在的应用价值。