赤霉素、光照及基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响

【目的】完善花生离体再生繁殖体系,为花生的遗传转化提供技术支持。【方法】以桂花系列花生品种为材料,以胚小叶为外植体,MS＋10mg/L2,4-D为体细胞胚诱导基本培养基,MS＋3mg/L6-BA＋0.8mg/LNAA＋（0～15mg/L）GA3为苗诱导基本培养基,研究光照、赤霉素和基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响。【结果】在光暗比14∶10条件下,花生体细胞胚诱导率明显高于全黑暗培养,体细胞胚诱导率增加7.5～37.5个百分点。在不同花生品种中,桂花26体细胞胚诱导率最高,达62.8%,桂花833最低,为21.7%。在成苗培养基中添加5～15mg/LGA3利于提高体细胞胚的成苗率。桂花26和桂花771在5mg/LGA3处理下成苗率最高,分别为42.8%和35.3%;桂花836、桂花1026、桂花833在15mg/LGA3作用下成苗率最高,分别为38.7%、33.3%、26.4%。所有品种与GA3组合中,以桂花26与5mg/LGA3组合成苗率最高,其次是桂花836与15mg/LGA3组合。【结论】适宜的光照条件有利于花生体细胞胚的发生;成苗培养基中添加GA3利于促进体细胞胚诱导成苗;桂花26和桂花836是体细胞胚诱导植株再生较理想的材料。     

菊科植物成花诱导及开花的研究进展

成花诱导和开花是显花植物发育中最为关键的阶段,对影响菊科植物成花诱导和开花的许多相关因素．如外植体的选择、光照和温度．以及6-BA、NAA、乙烯等植物生长调节物质等的研究进展作了重点评述。     

雄黄兰花蕾离体培养技术探讨

以雄黄兰花蕾为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同浓度的BA、NAA等激素,探讨外源激素对其愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响,并建立了微繁体系;通过采取不同驯化炼苗措施,总结了一整套炼苗与栽培技术。试验表明：选用MS＋6-BA2.0mg.l-1＋NAA0.2 mg·l^-1培养基,其外植体诱导率达84.4%,不定芽诱导率达68.2%,选用MS＋6-BA2.0mg·l^-1的培养基进行增殖培养,可得到优良的雄黄兰小种球,球茎增殖系数达4.9;在1/2MS培养基中培养15d,球茎生根率达98%;瓶苗常规驯化后选用国产泥炭土炼苗,成活率在90%以上;冬末春初繁殖的生根苗定植大田后当年开花。     

救必应水提物与抗菌药联用对产ESBLs细菌的抑制效果

【目的】探讨救必应水提取物与抗菌药联合诱导细菌传代的体外抑菌活性,为救必应的综合开发利用提供参考依据。【方法】采用96孔反应板二倍微量稀释法体外检测救必应水提取物与抗菌药的最小抑菌浓度（MIC）,并以1/2 MIC的救必应水提取物与抗菌药联合诱导产超广谱β-内酰胺酶（Extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）细菌传代,然后用微量棋盘稀释法测定救必应水提取物与抗菌药联合作用后的部分抑菌浓度指数（FICI）。【结果】救必应水提取物的MIC为1.0 g/mL,以0.5g/mL的救必应水提取物与阿莫西林、左氧氟沙星、克林沙星、磺胺间甲氧嘧啶、加替沙星、头孢噻呋钠6种抗菌药联合诱导产ESBLs细菌传代后MIC显著降低,联用后的FICI分别为0.375、0.750、0.750、0.515、0.750和0.750。【结论】救必应水提取物可明显增强抗菌药对产ESBLs细菌的抗菌活性,且呈协同或相加作用。     

哈密大枣叶片不定芽再生体系研究

建立哈密大枣叶片离体再生体系,为遗传转化奠定基础.采用哈密大枣叶片为外植体,研究基本培养基、激素浓度、暗培养时间、AgNO3等因素对离体叶片不定芽诱导的影响,并获得再生植株.MS、NN69、WPM三种培养基相比较,NN69更适合做为诱导愈伤组织的基本培养基;TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于 BA;再生培养基中添加1 mg/L AgNO3对不定芽的形成有显著的影响（P ＜0．05）;培养初期经过2周避光培养更有利于提高再生效率;采用10 mg/L维生素 C浸泡15 min可以防止褐化,并能提高不定芽再生率;培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或者维生素C,不定芽再生率无显著提高（P ＞0．05）;培养基添加活性炭（AC）会抑制外植体的分化.叶片在 NN69＋1．0 mg/L TDZ＋0．20 mg/L IBA＋AgNO31．0 mg/L培养基上,暗培养2周后转入光照培养,出芽外植体转入 MS＋1 mg/L 6GBA＋0．20 mg/L IBA 不定芽再生效果最好.不定芽生长至3 cm 以上时,转至0．40 mg/L IBA的1/2MS培养基上进行诱导生根.     

春小麦空间诱变后代的变异研究

为了进一步探索和研究春小麦空间诱变后代的变异,对经返地卫星搭载纯系小麦龙麦26和克丰10号航天诱变种子种植后选育出的7份品系的农艺性状进行了调查,同时对其DNA多态性进行了分析。结果表明:变异品系较原品种在农艺性状上均有所变异,但差异不显著。变异品系与亲本之间存在着不同程度的微卫星多态性,在有效扩增的27对引物中出现3种突变类型:扩增片段增多、扩增片段减少和扩增片段长度有差异,出现的单一突变类型居多。     

叶底红花芽分化的形态解剖学研究

为了确定叶底红的花芽分化特性,采用改良的石蜡切片法对叶底红花芽分化过程进行形态学观察。结果表明,叶底红的花芽分化过程依次从外向内发育,可分为花序原基分化期、花原基分化期、花萼原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊原基分化期和雌蕊原基分化期。福建漳州地区叶底红的花期从2月份持续到8月份,每轮花芽分化的时间约为30d。     

低温诱导红鳍东方鲀雄性化及性腺分化的组织学观察

为探索无需紫外线照射、无需投喂性激素、操作简单的低温诱导红鳍东方鲀Takifugu rubripes雄性化的新方法,分别在孵化后15、45、75d将鱼苗进行15℃和17℃低温处理65d,以正常培育温度21℃为对照组,设置平行试验组,并对其性比及性别分化的组织学进行了观察。结果表明:(1)在15℃条件下,试验组雄性率最高可达(74.70±2.79)%;在17℃条件下,试验组雄性率最高为(59.60±3.49)%;在21℃条件下,对照组雄性率为(51.57±0.06)%;温度与雄性率呈负相关(R=-0.827),与雌性率呈正相关(R=0.823)。(2)在21℃条件下,对照组孵化后48d时出现卵巢腔,标志着卵巢分化的开始,68d时生殖腺柄部出现裂缝状的输精管原基,标志着精巢开始分化;在17℃条件下,试验组孵化后63d时观察到明显的卵巢腔,83d时出现输精管原基性腺;而在15℃条件下,试验组孵化后73d时出现明显卵巢腔,93d时出现精小叶,标志组织学上的分化。研究表明,随着处理温度的升高,性腺中细胞分裂速度呈线性关系,在一定范围内升温有助于性腺的发育。     

不同发根农杆菌诱导花生发根研究

利用5种发根农杆菌侵染不同花生外植体,对比其发根诱导率,分析寻找利于花生转化的外植体、花生品种及发根农杆菌。结果表明,农杆菌94022诱导发根率较其它发根农杆菌高;后期继代培养中子叶诱导的发根易于培养,存活率高,生长状态好;在用培养后的子叶为外植体时,花育20较其它品种发根诱导率高。     

β-氨基丁酸保护烟草抵抗TMV侵染的研究

[目的]研究B-氨基丁酸（β-amino—butyricacid,BABA）保护烟草增强其抗烟草花叶病毒（TMV）侵染的能力。[方法]以云烟87为材料,分别用O．5、1．0、5．0、7．0、10．0mmol／L的BABA处理烟草,以喷清水为对照,统计BABA对TMV的抑制率,筛选最适BABA浓度。用5．0mmol／LBABA喷施处理,观察烟叶的发病情况,同时用组织化学法鉴定BABA诱导烟草产生的过敏反应,进行H202原住检测以及苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性测定,采用SDS．PAGE检测病程相关（PR）蛋白。[结果]BABA处理后能显著诱导氧进发,引起过敏性反应,烟叶中的PAL活性升高,有分子量为20kDa的PR蛋白出现。烟叶TMV发病率明显减轻,BABA增强了烟草对TMV的抗性,5．0mmol／LBABA能保护烟草抵抗TMV侵染。[结论]为进一步揭示BABA的诱导机理提供了理论依据。