Comparative study on dietary protein requirements for juvenile and pre‐adult gibel carp (Carassius auratus gibelio var. CAS III)

Two 8‐week growth trials were conducted in indoor recirculation system to evaluate the protein requirements for juvenile (3.70 ± 0.20 g) and pre‐adult (85.2 ± 0.70 g) gibel carp, Carassius auratus gibelio var. CAS III. Six isoenergetic diets were formulated for each trial using fish meal and casein as protein sources, and protein level was 250–450 g kg^?1 in Trial 1 and 200–450 g kg^?1 in Trial 2. With the increasing dietary protein, feeding rate (FR) and feed conversion ratio (FCR) significantly decreased (P < 0.05). Weight gain (WG) increased first and then reached a plateau in 330–450 g kg^?1 in Trial 1 (P > 0.05), while decreased after the maximum value in 350 g kg^?1 in Trial 2 (P < 0.05). Productive protein values (PPVs) were lower in 370–450 g kg^?1 in Trial 1 and 400–450 g kg^?1 in Trial 2 (P < 0.05). Increasing dietary protein level increased protein content and decreased lipid content in whole fish body and white muscle (P < 0.05). Apparent digestibility coefficient of dry matters (ADC_d) decreased, while apparent digestibility coefficient of protein (ADC_p) increased in 370–450 g kg^?1 in Trial 1 and 250–450 g kg^?1 in Trial 2 (P < 0.05). Trypsin activity significantly increased in 370–450 g kg^?1 in Trial 1 (P < 0.05) and was not affected in Trial 2 (P > 0.05). Hepatic alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) activities in both trials increased when dietary protein was above 400 g kg^?1 (P < 0.05). Based on quadratic regression of WG, it was estimated that dietary protein requirement for maximum growth was 414 g kg^?1 (digestible protein of 376 g kg^?1) and 365 g kg^?1 (digestible protein of 324 g kg^?1) for juvenile (3.70 g) and pre‐adult gibel carp (85.2 g).     

草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白在毕赤酵母中表达的初步研究

根据GeneBank中草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)104株VP6蛋白的全基因序列(HM234682)设计一对特异引物,以提取的GCRV-104核酸为模板,采用RT-PCR技术扩增VP6蛋白编码基因,并将其克隆到含强启动子AOXⅠ的毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZB上。重组酵母质粒pPICZB-VP6经SacⅠ线性化,电击转化到毕赤酵母KM71菌株中,Zeocin抗性平板上筛选高拷贝转化子。阳性转化子在30℃,0.5%(V/V)的甲醇添加量的条件下,连续诱导3 d,表达产物经SDS-PAGE和Western-Blotting检测,结果表明成功实现了GCRV-104 VP6蛋白在毕赤酵母中的胞内表达,重组VP6蛋白相对分子质量约46 000,与天然VP6蛋白相对分子质量接近,并且可与鼠抗草鱼GCRV-104 VP6蛋白的多克隆抗体特异性结合。     

草鱼mst2在免疫应答中的作用机制

为了初步阐明草鱼哺乳动物STE20样蛋白激酶2基因(mammalian sterile 20-like kinase 2, mst2)在机体免疫中的作用机制,实验采用RNA-Seq技术对干扰mst2后经脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)应激的草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idella kidney cell lines,CIK)进行了转录组测序与验证分析。测序原始数据经De novo拼接与组装后共获得22 374个独立功能基因(unigenes),其中已知功能基因为21 199个,预测的新基因为1 175个。干扰mst2后经LPS应激的unigenes表达差异分析表明,对照组与实验组之间共存在38个差异基因(differentially expressed genes,DEGs),其中上调基因16个,下调基因22个。利用实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)对38个DEGs的RNASeq结果进行验证,结果显示,qRT-PCR和RNA-Seq分析一致,说明RNA-Seq分析结果可靠。采用RNA干扰技术干扰mst2后经LPS处理,CIK细胞转录组中DEGs参与免疫代谢的途径主要有MAPK信号通路、内吞作用途径、自噬途径和细胞因子受体相互作用途径。凋亡相关基因检测结果显示,干扰mst2并经LPS处理后,促凋亡基因(fas、bad1、bad2、caspase-3、caspase-8和caspase-9)转录水平上调,抗凋亡基因(bcl2)转录水平下调,证明干扰mst2后经LPS处理会诱发细胞发生凋亡。综上所述,mst2可通过调控凋亡相关过程参与机体免疫反应。本研究结果初步阐明了草鱼mst2参与机体免疫应答的分子机理,可为草鱼细菌性疾病防控提供一定的基础理论参考。     

异精雌核发育草鱼F1与普通草鱼的SCAR标记鉴别初报

以赤眼鳟生理失活精子诱导的雌核发育草鱼F1群体(CC)和与之母本同源的普通草鱼群体(PC)为材料,采用RAPD和SCAR分子标记相结合的技术,在100条RAPD随机引物扩增的16条有效引物中扩增筛选出7条群体差异条带,其中1条为异精雌核发育草鱼群体中特有,其余均表现为异精雌核发育草鱼群体缺失;对7条RAPD特异条带的回收中仅得到S32和S336的特异条带。经回收、克隆、测序后根据序列信息设计了4对SCAR引物,其中S336的2对SCAR引物在两群体间扩增出的条带一致,特异性消失;S32的2对SCAR引物能扩增出两群体间的特异条带;对S32-Scar1F/S32-Scar1R扩增出的SCAR标记S321643进行大样本检测结果表明:该标记在异精雌核发育草鱼群体中的出现频率为0(0/55),在普通草鱼群体中出现频率为76.7%(46/60)。     

Technical efficiency of carp production in Nepal: An application of stochastic frontier production function approach*

Abstract

Modern aquaculture is a relatively new activity among Nepalese farmers and a small contributor to the economy. Given the abundance of water resources and fish species, rising demand for fish, and its high profitability, aquaculture has potential for future expansion if it is given appropriate attention from the government. In Nepal, productivity in aquaculture is much lower compared to other countries in the region, which suggests that there is potential for increased fish production through technological progress and improvement in farm‐level technical efficiency. However, no formal analysis has yet been conducted to assess the productive performance of Nepalese aquaculture and its potential for future improvement. Against this background, this paper examines the technical efficiency and its determinants for a sample of fish pond farms from the Tarai region of the country using a stochastic production frontier involving a model for technical inefficiency effects. The estimated mean technical efficiency is 77%, with intensive farms being more efficient than extensive farms. The adoption of regular fish, water, and feed management activities has a strong positive effect on technical efficiency.     

鲢鳙占优势的千岛湖浮游动物群落结构特征及其与环境因子的相关性

为了解以鲢鳙占优势的千岛湖中浮游动物群落结构特征以及与水温、溶解氧等环境因子的关系,采用方差分析、典范对应分析等方法,对千岛湖河流区、过渡区、湖泊区3个地区的浮游动物种类、数量以及环境因子的月变化特征进行了调查。结果表明:2007—2008年,共鉴定出浮游动物115种,其中原生动物16种、轮虫51种、枝角类23种、桡足类25种。浮游动物密度在春季(2007年:840.9/L,2008年:850.5/L)形成高峰;生物量在春季(2007年:1.89mg/L,2008年:0.837 mg/L)和秋季(2007年:1.63 mg/L,2008年:0.802 mg/L)形成双高峰;现存量从河流区至湖泊区依次递减。河流区和过渡区的浮游动物密度均于4 m水层达最大值,湖泊区于8 m水层达到最大值。各位点4～12 m水层的大型浮游甲壳动物优势种透明溞、蚤状溞、球状许水蚤等和小型浮游甲壳动物优势种长额象鼻溞、颈沟基合溞、台湾温剑水蚤等的生物量较高。原生动物、桡足类生物量与溶解氧显著正相关;轮虫、枝角类生物量与总氮、硝态氮、浮游植物生物量极显著正相关。典范对应分析(CCA)表明,溶解氧、温度、总氮、总磷、硝态氮是影响浮游动物时空分布的主要因子。透明溞在2—6月份主要受到以浮游植物为食物的上行效应的影响较大,而其他月份主要受水温的影响较大。     

用IGF—ⅠmRNA表达量评价鲮饲料配方效果的研究

试验以秘鲁鱼粉为饲料蛋白源,研究4种蛋白水平（21．5％、32．2％、42．5％和51．6％）的饲料对鲮（Cirrhinus molitorella）生长、消化酶活性及类胰岛素生长因子（IGF—Ⅰ）mRNA表达水平的影响。经过8周的养殖试验,不同饲料蛋白水平下,蛋白酶活性与特定生长率（SGR）成极显著的正相关性（P〈0．01）;鲮肝组织中IGF—ⅠmRNA的表达量与特定生长率成极显著正相关性（P〈0．01）;鲮肝组织IGF—ⅠmRNA的表达量与蛋白酶活性也成极显著正相关性（P〈0．01）。结果表明,用鲮肝组织IGF—ⅠmRNA的表达量可以快速鉴定饲料的质量。     

牛磺酸对鲤鱼诱食活性的初步研究

用牛磺酸作为诱食剂,以0.2%、0.4%、0.6%、0.8%的剂量将牛磺酸添加到基础饵料中,以基础饵料为对照,以鲤鱼为对象进行诱食活性试验,用one-way ANOVA检验统计分析,结果表明:牛磺酸对鲤鱼有明显的诱食作用,其中0.4%组诱食效果最佳,极显著地高于对照组(P<0.01)。     

鲤鱼种间、种内杂交中杂种优势强度表现的某些规律的初步研究

从1986年至1990年于我所松浦试验场,用黑龙江野鲤、荷包红鲤、兴国红鲤、红镜鲤、散鳞镜鲤、德国镜鲤和柏氏鲤进行了种间、种内14个组合的杂交,系统观察了不同组合亲本和杂种F_1在鳞被、体色、体型、生长、成活率、抗寒力、抗病力和起捕率等8个性状的遗传传递规律及其杂种优势强度,结果是.(1)鲤鱼种内异源杂交几乎所有的杂交组合的杂种F_1都表现出生长优势和对环境抗性的增强,其大小随亲本的亲缘远近和鳞被、体色、体型等性状间的差异而不同。一般品系间杂交,杂种生长的优势率在10％左右;品种间杂交,单交种的生长优势率在15—30％,三杂交种的生长优势率在30％以上。在抗寒、抗病、成活率等抗性上,表现出受其中一个亲本的影响,且有明显的母本效应,并可遗传传递给杂种后代。鳞被、体色、体型的基因效应,对杂种的生长有明显的促进作用。(2)鲤鱼种间杂交几乎不表现杂种优势,其特点:是柏氏鲤和黑龙江野鲤两个野生种间杂交,成活率、抗寒力强烈的表现不亲和性;而柏氏鲤与家养种间的杂交,表现一定的亲和性。亲本和杂种F_1的鳞被、体色仍表现显隐性关系,而体型、抗寒、抗病、成活率、起捕率等受柏氏鲤种质的强烈影响。获得抗寒力的杂种,在第二代时抗寒力明显消失,说明基因转移和整合的不稳定性。用柏氏鲤与散鳞镜鲤杂交的杂种F_1与另一抗寒很强的杂种F_1(黑龙江野鲤♀×红镜鲤♂)的双杂交种F_1,抗寒明显增强。     

复合益生菌对草鱼养殖水体水质和菌群结构的影响

为研究草鱼养殖水体中添加复合益生菌水质调节剂对水体水质和菌群的调节作用,实验采用氮磷等指标监测水质,采用454焦磷酸盐测序方法分析菌群结构,结果显示,处理组的氨氮、亚硝酸盐氮和总氮浓度一直低于对照组,但差异不显著;处理组硝酸盐氮浓度低于对照组,且在18d下降了56.59％;处理组的总无机氮含量低于对照组,且在15d下降了28.75％.处理组正磷酸盐和总磷浓度略低于对照组,无显著差异.15 d水样的454焦磷酸盐测序结果与对照组相比,处理组菌群多样性更高,厚壁菌门和变形菌门分别减少了91.21％和21.75％,拟杆菌、放线菌和蓝细菌分别增加了288％、435％和848％.在变形菌门中,α-变形杆菌和β-变形杆菌分别比对照组提高了318％和18％,γ-变形杆菌比对照组降低了78.82％.研究表明,该复合益生菌具有一定水质调控功能,且能显著改变菌群结构.