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为将生长快、发酵时间短、遗传操作便捷的稀有放线菌拟无枝酸菌TNS106开发成异源表达宿主,通过同源重组将内源的瑞斯托霉素生物合成关键基因rpsA替换为ΦC31和ΦBT1噬菌体细菌附着位点attB,清除代谢背景并引入整合位点,得到菌株HXR1;将含有来自天蓝色链霉菌的放线紫红素基因簇或来自刺糖多孢菌的多杀菌素基因簇的质粒转到HXR1进行异源表达,检测发酵产物。结果显示,HXR1成功表达放线紫红素和多杀菌素;与红色糖多孢菌宿主LJ161相比,放线紫红素的产生提前1 d,产量提高1.3倍。拟无枝酸菌异源表达宿主HXR1可为从链霉菌和稀有放线菌中发现新的次级代谢产物提供有用的平台。 相似文献
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Aly KAREN árpád Csaba BAJCSY Rosa MINOIA Rezs? KOVáCS Noelita Melo DE SOUSA Jean-Fran?ois BECKERS János TIBOLD István MáDL Ottó SZENCI 《The Journal of reproduction and development》2014,60(2):162-167
The aim of the present study was to determine the relationship of progesterone (P4),
bovine pregnancy-associated glycoprotein-1 (bPAG-1) and nitric oxide (NO) levels with late
embryonic (LEM; day 28 to day 42) and early fetal mortalities (EFM; > day 42 to day 56)
in dairy cows. Transrectal ultrasonography (6–8 MHz) was performed in 100
Holstein-Friesian cows at days 28, 42 and 56 after artificial insemination (AI; day 0) to
diagnose pregnancy and to monitor the fate of the embryo. After ultrasound scanning of
each cow, a milk sample was collected for assessment of P4 by an ELISA test and a blood
sample was collected for assessment of bPAG-1, by using a double-antibody
radioimmunoassay, and serum NO metabolites (nitrate + nitrite). Based on ultrasonographic
examinations and bPAG-1-RIA, 41 of 100 inseminated cows were confirmed pregnant at day 28
after AI. Nine cows suffered of LEM, and 6 cows suffered of EFM and the overall pregnancy
loss rate was 36.6% (15/41) between days 28 and 56 of pregnancy. By logistic regression
analysis, there were no significant relationships between the level of P4 and bPAG-1 at
day 28 after AI and the occurrence of LEM and EFM. Also, there were no significant
relationships between the levels of P4 and bPAG-1 at day 42 and the occurrence of EFM. On
the other hand, a significant relationship (P<0.05) was found between NO level at day
28 and the occurrence of LEM. In conclusion, measurement of the serum NO concentration at
day 28 of pregnancy might help to predict the outcome of pregnancy by day 42 in dairy cows
but further studies are needed to confirm this. 相似文献
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为研究、防控广东地区猪流行性腹泻,首先通过RT-PCR法确定某猪场粪便样品中存在猪流行性腹泻病毒,随后利用Vero细胞进行盲传,最后经核酸类型鉴定、RT-PCR、病毒TCID50的测定、目的基因测序和序列分析等方法,确认分离到2株猪流行性腹泻病毒毒株,命名为PEDV GDKP-2013和PEDV GDKP2-2013,通过ORF3全基因核苷酸序列分析可知,GDKP-2013株与GDKP2-2013株与经典参考毒株的氨基酸序列一致性为 JX261936-CHGD-01,98.2%,98%;JQ039903-CH-GD-2011,98.6%,98.4%;AF353511-CV777,95.4%,95.1%;KC344845-STPED0810,95.1%,94.8%;EU054929-DR13,95.5%,95.2%;KF272920-USA-Colorado-2013,95.1%,94.8%,表明此2毒株与国内分离株的氨基酸同源性高,与韩国、泰国和美国分离株的氨基酸同源性要低一些,同时,与疫苗参考株的氨基酸同源性也相对较低;基因系统进化分析可知,GDKP-2013株与GDKP2-2013株主要处在Ⅰa分支,均与弱毒疫苗株(Ⅰb分支)相互之间遗传进化关系较远。 相似文献