Development and application of fluorescence in situ hybridization (FISH) method for simple and rapid identification of the toxic dinoflagellates Alexandrium tamarense and Alexandrium catenella in cultured and natural seawater

ABSTRACT:   The toxic dinoflagellates Alexandrium tamarense (Lebour) Balech and A. catenella (Whedon and Kofoid) Balech produce potent neurotoxins, such as saxitoxin and gonyautoxin and have been mainly responsible for paralytic shellfish poisoning (PSP) in Japan. To prevent a negative effect on the fishery industry, it is necessary to identify these toxic species precisely and rapidly before and during the bloom. In this paper, a rapid and simple protocol of a fluorescence in situ hybridization (FISH) method using ribosomal RNA (rRNA)-targeted probes has been established for identifying the cultured strains and natural cells of A. tamarense and A. catenella . Using the FISH method established in this study, it was possible to identify these toxic species species-specifically and rapidly, within 30 min. The procedure of detection constituted three steps: (i) fixation/dehydration; (ii) hybridization; and (iii) washing; this made the identification simple. Moreover, this method did not require either special techniques or equipment, and the cost for detection was low. The specificity, rapidity, and simplicity of the developed method suggest that it might be useful for routine monitoring of these toxic microalgae.     

南海区驯养条石鲷亲鱼的初次性成熟和产卵

2008年4月初在广东省饶平县对2006年5月人工孵化和培育的2龄条石鲷（ Oplegnathus fasciatus）成熟亲鱼进行激素诱导,研究和观察条石鲷亲鱼初次性成熟的繁殖生物学。结果显示,在南海区全人工养殖的条石鲷亲鱼初次性成熟年龄为2龄,成熟亲鱼的最小型为全长245 mm、体质量610 g,最大个体为全长300 mm、体质量1450 g;产卵季节为4月10日~7月15日,产卵盛期为4月中旬至6月下旬;为升温产卵型鱼类,产卵温度为20.0~28.8℃,适宜的产卵温度为20.7~27.6℃;雌、雄亲鱼发育同步,个体大小和成熟年龄差别不大;雌鱼属于一年一次分批产卵类型,产卵期超过3个月;24尾初次性成熟雌性亲鱼的总产卵量为3180.0×104粒,日最高产卵量为341.5×104粒;其产卵量和受精卵质量与水温的变化关系密切,受精卵的浮卵率随温度的变化而变化,在水温相对衡定时,浮卵率相对稳定并维持在80%~95%的较高水平;受精卵平均卵径为（0.860±0.023）mm,油球径为（0.191±0.009）mm。     

浙江中北部沿岸春、夏季鱼卵和仔稚鱼种类组成与数量分布

根据2008年4,5,6月在浙江中北部沿岸禁渔区线内45个站位开展的产卵场调查资料,研究分析了该海域鱼卵、仔稚鱼的种类组成和数量分布。结果表明,本海区共出现鱼卵、仔稚鱼64个种类,分别隶属13目36科47属,能鉴定到种的有47种,鉴定到科的有17种。3个航次的调查共采集到鱼卵5 846个和仔稚鱼5 502个。其中4月最少,仅采集到鱼卵366个和仔稚鱼1 445个,分别占鱼卵和仔稚鱼总数量的6.26%、26.26%;5月份共采集到鱼卵1 530个和仔稚鱼1 551个,分别占鱼卵和仔稚鱼总数量的26.17%、28.19%;6月份数量最多,共采集到鱼卵3 950个和仔稚鱼2 506个,分别占总数的67.57%、45.55%,4—6月鱼卵、仔稚鱼的数量呈月递增趋势。鱼卵中石首鱼科未定种最多占10.06%,其次黄姑鱼占6.45%,再次为凤鲚占总数的6.06%。凤鲚仔稚鱼数量最多,占总种类数的34.06%,其次为虾虎鱼科仔稚鱼,占24.25%,再次为鲻科鱼类仔稚鱼,占23.57%。调查发现杭州湾是凤鲚的主要产卵场,其仔稚鱼也主要分布在杭州湾内,少量分布在舟山渔场和鱼山渔场。小黄鱼产卵场主要分布在舟山渔场、鱼山渔场外侧。从产卵时间和渔场分布来看,鱼山渔场是最早集中的水域,随着时间推移,产卵场的中心区向北部水域的舟山渔场转移。研究的海域内重要经济鱼类大黄鱼、小黄鱼、银鲳的鱼卵数量百分比明显下降,由1960年的优势种成为现在的非优势种;主要经济鱼类中鳓、凤鲚所占比例相对增加,但绝对数量有所下降。在某种程度上说明,沿岸水域资源补充量有所减少,这可能与水域环境变化及过度捕捞导致亲体量减少有关。     

降膜蒸发器噪声现场测试分析

通过对RNJM-03型三效降膜蒸发器噪声现场测试,结合文献、调研资料,进一步验证其噪声主要由气流在热压泵中的拉伐儿喷嘴处产生,提出利用马大猷教授的气流喷注噪声公式,将可能推导出适用于该设备的噪声经验公式的设想。     

彩色沥青混凝土路面的应用及展望

彩色路面作为1种新型的道路面层结构,正在引起人们广泛的兴趣和关注。在城市道路和休闲场所中使用彩色沥青铺筑的路面越来越多,不仅起到美化生活、创造舒适环境,提高城市品位的效果,同时也对强化城市交通的警示,疏导交通流量发挥了积极的作用。本文主要介绍了彩色沥青混凝土路用的基本特性,国内外应用状况及其发展前景。     

大通中高位山旱地区不同配置模式退耕还林地物种多样性研究

对大通县退耕还林中高位山旱地不同配置模式群落物种多样性进行研究。结果表明:不同配置模式的群落物种多样性指标的变化规律明显不同,多样性指数排序为模式H(白桦 青海云杉)>模式J(青杨 中国沙棘)>模式G(华北落叶松)>模式F(青海云杉)>模式K(青海云杉 中国沙棘)。     

应用体外短期发酵法评定牧草及秸秆干物质的消化率

用体外短期发酵法测定了6种牧草和6种秸秆的消化率。试验结果表明,用稀释瘤胃液(50mL)培养6种牧草和6种秸秆适宜的样量为0.5g,适宜的培养时间为36h。在此条件下测得的消化率与Tilley法测定的消化率极显著的正相关(P<0.01),而且该法有较好的重复性。     

大尺寸变螺距丝杠的数控加工

在数控车床上串联使用两套数控系统进行多坐标的联动控制,优化渐变螺距丝杠螺距拐点处的结构加工,实现渐变螺距丝杠的数控加工;通过实现刀具沿丝杠工件轴线的变速直线运动和丝杠工件的变速旋转运动,来进行匀变螺距丝杠数控加工,扩展了数控技术的应用和数控车床的加工范围。     

桐梓县杂交玉米氮磷钾的合理配施效应

采用"3414"平衡施肥方案,在桐梓县肥力较高的小黄沙泥土上进行了杂交玉米的肥料效应田间试验.结果表明,增产效果最佳的肥料配方为处理6,即尿素32.6kg·667m-2、普钙62.5kg·667m-2、氯化钾26.7kg·667m-2;从经济效益分析来看,以低氮低磷中钾处理的肥料增产效益最好,其肥料的产/投比为2.42,其肥料配方为处理12(N1P1K2),即尿素13.6kg·667m-2、普钙31.25kg·667m-2、氯化钾13.3kg·667-2.     

1980～2002年中国农地利用变化的时序特征

该文依托1980～2002年的全国农产品成本收益资料与中国农业统计年鉴等基础资料,以农地利用过程中的主要农作物为例,对农地利用过程中集约度、播种面积与耕地撂荒变化的时序特征及其驱动因素进行了研究。结果表明：近20多年来,中国农地利用的集约度与总播种面积均有不断提高与扩大的总体趋势,但在扩大过程中却有三次显著下降变化,在集约度下降时期(1984～1986年、1992～1993年、1997～1999年),农作物播种面积明显缩小,农地弃耕撂荒现象开始显著增加;导致这些变化的根本原因同农地利用过程中成本要求与土地要素纯收益的变化密切相关,但在时间响应上,由于农户要经过一个“观望-权衡-行动”的响应过程,从而往往滞后1～3年。