以莱茵衣藻为载体表达外源抗菌肽的研究

将黑水虻抗菌肽基因sarcotoxin3转入到莱茵衣藻细胞中,以期实现抗菌肽活性片段的大规模表达生产,为将来完成抗菌肽的临床测试及水产应用奠定实验基础。以质粒pHK85为骨架,插入荧光素酶基因和黑水虻抗菌肽sarcotoxin3基因,用DNA连接酶将质粒连接,构成抗菌肽质粒。抗菌肽质粒经克隆、提取、酶切线性化、衣藻玻璃珠转化、荧光素酶活性筛选和抑菌实验,结果表明:经过测序进一步确认质粒成功构建,碱基序列与所设计质粒序列一致,质粒浓度472.8 ng/μL、纯度(A_(260)/A_(280))1.93,7 d后每个巴龙霉素平板长有单克隆约200个,大多数单克隆荧光素酶活力值可高达10~6,少数单克隆荧光值甚至可达10~8;藻株在26 kDa附近出现了特异信号,含有抗菌肽的蛋白对大肠杆菌DH5α有一定的抑制作用。莱茵衣藻可以作为抗菌肽外源表达的一种载体,为抗菌肽的大量生产提供了一种可能。     

大豆抗营养因子对生长蛋鸡生产性能、氮代谢和小肠内胰蛋白酶活性的影响

为了观察不同梯度大豆抗营养因子（Ａｎｔｉｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｆａｃｔｏｒｓ、简称ＡＮＦｓ）对不同生理阶段的生长蛋鸡的影响,本试验采用４８０只海兰褐蛋用雏鸡,以熟豆饼日粮为对照,从３或９周开始给饲３个水平的生大豆日粮（４％,９％和１３％）,每期每个日粮４个重复。在３～８周和９～１８周观察雏鸡的采食量,日增重和饲料效率。在第８和１７周分别测定各组的粗蛋白质和干物质的代谢率。并于８、１３和１８周末每个重复随机抽取试鸡两只屠宰,观察小肠内胰蛋白酶活性的变化。结果表明,３个水平的大豆ＡＮＦｓ对育雏期雏鸡的增重没有影响,育成期对照组的增重明显高于采食生大豆组（Ｐ＜０．０５）,大豆ＡＮＦｓ使饲料效率降低,但对氮和干物质的代谢影响不显著;８、１３和１８周龄雏鸡小肠内胰蛋白酶活性亦无显著变化。     

饲粮能量和蛋白质水平对滩羊小肠中小肽和氨基酸转运载体mRNA表达量的影响

本试验旨在研究饲粮能量和蛋白质水平对滩羊小肠中小肽和氨基酸转运载体mRNA表达量的影响。选取112只健康、体重相近的滩羊,随机分成4组,每组4个重复,每个重复7只羊。标准水平的饲粮能量和蛋白质水平参考《肉羊饲养标准》(NY/T 816—2004),各组试验滩羊分别饲喂不同能量和蛋白质水平饲粮:0.84×标准水平(Ⅰ组)、0.96×标准水平(Ⅱ组)、1.08×标准水平(Ⅲ组)和1.20×标准水平(Ⅳ组)。试验根据羊体重分2个阶段:29~35 kg和36~40 kg。于每个阶段末,每个重复屠宰1只试验羊,取其小肠组织样,运用实时荧光定量PCR技术,研究小肽转运载体1(Pep T1)、y+型氨基酸转运载体1(CAT1)、兴奋性氨基酸转运载体3(EAAT3)mRNA表达量的变化。结果表明:1)在29~35 kg阶段末,小肠中Pep T1 mRNA的表达量随着饲粮能量和蛋白质水平的提高呈先下降再上升的趋势,Ⅱ组显著低于其他3组(P0.05);Ⅳ组小肠中CAT1 mRNA的表达量显著高于其他3组(P0.05);Ⅲ组小肠中EAAT3mRNA的表达量显著高于其他3组(P0.05)。2)在36~40 kg阶段末,Ⅱ组小肠中Pep T1mRNA的表达量显著高于其他3组(P0.05);Ⅱ组小肠中CAT1 mRNA的表达量显著高于Ⅲ组(P0.05);小肠中EAAT3 mRNA的表达量随着饲粮能量和蛋白质水平的提高呈上升趋势,Ⅲ组和Ⅳ组小肠中EAAT3 mRNA的表达量显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P0.05)。由此可见,饲粮能量和蛋白质水平会影响滩羊小肠中Pep T1、CAT1、EAAT3 mRNA的表达量,使机体对小肽和氨基酸的吸收利用率随之改变,以适应滩羊的生长发育。     

甲状腺素对猪小肠上皮细胞miR-let-7a基因表达及细胞增殖的影响

miR-let-7a在动物细胞的分化、增殖与凋亡等方面发挥越来越重要的作用。甲状腺激素(TH)作用非常广泛,机体的每个细胞几乎都是TH作用的靶细胞,其可以促进组织分化、生长和成熟。本实验用甲状腺素(T4)浓度分别为(0、0.02、0.03、0.05、0.075、0.1、0.2μmol/L)在体外培养猪的小肠上皮细胞。结果表明:T4处理组的细胞体积形态相对于空白对照组没有明显变化;当T4添加浓度为0.03μmol/L时,细胞的增殖率显著低于其他组(P0.05);当T4浓度为0~0.03μmol/L时,let-7a的表达随着添加剂量的增加而升高,浓度从0.03~0.2μmol/L变化时,let-7a的表达呈现降低趋势,浓度为0.03μmol/L时表达量极显著高于其他组(P0.01)。let-7a的表达量与细胞增殖呈负相关。     

丽水市小径竹资源调查与分析

通过对丽水市小径竹林种类、面积、分布、立地条件、林分状况、经营现状的全面调查,掌握了资源状况,分析了资源特点和开发潜力,提出了保护与利用开发的建议.     

Changes of somatotropin axis in catch-up growth rats born small for gestational age

AIM: To evaluate the changes of somatotropin axis in pre-pubertal rats with catch-up growth born small for gestational age (CUG-SGA). METHODS: The SGA rat model was prepared by diet restriction in pregnant rats.Growth hormone (GH) excretion in 24-h urine, serum level of insulin-like growth factor-1 (IGF-1), the expression of IGF-l and insulin-like growth factor-1 receptor (IGF-1R) in the tibial growth plate and the mRNA expression of IGF-1 in liver were measured in infant rats at the end of week 4. RESULTS: The level of 24-h urinary GH excretion in CUG-SGA group were significantly higher than that in the rats of non-catch-up growth born small for gestational age (NCUG-SGA) group and appropriate for gestational age (AGA) group (both P<0.01). The serum level of IGF-1 and the mRNA expression of IGF-1 in liver in CUG-SGA group were similar to those in AGA group, but significantly higher than those in NCUG-SGA group. The thickness of the tibial growth plate in NCUG-SGA group was significantly lower than that in CUG-SGA group and AGA group. No difference of the growth plate thickness between CUG-SGA group and AGA group was observed, but the thickness of hypertrophy zone of the growth plate in CUG-SGA group were significantly higher than that in NCUG-SGA group and AGA group (both P<0.01). The expression of IGF-1 in the growth plate in CUG-SGA group was similar to that in AGA group but significantly higher than that in NCUG-SGA group (P<0.01). No difference of the IGF-1R expression in the growth plate among these 3 groups was found (P>0.05). CONCLUSION: GH/IGF-1 resistance exists in SGA rats with and without catch-up growth.     

豆粕生物肽的生产工艺研究

通过菌种筛选、摇瓶发酵条件优化,系统地研究了微生物发酵生产豆粕生物肽的工艺。结果表明:枯草芽胞杆菌为最佳菌株,其豆粕生物肽最佳生产工艺条件为:种子培养时间16 h,豆粕粒度40目,初始pH6.8,葡萄糖2%,豆粕11%,接种量6%,发酵时间48 h;在此工艺条件下蛋白质降解为多肽的得率为41.18%。