全文获取类型
收费全文 | 9328篇 |
免费 | 503篇 |
国内免费 | 873篇 |
专业分类
林业 | 1033篇 |
农学 | 678篇 |
基础科学 | 644篇 |
1114篇 | |
综合类 | 3783篇 |
农作物 | 544篇 |
水产渔业 | 333篇 |
畜牧兽医 | 1749篇 |
园艺 | 372篇 |
植物保护 | 454篇 |
出版年
2024年 | 53篇 |
2023年 | 186篇 |
2022年 | 301篇 |
2021年 | 321篇 |
2020年 | 345篇 |
2019年 | 399篇 |
2018年 | 239篇 |
2017年 | 368篇 |
2016年 | 449篇 |
2015年 | 423篇 |
2014年 | 506篇 |
2013年 | 505篇 |
2012年 | 706篇 |
2011年 | 721篇 |
2010年 | 500篇 |
2009年 | 569篇 |
2008年 | 458篇 |
2007年 | 561篇 |
2006年 | 427篇 |
2005年 | 369篇 |
2004年 | 317篇 |
2003年 | 289篇 |
2002年 | 204篇 |
2001年 | 207篇 |
2000年 | 183篇 |
1999年 | 141篇 |
1998年 | 128篇 |
1997年 | 107篇 |
1996年 | 125篇 |
1995年 | 89篇 |
1994年 | 92篇 |
1993年 | 76篇 |
1992年 | 68篇 |
1991年 | 65篇 |
1990年 | 62篇 |
1989年 | 56篇 |
1988年 | 33篇 |
1987年 | 19篇 |
1986年 | 16篇 |
1985年 | 2篇 |
1984年 | 3篇 |
1983年 | 3篇 |
1982年 | 4篇 |
1980年 | 2篇 |
1978年 | 3篇 |
1977年 | 1篇 |
1973年 | 1篇 |
1963年 | 1篇 |
1962年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 31 毫秒
1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
2.
3.
为了解新疆马疱疹病毒1型(EHV-1)主要毒力基因遗传进化情况并构建TK基因缺失株,本研究以EHV-1 XJ2015株DNA为模板,对其主要毒力基因TK、gI和gE全长进行克隆、测序及生物信息学分析,并扩增TK基因左右重组臂TKL和TKR,构建质粒pUC-TKLR,将扩增后的增强绿色荧光蛋白(EGFP,含有CMV+polyA)插入pUC-TKLR质粒,构建TK基因缺失打靶质粒。TK、gI和gE基因同源性分析结果显示,XJ2015株与国外EHV-1分离株TK、gI和gE基因同源性均较高,分别为99.8%~100.0%、99.6%~100.0%和99.9%~100.0%;与EHV-3分离株同源性均最低,分别为72.9%、59.4%和62.1%;遗传进化分析显示,3个基因均与国外EHV-1同属于一个遗传进化分支,与EHV-9和EHV-4进化关系较近,但与EHV-3进化关系较远,表明XJ2015毒株与国外EHV-1毒株TK、gI、gE基因核苷酸上差异不明显,没有明显的地域性特征,功能基因保守且进化缓慢,同源基因功能相同或相近;经PCR扩增、酶切、测序及转染鉴定,本试验成功构建了用于TK基因缺失的打靶质粒pUC-TKLR-EGFP。通过对EHV-1主要毒力基因的分析及TK基因缺失打靶载体的构建,为新疆地区马鼻肺炎流行病学调查分析、TK基因缺失株的构建提供理论依据。 相似文献
4.
5.
6.
7.
南方山区草地资源的类型及开发利用途径 总被引:4,自引:1,他引:3
根据生态学的基本原理,对我国南方山区草地资源的特点进行了分析,从生态学类型上对该地区草地进行了划分,进而提出了南方山区草地开发利用的途径。 相似文献
8.
分泌抗鸡Ig单抗杂交瘤细胞系的建立与单抗生物学特性的鉴定 总被引:7,自引:0,他引:7
从传染性法氏囊病病毒(IBDV)单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系1D10、1G1中得到了3株能稳定分泌抗鸡免疫球蛋白(Ig)McAb的杂交瘤细胞系1B7、1D7、3G6。其抗体类和亚类均属IgG2b,腹水的ELISA效价≥1∶25600,琼扩效价为1∶8~1∶16。3株McAb能与鸡血清中的Ig出现沉淀反应,琼扩在24h以内出现清晰的沉淀线,而不能和鸭、鸽、鹌鹑等禽类及异种动物血清出现沉淀线。纯化的鸡IgG、IgM经SDS-PAGE后,分别用纯化并经辣根过氧化物酶(HPR)标记的1B7、1D7、3G6单抗酶结合物进行免疫印迹试验证明,3株单抗识别的均为IgG、IgM分子的轻链 相似文献
9.
10.