功能基因组技术在昆虫抗药性研究中的应用展望

目前化学防治仍是植物保护的重要手段,化学杀虫剂通过参与昆虫自然选择,诱导其产生可遗传的基因突变,从而导致昆虫抗药性的增加,近年来随着杀虫剂的广泛使用,抗药性已成为植物保护领域亟需解决的重大问题。利用分子生物学手段对由基因变异引起的昆虫抗药性进行解析已成为可能,在现今大多数昆虫抗药性研究中,功能基因组技术已被广泛用于候选基因调控抗药性机制的研究。本文介绍了双元基因表达技术——GAL4/UAS技术、基因干扰技术——RNAi技术和基因编辑技术——CRISPR/Cas9技术这3种有助于阐明昆虫抗药性分子机制的功能基因组技术,综述了这3种功能基因组技术在近几年昆虫抗药性研究中的应用实例,讨论了其目前的发展状况及其优势和局限性,以期在完善的功能基因组技术支持下为昆虫抗药性研究取得更多突破性进展。     

Insect-neuroactive substances in two species of the genus Liquidamber

Three insect-neuroactive substances from Liquidamber styraciflua and L formosana were isolated and characterized by spectral analyses as betulonic acid, 1-methoxy-9-caryolanol and eudesm-4(14)-ene-1,6-diol, respectively. ©1999 Society of Chemical Industry     

农杆菌介导的Cas9基因转化金针菇的研究

将酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根据金针菇(Flammulina velutipes)的密码子偏好性进行优化,并构建FvCas9双元表达载体,利用农杆菌介导法转化金针菇单核体Dan3,经抗性培养基筛选以及潮霉素和Cas9基因PCR扩增验证,结果显示Cas9基因已经成功转入金针菇菌丝体中,转化率为6.84%。     

Immunological properties of porcine enterotoxigenic Escherichia Coli heat-stable (ST) enterotoxins

Cross-linking semipurified and purified heat-stable enterotoxin (2023 ST) to carrier proteins with glutaraldehyde pigs and rabbits were immunized. With ST antisera thus raised, a relatively simple, two-step method for isolation of ST is described. The method involved immunoadsorbent column chromatography procedure, and elution of the retained material with 6 M urea at pH 3.0 yielded purified ST with enterotoxin activity, controlled in suckling mouse test. ST purity was checked with a special staining technique in PAGE, anionic-exchange chromatography and immunodiffusion.     

氯化钙对乔纳金、北海道9号苹果苦痘病的防治研究

对乔纳金、北海道9号苹果喷施氯化钙防治苦痘病进行了试验研究,结果表明,花后1周喷1次0.25%的氯化钙或花后1周、花后6周各喷1次0.25%氯化钙2种方法都可以防治苦痘病的发生,以花后1周、花后6周各喷施1次氯化钙效果最好。     

猪Toll样受体9基因的克隆、序列分析及其结构预测

本研究应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中,克隆了猪Toll样受体9基因(pTLR9).基因序列分析表明,克隆的pTLR9基因ORF为3 093 bp,编码1 030个氨基酸,含18.5%的亮氨酸,含有24个氨基酸的信号肤序列,属于Ⅰ型跨膜受体,具有富含亮氨酸的重复序列(LRR)和Toll/IL-1R同源区结构域;与GenBank上登载的pTLR9参考序列(AY859728)的同源性为99.3%,与牛、马、羊和人的同源性较高,与家鼠、褐鼠的次之,TLR9的演化关系与亲缘关系密切.     

百菌清降解菌BJQ2的分离、鉴定及影响因素研究

采用未有百菌清用药史的土壤定向培养49d,分离出50株百菌清耐受菌株,经初筛、复筛后得到1株降解能力最强的细菌BJQ2,经形态学、生理生化试验、16SrDNA序列同源性比对及系统发育树的分析,初步确定为阴沟肠杆菌（EnterobactercloacaeB9）,BJQ2可以以百菌清为唯一碳源于基础培养基中生长。BJQ2降解百菌清的最适宜条件为：培养温度30~35℃,初始pH值为7.0~8.0,百菌清的初始浓度为20mg·L-1,选用菌体母液（OD600=0.35）,以10%的接种量接种,6d后提取百菌清,利用气相色谱进行检测分析,计算后发现百菌清的降解率可以达到79.2%。