Tumor necrosis factor-alpha enhances Haemophilus somnus lipooligosaccharide-induced apoptosis of bovine endothelial cells

Haemophilus somnus lipooligosaccharide (LOS)-induced apoptosis of bovine pulmonary artery endothelial cells has been shown previously to be dependent on capsase-8 activation. Activation of caspase-8 can occur via a death receptor-dependent mechanism (e.g., TNF- binding to TNF- receptor 1 (TNF-R1)). In this study, we tested the hypothesis that TNF- can enhance LOS-induced apoptosis of bovine endothelial cells. Addition of exogenous recombinant human TNF- alone failed to cause apoptosis, or enhance LOS-induced apoptosis, of bovine endothelial cells. However, blocking de novo protein synthesis by addition of cycloheximide significantly enhanced apoptosis of bovine endothelial cells by TNF-, LOS or TNF- and LOS in combination. Conversely, addition of soluble recombinant human (sTNF-R1) diminished LOS-induced apoptosis. Overall, these data suggest that LOS-mediated apoptosis may be due, in part, to activation of a TNR-R1-dependent death pathway.     

2个多年生花生品种低温胁迫下活性氧代谢特性研究

不同低温胁迫下对平托花生Arachis pintoi与蔓花生A.duranensis2个多年生花生品种进行的叶片活性氧代谢与质膜特性进行研究。结果表明,A.duranensis品种无论在超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)还是过氧化氢酶(CAT)相对活性在低温胁迫下均不低于或显著高于A.pintoi,表现出相对较高的清除自由基能力;其质膜相对透性(RPP)增加幅度明显小于A.pintoi;丙二醛(MDA)相对含量增加率则表现出相反趋势;表明A.duranensis具有更强的抗寒性。     

Elevated levels of fragmented laminin-5 gamma2-chain in bronchoalveolar lavage fluid from dogs with pulmonary eosinophilia

Inflammation causes epithelial cell sloughing and basement membrane (BM) exposure in canine pulmonary eosinophilia (PE), leading to degradation of the epithelial cell attachment component, laminin-5 gamma2-chain, into small molecular weight fragments. The subsidence of inflammation after treatment down-regulates degradation. Laminin-5 gamma2-chain levels and molecular forms in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were analysed semiquantitatively by Western immunoblotting to compare PE affected (n=20) and healthy dogs (n=16) as well as PE dogs (n=6) before and after corticosteroid treatment. PE dogs expressed significantly elevated levels of total (P<0.01), 36 kDa (P<0.05) and 53 kDa (P<0.05) laminin-5 gamma2-fragments. The 36 Da fragment decreased significantly (P<0.05) after treatment. The laminin-5 gamma2-chain degradation products may be linked to epithelial cell sloughing and BM exposure or healing.     

拟南芥BOI 基因在抗氧化胁迫和细胞死亡中的功能分析

 本文利用BOI(Botrytis Susceptible 1 Interactor)基因敲减(knock-down) 株系、过量表达株系以及烟草瞬时表达系统,研究了BOI 基因在细胞程序化死亡(PCD)中的作用以及BOI 蛋白中RING 和WRD 结构域的功能。结果表明,BOI 基因的表达下调导致抗氧化胁迫能力下降,弱化了对活性氧介导的PCD 抑制作用;BOI 过量表达或瞬间表达可以增强对活性氧介导和α-吡啶甲酸诱导的PCD 的抑制作用。进一步研究发现,BOI 蛋白中的RING 结构域是BOI 抑制PCD 所必需的,WRD 结构域与BOI 对PCD 的抑制作用关系不大。     

大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏组织原代培养的研究

应用组织块培养法,研究了大泷六线鱼Hexagrammos otakii鳍、吻端和肾脏细胞在含有体积分数为20％胎牛血清(FBS)的L-15、DMEM和DMEM/F12 3种培养基中的生长情况,以及人碱性成纤维细胞(bFGF)、硫酸软骨素、Ⅰ型胰岛素样(IGF-Ⅰ)3种生长因子对细胞贴壁率和迁出率的影响.结果表明:大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏细胞适宜的体外培养体系为DMEM/F12培养基+20％ FBS,pH为7.2,温度为25℃;在最适培养基中分别添加5.0 ng/mL bFGF、20 μg/mL硫酸软骨素、40 ng/mL IGF-Ⅰ时,3种组织的贴壁率和细胞迁出率均最高;鳍、吻端和肾脏组织分别经培养21、15、18 d后长满单层,主要为成纤维样细胞;采用低渗滴片法制备染色体,3种组织原代细胞的染色体数目为48条.本研究为大泷六线鱼鳍、吻端和肾脏组织细胞系的构建和生物学特性的研究奠定了基础.     

盐胁迫下植物质膜和液泡膜H+-ATPase活性的研究进展

综述了植物质膜和液泡膜H+-ATPase的结构特征、生理功能和活性变化的研究进展。     

白藜芦醇对HA-VSMC细胞膜电位和钙离子的影响

[目的]研究白藜芦醇对人主动脉血管平滑肌细胞(T/G HA-VSMC)膜电位和游离钙浓度的影响。[方法]用荧光染料DiBAC4(3)和Fluo-3-AM分别标记细胞,在流式细胞仪上分别测定细胞膜电位及胞内游离钙浓度的变化。[结果]给予Res后,HA-VSMC膜电位去极化,胞内游离钙浓度升高。[结论]Res可去极化HA-VSMC细胞膜电位,促进钙内流。     

一种有效分离及在体外扩增成年小鼠精原干细胞的方法

尝试建立一种简便有效的成年小鼠精原干细胞分离培养及扩增的方法。从单只成年小鼠的睾丸中经过两步酶消化法分离精原干细胞,并在去除间质细胞、纯化后的支持细胞饲养层上培养与扩增,获得稳定增殖的精原干细胞系。此方法可显著提高建系成功率,保证细胞系的单一基因型,显著降低体外培养精原干细胞的成本。为成体基因来源的转基因动物的制作和疾病模型的建立提供技术支持。     

河曲马睾丸组织成纤维细胞系的建立及生物学特性研究

采集河曲马睾丸组织,用热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法纯化细胞,扩大培养至第3代用液氮保存,细胞复苏后进行活力、形态、生长曲线、微生物污染、核型、乳酸脱氢同工酶谱及荧光蛋白质粒转染表达等特性研究。结果显示,河曲马睾丸组织原代和传代细胞呈成纤维型,生长良好,最大增殖数量为4.32×105 mL-1,倍增时间为34.58h;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性;染色体2 N=64,二倍体为85%,占主体;乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,共有4条谱带,其中LDH3浓度较高,活性较强;外源质粒在该细胞中能进行复制和表达。表明已成功建立河曲马睾丸组织成纤维细胞系,使河曲马这一重要种质资源在细胞水平上得以保存。     

微透析探针对杨树嫩茎细胞损伤的显微观察

利用微透析技术研究植物汁液成分时,所遇到的首要问题是其透析液来自质外体还是共质体。以冬季水培的吴屯杨和荷兰杨幼苗为材料,采用石蜡切片法,制作微透析探针插入杨树嫩茎后,对嫩茎受损部分横切面组织切片进行显微观察并加以探讨。结果表明,微透析探针的粗度约为杨树细胞直径20倍,探针对周围细胞造成一定程度的破坏,因此,探针插入杨树嫩茎后开始一段时间内收集的透析液将受到破损细胞液的污染,随着微透析时间的推移,逐渐地趋近于质外体汁液。对微透析技术可以获得植物质外体汁液从细胞显微结构变化方面予以解释,为微透析技术在植物质外体研究中的应用奠定细胞学基础。