新疆加工番茄上南方番茄病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达

【目的】克隆南方番茄病毒(STV)的外壳蛋白(CP)基因,构建其原核表达载体并进行诱导表达,为制备检测该病毒的高效价血清提供参考。【方法】利用一步法RT-PCR从新疆加工番茄上克隆STVCP基因,将其连接到原核表达载体pET-28a(+)上,获得重组质粒pET-28a-STV CP。将重组质粒转化大肠杆菌BL21后用IPTG进行诱导表达。【结果】成功克隆了STVCP基因,其长度为1 134bp。构建了原核重组表达质粒pET-28a-STV CP,其在1mmol/L IPTG诱导下,成功表达出分子质量约47ku的蛋白。【结论】成功克隆了STV CP基因,并诱导了pET-28a-STV CP重组蛋白的原核表达。     

发芽糙米的开发及其技术运用

近年,由于日本人饮食习惯的急速的西方化,过去较少见的癌症、心脏病、糖尿病等疾病日益激增。以附加功能性于大米为目的,2001年开发出了采用浸泡式工艺的发芽糙米,发芽糙米所含GABA对高血压及糖尿病等生活习惯病具有预防效果。通过将富含发芽糙米的功能性成分之一的GABA附加于免淘洗米,开发出功能性免淘洗米（免淘洗GABA米）。利用功能性液化液,制成具有降压等作用的免淘洗功能性包膜米。同时,利用发芽糙米等为功能性原料可开发一系列深加工产品。     

苏丹草种子半透层定位与透性研究

通过硝酸镧示踪、透射电镜观测和X射线能量色散分析等技术,对苏丹草种子半透层的位置和透性进行了研究.从解剖学角度证明了苏丹草种子存在半透层,该组织位于糊粉层内侧紧靠未分化细胞处,对水分通透性好,但阻挡电解质渗出和镧盐渗入.老化对种子膜系统有一定损伤,但对半透层并无显著影响.     

CP基因遗传转化甘蔗品种Badila与福农91-4621的抗病性差异分析

利用含甘蔗花叶病病毒E株系外壳蛋白基因(CP)的质粒pUbi-SCMV-CP,用基因枪轰击法遗传转化不同甘蔗品种,所获得的转基因无性系经过3代的抗病性鉴定和H2O2代谢的分析.结果表明,Badila(TB1)转基因植株具有较强的抗花叶病能力,而福农91-4621在转基因无性系T1、T2中表现出较强的抗病性,但在T3中其抗病性开始退化,发病率高达68%;抗病生理分析表明,转基因无性系的抗病性与H2O2清除和积累有关.经RT-PCR克隆和测序分析,福农91-4621所感染的SrMV-H的CP基因氨基酸序列与转化的SCMV-E的同源性较低,仅为73.2%,福建Badila所感染的是SCMV-D,与SCMV-E同源性高达97.8%.说明CP基因对本身所来源的病毒或是与原病毒亲缘关系较近的病毒可能具有较强的抗性,而对同属于SCMV的其他病毒虽有抗性,但抗性较弱,且随着转基因世代数的增加而降低.     

蚕豆染色病毒CPS基因的序列测定及RT-PCR检测方法的建立

 The nucleotide sequence of small coat protein (CPS) gene of Broad bean stain virus (BBSV) was determined and compared with other comoviruses. The CPS gene of BBSV consisted of 687 nucleotides and encodes a putative protein of 228 amino acid residues. The CPS sequence of BBSV and those of other comoviruses shared identities of 36.5%-58.9% and 35.2%-70.3% at the nucleotide and amino acid levels, respectively. The RT-PCR method specific for BBSV detection was developed based on the determined CPS sequence. The RT-PCR assay presented here allows, for the first time, rapid and specific detection of BBSV.     

芥菜型油菜黄黑种皮多酚差异的紫外-可见光谱研究

以芥菜型自交系黄黑油菜种皮为材料,研究了其多酚提取液的紫外-可见吸收光谱, 测定了芥菜型油菜黄黑种皮样以没食子酸和茶儿茶素标准计的多酚含量,发现黄种皮的多酚含量约为黑种皮的90%,显著区别于甘蓝型油菜的10%,因此多酚含量高可能是芥菜型黄籽油菜性状稳定的根本内因。基于香草醛试验,推测黑种皮中含有3-OH的黄烷醇类多酚,而黄种皮中没有。基于加入位移试剂后特征吸收谱带Ⅰ与Ⅱ的位移方向与大小,推测黄酮醇类多酚A环在黄种皮中可能主要为单酚羟基,而在黑种皮中可能主要为邻二酚羟基结构。这种多酚分子的结构差异可能是形成芥菜型油菜黄黑种皮色泽差异的主要原因。     

合肥地区发生的西瓜花叶病的病原鉴定

 从合肥市郊区的西瓜病叶上分离出一病毒分离物,该分离物的热钝化温度为60~65℃,稀释终点为10^-4~10^-5,寄主体外存活期为20~23 d,电镜观察病毒粒子约750 nm×13 nm。参考已发表的小西葫芦黄化花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV) CP基因序列设计引物,RT-PCR扩增得到CP基因片段。将该CP片段克隆到pGEM-3Zf (+)中,测序结果表明,该CP基因全长840 nt,共编码279个氨基酸,与国内报道的ZYMV CP基因的核苷酸序列同源性为83.0%~97.3%,氨基酸序列的同源性为91.8%~99.8%,证明该分离物为ZYMV。     

淀粉包被剂对肉牛玉米淀粉保护效果的研究

研究了淀粉包被剂对玉米淀粉保护的效果。试验采用对比试验的方法 ,4头杂交肉牛均供给 1 2倍维持的羊草 ,结果表明 :淀粉包被剂处理玉米淀粉与未处理玉米淀粉相比 ,瘤胃液TVFA浓度和丙酸摩尔比下降 ,乙酸摩尔比提高 ;DM、OM、NDF和ADF消化率有显著或极显著地增加 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ,HC消化率极显著下降 (P <0 0 1 ) ,沉积N量 (g/d)和RN/DN增加 ,淀粉消化率无差异 ;DE、ME、NEg、Kf、体蛋白和体脂肪沉积量均有极显著的提高 (P <0 0 1 ) ;血糖、血液中生长激素、总蛋白、肌酐和甘油三酯有所提高 ,血液尿素氮浓度有所下降。本研究充分说明了增加小肠中可消化淀粉的数量有利于肉牛N沉积、能量沉积和Kf值的提高     

美洲水貂TYR基因编码蛋白结构及功能的生物信息学分析

为进一步探明美洲水貂酪氨酸酶(TYR)基因的结构和功能信息,对美洲水貂TYR基因编码蛋白进行生物信息学分析,同时构建TYR基因的系统发育树。结果表明:美洲水貂TYR基因共编码531个氨基酸,其编码产物为不稳定的亲水蛋白;二级结构主要以α-螺旋和无规卷曲为主,含有1个酪氨酸酶超家族结构域,存在信号肽、跨膜结构域和二硫键;该蛋白主要在内质网中发挥细胞被膜、运输和结合的作用,同时还通过信号转导在细胞内发挥其生物学作用;系统进化情况和动物分类学基本一致,美洲水貂TYR基因与雪貂、家犬的亲缘关系最近。美洲水貂TYR基因编码蛋白在生物进化中具有较强保守性,该基因结构和功能的分析为水貂TYR基因遗传特性的进一步研究奠定了基础。     

发芽糙米的开发及其技术运用

近年,由于日本人饮食习惯的急速的西方化,过去较少见的癌症、心脏病、糖尿病等疾病日益激增。以附加功能性于大米为目的,2001年开发出了采用浸泡式工艺的发芽糙米,发芽糙米所含GABA对高血压及糖尿病等生活习惯病具有预防效果。通过将富含发芽糙米的功能性成分之一的GABA附加于免淘洗米,开发出功能性免淘洗米(免淘洗GABA米)。利用功能性液化液,制成具有降压等作用的免淘洗功能性包膜米。同时,利用发芽糙米等为功能性原料可开发一系列深加工产品。