肽聚糖脂质体对小鼠血液生化的影响

以双歧杆菌完整肽聚糖为模型药物,胆固醇和卵磷脂为脂质体的成膜材料,纳米Fe3O4为磁性材料,采用薄膜法、逆向蒸发法和高压均质法制备磁性脂质体,比较三种方法制备的磁性脂质体的优劣,并对其经口饲喂小鼠的血液生化进行分析.结果表明,采用薄膜法制备的磁性脂质体密度较高,逆向蒸发法制备的磁性脂质体密度较低,高压均质法制备的磁性脂...     

转基因奶牛胚胎移植技术的试验研究

2006年6月至2010年3月以来,北京奶牛中心与中国农业大学合作,在北京奶牛中心良种场开展了转基因牛胚胎移植试验研究。本试验利用中国农业大学培育的转基因母牛作为供体,进行超数排卵生产体内胚胎,将获得的胚胎移植给15～15.5月龄荷斯坦母牛受体。截止2010年3月21日,累计移植转基因奶牛胚胎87枚,移植受体牛87头,妊娠48头,移植妊娠率为55.17%;产犊43头,成活34头,犊牛成活率为79%;经中国农业大学研究人员检测,有14头公牛携带转入目的基因,这14头公牛已全部进入北京市种公牛站饲养。目前,有10头公牛到了试采精月龄,精液经农业部牛冷冻精液质量监督检验测试中心(北京)检测,质量符合国家标准。     

被毛突变小鼠解剖及繁殖学特性观察

对一种新的具有个毛、无毛、稀毛３种表型的被毛突变小鼠的大体解剖学特性研究结果表明,其心肝、脾、肺、肾、肾上腺等脏器的位置、形态及组织学结构无表型间差异,但无毛小鼠被毛和皮肤结构异常,大多数脏器的重量和脏器系数表现出表型差异和性别差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。繁殖学特性研究结果表明,虽然无毛小鼠雌雄生殖系统的器官组成、发情周期与其他２种表型之间无明显差异,但其雄性的初情期明显滞后（约２周左右）     

鹌鹑源火鸡隐孢子虫在小白鼠和雏鸡体内内生发育阶段的超微结构比较

用鹌鹑源火鸡隐孢子虫（Cryptos poridium meleagridis）卵囊分别感染昆明系小白鼠和固始雏鸡，用透射电镜和扫描电镜观察比较了C．meleagridis在两种试验动物体内的内生发育虫体超微结构和致病性的差异。利用扫描电镜观察发现，鹌鹑源火鸡隐孢子虫（C.meleagridis）在小白鼠和雏鸡体内的寄生部位有较大差异，在小白鼠体内寄生于十二指肠，但在雏鸡体内主要寄生于回肠；C．meleagridis深嵌于小白鼠肠微绒毛丛内，微绒毛较为完整；但在雏鸡回肠，C．meleagridis似黏附在肠黏膜表面，微绒毛脱落明显，对雏鸡致病性明显比对小白鼠的致病性强。利用透射电镜在两种试验动物的样品中均观察到不同发育阶段的滋养体、裂殖体和大配子体以及正在孢子化的卵囊。滋养体和裂殖体在发育过程中可明显见到粗面内质网结构，裂殖生殖中期阶段粗面内质网尤其发达；小白鼠体内的C．meleagridis虫体与肠黏膜接触处形成一凹陷，寄生部位较深，而在雏鸡体内无此现象。此外，利用透射和扫描电镜均观察到虫体寄生部位周围微绒毛密度高而且也比其它部位长。形成这些差异的原因有待于进一步探讨。     

Modifying Myxococcus xanthus protoporphyrinogen oxidase to plant codon usage and high level of oxyfluorfen resistance in transgenic rice

Protoporphyrinogen oxidase (Protox) of Myxococcus xanthus (Mx Protox) is a 49-kDa membrane protein that catalyzes conversion of protoporphyrinogen IX (Protogen IX) into protoporphyrin IX (Proto IX). Upon heterologous expression in transgenic rice plants, Mx Protox is dually targeted into plastids and mitochondria, increasing resistance against the herbicidal Protox inhibitor oxyfluorfen. Here, we describe the chemical synthesis of the Mx Protox gene by assembling several small synthetic DNA fragments derived by ligation-PCR. Codon usage in the resulting 1416-bp gene was modified to correspond to that of the Arabidopsis Protox gene, a change that resulted in a decrease in G+C content from 71 to 49%. The modified Mx Protox gene was used to generate transgenic rice plants via Agrobacterium-mediated transformation. Integration, expression, and inheritance of the transgenes were demonstrated by Southern, Northern, and Western blot analyses. In plants transformed with the modified, low G+C-content Mx Protox gene, levels of Protox expression and enzyme activity were low compared to the levels observed for plants transformed with the native Mx Protox gene. Nonetheless, like the native gene, the modified gene conferred a high level of resistance to the herbicide oxyfluorfen in a seedling growth test.     

小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球体外培养体系的研究

以CZB为基础培养液,培养小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球,研究葡萄糖、牛磺酸和猪输卵管上皮细胞共培养在其体外发育中的作用。结果表明:牛磺酸添加与否对4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为29%、30%和14%、14%,无显著性差异(P>0.05)。添加葡萄糖后,4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为36%和19%,有显著提高(P<0.05)。含有葡萄糖而牛磺酸的添加与否对4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为36%、38%和19%、20%,无显著性差异(P>0.05)。各组内4、8-细胞胚胎单卵裂球形成的囊胚细胞数分别为(10.44±1.24～(12.43±1.18)和(7.57±0.97)～(8.48±1.16),均无显著性差异(P>0.05)。4、8-细胞胚胎单卵裂球与猪输卵管上皮细胞共培养,其囊胚发育率分别为47%和26%,囊胚细胞数分别为(17.57±1.13)和(11.43±0.92),均高于单一培养(P<0.05)。     

荧光定量PCR检测小鼠卵母细胞中Mad2 mRNA的表达

目的:应用SYBR G reen I染料法建立检测Mad2 mRNA表达的实时荧光定量PCR的方法,并探讨小鼠卵母细胞减数分裂成熟中Mad2 mRNA的表达。方法:采用实时荧光定量PCR的方法,以SYBR G reen I为荧光染料,梯度稀释的重组质粒为模板制作标准曲线,并以此方法分析了小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中Mad2 mRNA表达的动态变化。结果:建立了实时荧光定量检测方法分析小鼠卵母细胞中Mad2 mRNA的表达,该方法灵敏、特异,扩增效率接近100%。进行了标准曲线的制作,以及对目的基因Mad2转录水平的绝对定量。结论:实时荧光定量PCR是检测基因表达水平的理想选择,在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中Mad2 mRNA表达存在动态变化。     

转基因番茄F2代的贮藏特性研究

以F1′、F2、F3、NR四个转基因番茄基因型为实验材料,研究了转反义乙烯基因F2代番茄果实的贮藏特性,据此对转基因番茄各基因型的贮藏特性作综合分析评价。结果表明,F3基因型果实的失重率、腐烂率最低,果柄拉力最大,外观形态最好,贮藏特性最好;其次是F1′和NR基因型;而F2基因型最差。     

转rolA、B、C基因枳橙快繁技术

通过对转rol基因枳橙B、D、E系及对照的高接植株春梢茎段进行萌芽诱导、增殖及试管苗生根成苗的试验,摸索出适宜枳橙快繁各种培养基配方及培养条件。结果表明,以MS+6-BA1mg/L的培养基适合于芽萌发,以MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L的培养基适合于芽增殖,生根则以1/2MS+NAA0.5mg/L+0.2%活性炭的组合最佳,转基因各系生根率均在93.3%以上,显著高于对照生根率(66.7%)。快繁苗移栽成活率可达90%,目前生长良好。     

猪苓菌丝体多糖对小鼠免疫水平的影响

通过人工液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体，用热水浸提法提取猪苓菌丝体多糖（PPS1），经纯化测定其糖含量，用红外光谱分析鉴定多糖，纯化鉴定的PPS1，通过小鼠进行腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、E玫瑰花环试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验、EAC花环试验等5项免疫学试验初步探讨其免疫药理学作用，同时与猪苓菌核多糖（PPS2）进行比较。试验数据经统计学分析显示，E玫瑰花环试验中PPS1与空白对照组相比差异显著（P〈0．05）；腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验覆EAC花环试验PPS1与空白对照组相比差异极显著（P〈0.01）；5项免疫学试验PPS1与PPS2相比差异均不显著。结果表明，PPS1能明显提高小鼠的免疫功能。