翘嘴鳜、斑鳜及其杂交后代的胚胎和胚后发育比较

利用人工催产、人工授精的方法取得翘嘴鳜Siniperca chuatsi、斑鳜Siniperca schezeri及其正反交杂交后代的受精卵,在常温下对翘嘴鳜、斑鳜及其杂交后代的胚胎和胚后发育进行了观察与比较。结果表明：4种卵子中,斑鳜及以斑鳜为母本杂交种的卵子大于翘嘴鳜及以翘嘴鳜为母本杂交种的卵子,前者直径为（1.86±0.07）mm,后者为（1.08±0.06）mm。在外部条件相同的情况下,4种胚胎发育时序基本以母本为基准,即以翘嘴鳜为母本的杂交种胚胎发育时序与翘嘴鳜的相同,以斑鳜为母本杂交种的则与斑鳜相同。在水温28.0～30.0℃下,以翘嘴鳜为母本的两种胚胎孵化需时约34 h,而在26.5～30.0℃下,以斑鳜为母本的两种胚胎孵化需时约91 h。以斑鳜为母本的初孵仔鱼比较大,全长为（4.60±0.07）mm,以翘嘴鳜为母本的初孵仔鱼全长为（4.00±0.05）mm。     

我国斑鳜不同群体mtDNA控制区序列的遗传变异

采用PCR技术扩增了鸭绿江、长江、钱塘江、闽江、西江5个群体36尾斑鳜（Siniperca scherzeri Steindachner）mtDNA控制区的基因序列。在长度818bp片断序列中共检测到112个多态性核苷酸位点，具有20种单倍型，不同地理群体的单倍型表型不同，鸭绿江、钱塘江群体中含有多个特异性的核苷酸位点。用MEGA3．0构建了NJ分子树，鸭绿江、长江、钱塘江、西江群体内的个体均能单独聚成群，而闽江群体未能单独成群，个体分别与长江、西江群体聚在一起。这些表明我国斑鳜不同群体间有较明显的遗传分化。     

翘嘴鳜(♀)×斑鳜(♂)杂交子一代的胚胎发育

在ZOOM645S解剖镜下对翘嘴鳜(♀)×斑鳜(♂)人工杂交子一代胚胎发育各个阶段的发育时序和形态特征进行了观察.结果表明:受精卵为漂浮卵,微粘性,卵径1.6～1.8 mm.在水温(24±1)℃条件下,受精后1 h 45 min,胚盘隆起;2 h 30 min,进入卵裂期;3 h 15 min,进入桑椹期;4 h 15 min,进入囊胚期;11 h,进入原肠期;13 h 40 min,进入神经胚期;14 h 20 min ,进入胚孔封闭期;17 h 20 min,进入肌节出现期;20 h 10 min,进入视泡期;25 h,进入尾芽期;26 h 40 min,进入肌肉效应期;31 h,进入晶体出现期;35 h 10 min,进入心跳期;49 h 10 min,进入眼色素形成期;51 h 20 min,进入血液循环期;59 h 10 min后,开始出膜.整个胚胎发育时序和形态特征偏向于母本翘嘴鳜.     

以重复序列为靶位点的鳜鱼多位点基因打靶载体的构建

以鳜鱼(Siniperca chuatsi)为研究对象，以其重复的rRNA基因间的间隔序列为靶位点构建多位点基因打靶载体，为建立体内多位点基因打靶技术获得关键材料。先构建含TK和Neo基因的通用打靶载体pCTKNeo。采用LA Taq高保真酶扩增获得左、右同源重组引导臂HRDS1、HRDS2，经T质粒克隆后，分别插入到pCTKNeo载体Neo基因的上下游，构建成鳜鱼专用的多位点打靶载体pCTKNeo-HRDS1／2。同样将干扰素基因hIFN插入到pCTKNeo-HRDS1／2载体的Neo基因与HDRS2之间。每次克隆均经PCR、酶切和测序等鉴定DNA片段的插入及插入方向，最终构建成多位点基因打靶载体pCTKNeo-HRDS1／2-hIFN。目前的基因打靶技术存在打靶效率低、安全性等问题，以重复序列为靶位点的多位点基因打靶技术将部分解决这些问题。     

温度与鳜仔鱼饥饿耐力的关系

从鳜仔鱼在饥饿状态下的生长速度、摄食率、抵达PNR的时间几个方面研究温度与仔鱼饥饿耐力的关系。实验表明,不同温度下仔鱼的生长速度从大到小依次为：25℃＞30℃＞28℃＞31℃＞19．5℃;抵太PNR的时间从长到短依次为25℃＞28℃＞19．5℃＞30℃＞31℃;摄食率高低依次为25℃＞28℃＞19．5℃＞30℃＞31℃。可见,随温度的升高,仔鱼的饥饿耐力也显著提高,但超过28℃后,仔鱼对饥饿耐受力急剧下降,在25℃,仔鱼对饥饿的耐受力最高。     

鳜脑及脑神经形态的研究

对鳜脑及脑神经的外部形态的研究,发现鳜脑的形态与其生活习性相适应。鳜脑的视叶特别发达,延脑有明显突出的听结节和迷叶隆起;大脑发达,纹状体有分叶,由此可推测鳜的摄食活动是各种感觉功能的综合作用,其中视觉为主,其次是侧线的感觉;嗅觉及味觉起着辅助作用。鳜小脑体大,侧叶发达;间脑血管囊大而突出的特征是对伏击式扑食的一种适应。另外,与其它鲈形目鱼类相似,鳜有“鲑”型嗅叶,三叉神经及面神经的一些分支有融合现     

鳜的口,咽腔味蕾形态和数量的初步研究

用扫描电镜对鳜的口、咽腔味蕾的形态及数量进行了研究。结果表明：鳜的味蕾味孔小于一般硬骨鱼类的味蕾味孔。鳜的口、咽腔中有３种类型的味蕾，呈簇状不均匀地分在于齿间上皮之中。幼鱼咽腔中的味蕾较其它区域密集，数量也较多。而仔、稚鱼以唇中的味蕾数较多。３种类型的味蕾中，以Ⅰ、Ⅱ型味蕾占绝不多数，Ⅲ型味蕾较少。但年龄愈小，Ⅲ型味蕾所占比例愈大。以上结果说明：（１）味蕾在鳜幼鱼的吞咽活动中及在仔、稚鱼的摄食活动中有着特殊的作用。（２）Ⅲ型味蕾的化学感觉作用对仔鱼的摄食有着更重要的作用。     

鳜鱼不同生长阶段中趋光特性的研究

采用光梯度方法研究了鳜鱼生长发育中对 6种光的趋光特性。结果表明 :鳜鱼 (全长 4.7～10 5 .0mm)在水平光梯度下对 3× 10 -1～ 2× 10 3lx的不同色光表现出不同的趋光反应。平游、开食阶段的鳜苗(全长 4.7～ 5 .8mm)对蓝光以外的各色强光均具有强烈的趋光性 ,其中对黄光的趋光反应最为强烈和稳定 ,最大趋光率为 98.2 7%。随着鳜的生长发育 ,对强光的趋光性逐渐减弱 ,而对弱光的趋光性逐步增强 ,其适宜照度逐渐由强光区移至弱光区。全长 30～ 40mm的夏花阶段是鳜鱼的趋光特性明显转变的过渡时期。鳜鱼在不同照度下的适宜光色不尽相同 ,随其生长 ,弱光区的适宜光色为短波段的蓝、绿光 ,而强光区的适宜光色由长波段的黄、橙、红光移至短波段的绿光     

鳜皮肤黏液IgM样蛋白的纯化

对经嗜水气单胞菌全菌疫苗浸泡免疫后的鳜皮肤黏液中的免疫球蛋白采用盐析法、重组蛋白A(HiTrap rProteinA Sepharose)亲和层析法及鼠抗鳜血清IgM单克隆抗体偶联的Sepharose 4B亲和层析法分离纯化,并通过SDS-PAGE及Western-blot技术对纯化蛋白的部分特性进行分析比较。结果表明:50%硫酸铵溶液可以沉淀黏液中大部分蛋白,条带仍较多,约十几条,其中含有72 ku和29 ku的条带,因此仅可作为免疫球蛋白粗提的方法;Sepharose 4B亲和层析法所提取鳜黏液Ig经SDS-PAGE检测,只含有72 ku和29 ku 2个条带(初步认为鳜黏液Ig的重链和轻链),与鳜血清IgM的重、轻链分子量相同;rProteinA亲和层析法所提蛋白除具有上述重链(72 ku)和轻链(29 ku)外,还含有43 ku的蛋白带(可能为鳜黏液Ig另外一种形式的重链)。Western-blot显示,兔抗鳜Ig多克隆抗体可与72 ku及43 ku条带发生发应。两种亲和法所提蛋白纯度较高,但含量较低,条带较淡,仅可作为实验室小量提纯鳜黏液Ig的有效方法。     

人工配合饲料池塘养殖翘嘴鳜广清 1 号生长模型构建

【目的】了解 池塘养殖模式下人工配合饲料养殖翘嘴鳜（Siniperca chuatsi）广清 1 号（以下简称 饲料鳜）的生长发育规律,为饲料鳜的选育和规模化养殖提供参考。【方法】对一个生产周期下不同月龄饲料 鳜的形体参数和生长性能进行测定,应用 Logistic、Gompertz 和 Bertalanffy 等 3 种非线性模型对其体重和体长进 行生长模型构建。【结果】饲料鳜绝对增重最大值出现在 5 月龄,绝对增长出现在 3 月龄,而相对增重率和相 对增长率则均在 4 月龄开始出现下降。形体参数中肥满度、脏体指数、脂体指数随月龄呈现上升趋势,肝体指 数和肠胃体指数则呈现下降趋势。构建的 3 种模型均能较好地模拟饲料鳜的生长曲线,拟合度（R2 ）≥ 0.97。 模型预计值和实测值之间的相关分析表明 Logistic 模型更优,相应的体重和体长生长模型分别为 Wt =1230.808/ (1+39.666e-0.760t),R2 =0.989;Lt =40.871/(1+3.076e-0.387t),R2 =0.990。 体 重 生 长 拐 点 为 4.843 月 龄, 相 应 的 体 重 为 615.404 g,体长为 20.436 cm。【结论】L ogistic 模型更适合用于描述饲料鳜的生长过程,能对其各阶段的生长数 据进行预测,为饲料鳜进一步选育和规模化养殖提供理论依据。