黄淮南片麦区区试小麦品种(系)的遗传多样性及Pm21和1BL/1RS分子检测

为了解当前黄淮麦区区试品种(系)的遗传特征,利用分布于小麦基因组的96对SSR标记分析2016年参加黄淮南片麦区品种试验的78个小麦品种(系)的遗传多样性,同时,对Pm21基因和1BL/1RS易位系进行分子检测。结果表明,96对SSR引物中有80对(83.3%)在所有材料表现多态,共检测到307个等位变异,变幅为1~8,平均每个引物扩增3.84个等位变异;位点多态性信息含量(PIC)变幅为0.10~0.83,平均0.62;供试材料的遗传距离变幅为0.14~0.16,平均0.58。78个材料均不含有Pm21基因,69个(88.5%)材料属于1BL/1RS易位系。     

21世纪土壤科学的主要任务及挑战

结合已有的相关工作,对21世纪土壤科学面临的主要任务及挑战进行了论述,同时对有关的问题阐述了见解.重点从生态环境与生物学角度阐述土壤学与生物学、分子生物学的交叉与融合,将是土壤科学发展的必然趋势.分子生物学是生命科学中发展最为迅速的分支学科,必将影响土壤学发展的趋势.自然科学、社会科学与人文科学在生态科学领域中走向了融合与交叉.分子生物学的理论与技术正全面地渗透到生态科学中,将出现分子生态学的长足进展,即在基因表达与调控水平上探讨群体及生态系统的功能机制,并进一步利用生物技术手段,有目的地改良环境,从而使人类有一个可以持续健康发展的协调生存空间.土壤学面临了多种挑战与机遇,除了在微观与宏观2个层次上继续拓展外,更加注重尺度转换与实践应用问题以及同其他学科的交叉,尤其生物学,这也正是推动土壤科学发展的动力所在.无疑,生物因素将是多学科交叉与融合的生长点,是解决目前人类面临重大难题的根本性措施的源泉.     

动物细胞大规模培养中细胞凋亡检测方法的研究

为了探讨动物细胞大规模培养中细胞凋亡的检测方法,以不同浓度氯化铵诱导BHK-21细胞凋亡,每隔12 h收集细胞,采用台盼兰形态学排染法、吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法、FITC-Annexin V/PI双染色荧光显微镜观察法、原位缺口末端标记法(TUNEL)、DNA凝胶电泳、流式细胞术(FCM)法进行细胞凋亡的检测。通过比较发现,不同方法检测结果都存在着显著性差异,但吖啶橙和溴化乙锭双重荧光染色法是一种简单、易行、准确、全面定性细胞凋亡的较为可靠的方法,而FITC-Annexin V/PI双染色流式细胞仪能特异地、准确地检出早期凋亡的细胞,是较为理想的凋亡定量检测方法。这2种方法的联合运用更适应于动物细胞大规模培养过程中细胞凋亡的检测。     

Stimulation of Neurite Outgrowth in Cerebrocortical Neurons by Sodium Channel Activator Brevetoxin-2 Requires Both N-Methyl-D-aspartate Receptor 2B (GluN2B) and p21 Protein (Cdc42/Rac)-Activated Kinase 1 (PAK1)

N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors play a critical role in activity-dependent dendritic arborization, spinogenesis, and synapse formation by stimulating calcium-dependent signaling pathways. Previously, we have shown that brevetoxin 2 (PbTx-2), a voltage-gated sodium channel (VGSC) activator, produces a concentration-dependent increase in intracellular sodium [Na⁺]_I and increases NMDA receptor (NMDAR) open probabilities and NMDA-induced calcium (Ca²⁺) influxes. The objective of this study is to elucidate the downstream signaling mechanisms by which the sodium channel activator PbTx-2 influences neuronal morphology in murine cerebrocortical neurons. PbTx-2 and NMDA triggered distinct Ca²⁺-influx pathways, both of which involved the NMDA receptor 2B (GluN2B). PbTx-2-induced neurite outgrowth in day in vitro 1 (DIV-1) neurons required the small Rho GTPase Rac1 and was inhibited by both a PAK1 inhibitor and a PAK1 siRNA. PbTx-2 exposure increased the phosphorylation of PAK1 at Thr-212. At DIV-5, PbTx-2 induced increases in dendritic protrusion density, p-cofilin levels, and F-actin throughout the dendritic arbor and soma. Moreover, PbTx-2 increased miniature excitatory post-synaptic currents (mEPSCs). These data suggest that the stimulation of neurite outgrowth, spinogenesis, and synapse formation produced by PbTx-2 are mediated by GluN2B and PAK1 signaling.     

鹅p21基因克隆、启动子分析及转录调控研究

【目的】 分析鹅p21基因的结构和启动子活性，探讨p21基因的转录调控机制。【方法】 以泰州鹅为试验对象，通过同源克隆、RACE和生物信息学分析等方法获得鹅p21基因全长序列和5′-侧翼区序列特征；构建6个不同缺失片段的启动子区双荧光素酶报告载体并分析其荧光素酶活性，进而确定p21基因核心启动子区；对核心启动子区转录因子结合位点生肌决定因子(MyoD)(+25~+36 bp)进行定点突变，并构建突变报告基因载体，在C2C12细胞系内初步鉴定鹅p21基因核心转录调控因子。【结果】 鹅p21基因cDNA全长1 943 bp，CDS区大小为453 bp，编码151个氨基酸，蛋白序列包含高度保守的CDI家族结合位点。系统进化树分析表明，鹅p21基因与鸭亲缘关系最近，与鸡和火鸡有较强的进化关系。鹅p21基因5′-侧翼区包含启动子元件，—35~+37 bp是核心启动子区，发挥正向调控作用，结合定点突变技术初步鉴定MyoD是鹅p21基因核心转录调控元件。【结论】 本研究获得了鹅p21基因完整的cDNA序列和启动子区域，MyoD是p21基因核心转录调控因子，为探究p21基因在鹅胚胎期肌肉发育过程中的调控机制提供理论依据。     

利用CRISPR/Cas9技术创制抗稻瘟病香型早籼温敏核不育系

【目的】创制新型抗稻瘟病香型早籼温敏核不育系，为高产优质杂交水稻选育提供资源。【方法】利用CRISPP/Cas9技术在水稻稻瘟病基因Pi21、温敏不育基因TMS5和香味基因Badh2的第1外显子处设计靶位点，构建多基因表达载体pC1300-2×35S::g^TMS5-g^Badh2-g^Pi21，转化优质常规籼稻品种中早70，测序鉴定分析获得纯合阳性稳定株系。利用稻瘟病喷雾接种和打孔接种方法对稻瘟病基因Pi21的纯合突变株系进行稻瘟病抗性鉴定，利用GC-MS技术对Badh2纯合突变株系的香味物质2-乙酰-1-吡咯啉（2-AP）含量进行测定。【结果】在T₀转基因株系中，Pi21、TMS5和Badh2突变频率分别为87.5%、80.0%和87.5%，突变类型多为双等位突变。从T₁代中筛选不含载体骨架的纯合突变株系，获得两种三突变纯合株系。稻瘟病接种结果表明，与野生型相比，T₂代Pi21纯合变异株系的抗性显著提高。同时，接种后纯合突变体株系内相关防卫基因的表达量显著上调，ROS积累量也显著增加。tms5纯合变异株系表现出典型的温敏不育特性，TMS5基因的表达水平与野生型相比显著降低，高温下Ub_L404基因的表达水平明显高于野生型。与野生型相比，在Badh2纯合突变体植株中Badh2的表达水平显著下调，并且香味物质2-AP含量极显著增加。【结论】利用CRISPR/Cas9技术成功对Pi21、TMS5和Badh2基因同时进行定向编辑，获得了具有高抗稻瘟病的香型温敏不育系，为高抗、香型不育系材料的选育提供参考，加快高产优质杂交水稻的选育。     

甜椒品种忠椒21的选育及杂交制种技术

摘要：为满足市场需求，包头市南德种业有限公司立足市场，选育出甜椒一代杂交组合，定名为忠椒21。忠椒21属中熟，高秧无限生长型，生长势强，露地栽培株高65 cm；果肉厚0.5～0.6 cm，果实心室3～4 个，果实方灯笼形，果面亮泽、绿色，果实转色后紫红色，果实横径8 cm、纵径8 cm；平均单株坐果9.5个，平均单果质量300 g；绿椒适合鲜食，转色后适合脱水加工，是鲜食和脱水加工兼用型品种。适合北方地区春夏露地、保护地早春及秋延后栽培。截至目前，忠椒21已推广面积100 hm2，实现产值0.125亿元，为广大农民带来了良好的经济效益。