我国西瓜枯萎病防治研究进展

对西瓜枯萎病的防治进行了综述,并分析了该病防治上存在的突出问题,对生物防治和抗病育种的应用前景作了展望。     

拮抗细菌对香蕉枯萎病的防治效果

从香蕉园和其他果园土壤中分离获得4株对香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp. cubense)具有抑制作用的拮抗菌,并对其抑菌效果和防治效果进行了测定.结果表明,bio-d4、bio-d5、bio-B3和bio-p等4株拮抗菌与香蕉枯萎病菌对峙培养5 d后,在平板上产生了明显的抑菌带,其宽度为16.5～20.5 mm;培养10 d后,仍然保持稳定的抑菌效果;其发酵原液对孢子萌发具有显著的抑制作用,抑制率为90.5%～97.2%;bio-d4、bio-d5和bio-B3发酵液100倍、200倍和300倍稀释液的防治效果为53.3%～80.2%,显著大于bio-P和恶霉灵的防治效果.     

铜耐性优势植物根际土壤铜抗性菌株的筛选及其对铜的促溶作用

从铜矿废弃地重金属耐性优势植物根际土壤中分离筛选到两株抗高浓度Cu的细菌菌株HQN2和JYC17.对菌株HQN2和JYC17溶解难溶性Cu的作用进行了研究.结果表明:菌株HQN2和JYC17具有明显的溶解碳酸铜的能力,与接灭活菌对照相比,菌株HQN2和JYC17分别使培养液中水溶性Cu含量增加306%和136%,培养液的pH由初始的7.00分别降低到4.08和4.46.另外,Cu能促进供试菌株有机酸(葡萄糖酸、苹果酸和乙酸等)的合成.菌株HQN2和JYC17对土壤中难溶性Cu亦有明显的促溶作用.与接灭活菌对照相比,菌株JYC17和HQN2分别使土壤中交换态Cu含量增加110%和270%.经生理生化特征分析及16S rDNA序列分析,菌株HQN2和JYC17分别被鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.)和微杆菌属(Microbacterium sp.).     

禾长蠕孢菌的紫外诱变改良和除草活性评价

为进一步提高稗草生防潜力菌禾长蠕孢菌(Helminthosporium gramineum Rabenh f.sp.echinochloae,HGE)的杀草活性,采用紫外诱变的方法对该菌种进行改良,经筛选获得1株适合液体发酵的突变菌株M1。与出发菌株HGE菌落墨绿色相比,突变株M1菌落呈灰白色至白色,表现出明显差异,并且M1生长速度快,其发酵液对稗草(Echinochloa crusgalli(L.)Beauv)根芽的抑制效果均优于出发菌株HGE。连续7次传代培养发现M1仍具有良好的遗传稳定性。采用RAPD-PCR方法对出发菌株和突变菌株M1同时进行PCR扩增,结果表明,突变菌株的遗传物质已经发生了改变。同时对其液体发酵工艺进行了研究,初步确定了最佳发酵工艺。所用培养基马铃薯200gL,葡萄糖30gL,麸皮20gL,酵母膏1gL,KH2PO42gL,MgSO4·7H2O1gL,初始pH7,发酵温度24℃和150rmin振荡培养6d的发酵方案,突变菌株M1菌丝体产量最高,达14.37gL。液体培养获得毒素的最佳发酵工艺为培养基蔗糖30gL,(NH4))2C4H4O65gL,NH4NO31gL,酵母膏1gL,KH2PO41gL,MgSO4·7H2O0.5gL,NaCl0.1gL,CaCl20.1gL,水解酪蛋白0.5gL;初始pH7.25,发酵温度为24℃和静置培养14d。     

放线菌Ⅲ-61和A-21对蔬菜枯萎病和灰霉病的控制作用

为了明确拈抗性放线菌Ⅲ-61和A-21在植物病害生物防治中的实用价值,并为其后续的生防制剂的研发提供科学依据,对其在蔬菜枯萎病和灰霉病上的抗病活性进行了研究。其活菌体的抑菌活性检测采用平板对峙法;菌体代谢物的活性测定利用摇瓶发酵后经微孔滤膜过滤制备无菌发酵液,然后用滤纸片扩散法测定抑菌圈,用生长速率法测定对菌落扩展的抑制,用稀释药液凹玻片静置培养法测定对孢子萌发的抑制;温室防病试验采用盆栽接种法。结果显示,两菌株的平板菌落对黄瓜枯萎病菌和番茄灰霉病菌的抑菌带宽达17．5—20．9mm;27℃,120r／min摇瓶培养6d的发酵液抑菌效果最好。其稀释倍数≤5的无菌滤液处理后经120h对病原菌菌丝生长的抑制率仍达76．5％-100％。对分生孢子萌发的抑制率为100％;100倍稀释液对孢子萌发后的芽管具有致畸作用,使其顶端膨大或呈粗栉齿状而不再继续伸长;平板对峙培养中受抑病原菌菌落边缘的菌丝细胞壁崩解,原生质体外泄,表现出溶菌现象;其4倍稀释液对黄瓜枯萎病的温室盆栽防效分别为65．15％和60．61％,对番茄和辣椒灰霉病的防效为62．49％-89．76％。此研究结果表明这2个菌株具有很好的开发应用前景。     

芽孢杆菌HSY-8-1对植物病原真菌的抑制及其抑菌产物特性

为挖掘用于生物防治的微生物资源,自海南蚕豆枯萎病区土壤分离1株芽孢杆菌HSY-8-1,经抗菌试验分析表明,其代谢产生的拮抗物质对引发植物立枯病和根腐病的立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和镰刀菌(Fusariumspp.)抑菌作用较强,具有使病菌菌丝扭曲、缢缩等致畸效应,并抑制立枯丝核菌的菌核形成。研究表明,在NB液体培养基中发酵时,进入稳定生长期后开始产生抑菌物质,72 h时累积达到最大值。这种抑菌物质的特性为外泌型、水溶性,可透过0.22μm的微孔滤膜,对热、酸、碱、蛋白酶水解、紫外线照射等影响有较强的稳定性。     

蒿属植物提取物对棉花枯萎病菌和红腐病菌的抑制活性研究(英文)

在实验条件下,采用菌丝生长速率测定法,以棉花枯萎病菌、棉红腐病菌为供试菌,对茵陈、黄蒿、艾蒿3种蒿属植物提取物的抗菌活性进行了研究。结果表明,供试3种蒿属植物提取物对棉花枯萎病菌和棉花红腐病菌均具有较好的抗菌活性,其中尤以艾蒿提取物的抗菌活性强而稳定,48～96h对上述两病菌的菌丝抑制率均达80%以上;试验还比较了不同提取溶剂提取物的抗菌活性,发现提取物的抗菌活性随浓度的增高而增强,两者呈显著的正相关性;极性小的丙酮所得到的艾蒿提取物抗菌活性明显强于乙醇提取物,前者的EC50为1.4785mg/L,后者的为3.2090mg/L。间歇振荡法、超声波法、冷浸法提取物对供试菌的72h菌丝抑制率分别为84.34%、84.56%、88.70%,可见同种溶剂不同提取方法所得提取物抗菌活性基本一致。     

左旋肉碱对微绿球藻和四膜虫种群生长的影响

[目的]研究左旋肉碱对微绿球藻Nannochloropsis oculata和四膜虫Tetrahymena sp种群生长的影响。[方法]对微绿球藻和四膜虫在左旋肉碱浓度为0、50、100、1 000 mg/L时的种群密度进行测定。[结果]添加高剂量左旋肉碱对微绿球藻种群生长有显著抑制作用（P〈0.05）;添加左旋肉碱对四膜虫种群生长有显著促增殖作用（P〈0.05）。[结论]该研究为左旋肉碱在水产养殖中的应用研究提供了理论依据。     

5种不同镰刀菌的酶学特性分析

采用比色法和电泳技术对引起成年国槐根茎腐烂病的5种镰刀菌的酶学特性进行了分析,为镰刀菌的分类和生理分化研究等提供理论依据。结果表明,5种镰刀菌的可溶性蛋白含量及4种保护酶(EST、SOD、PPO和POD)活性的测定结果与电泳结果相一致,如5种镰刀菌的SOD活性都很高,介于2 263.09~6 134.42 U/mg,电泳图谱清晰,谱带颜色较深、较明亮,说明电泳法可半定量地确定保护酶活性的大小;供试的5种镰刀菌在可溶性蛋白和EST、SOD、PPO等同工酶水平上存在差异,不同镰刀菌之间某些同工酶谱带数和同一迁移率谱带的亮度和色泽差异非常明显,既存在共同谱带又有特异性谱带,如5种镰刀菌EST同工酶图谱的共同谱带占23.5%,特异性谱带占76.5%,说明5种供试病原菌均属于镰刀菌属,但分属于不同的镰刀菌种。     

水稻种子内生泛菌促进小球藻生长和油脂积累

【目的】从水稻种子中分离出优势内生菌,研究其对小球藻生长、生化组分及油脂积累的影响,探索植物内生菌作为促进微藻生长和生化品质改良的新微生物资源的可行性。【方法】以收获自大田的粳稻品种日本晴种子为试验材料,采用传统表面消毒法分离获得内生菌。内生菌的鉴定采用形态观察和16S rDNA序列分析法。以蛋白核小球藻为研究对象,采用共培养法评估内生菌对小球藻生长及生化指标的影响,以纯藻为对照,将内生菌与蛋白核小球藻种子细胞按菌藻比（10﹕1）接种至BG11培养基进行共培养。采用血球板计数法测定藻细胞数目。同时以纯菌培养为对照,采用平板稀释菌落计数法测定菌藻共培养体系中菌浓的变化曲线。小球藻细胞中叶绿素a和类胡萝卜素的提取采用甲醇浸提法,定量测定采用紫外分光光度法。小球藻油脂提取采用氯仿甲醇浸提法,脂肪酸组分分析采用气相色谱-质谱联用法。【结果】分离获得一株在水稻种子中常见且数量较多的内生细菌,编号为REY-1。REY-1为革兰氏阴性短杆状,经16S rDNA鉴定属于泛菌属Pantoea sp.。REY-1与蛋白核小球藻共培养14 d后,菌藻共培养组中藻细胞浓度达到1.15×10⁸ cells/mL,是对照组的1.97倍。菌藻共培养组与纯菌培养对照组中水稻内生泛菌REY-1的浓度均呈现峰谷式变化曲线,但菌藻共培养组中REY-1的菌浓同比显著低于纯菌培养对照组。14 d培养结束时,菌藻共培养组的菌藻比反转为1﹕100,说明REY-1促进蛋白核小球藻的生长,其自身增殖又受到藻细胞的抑制,二者存在显著的互作效应。菌藻共培养组藻细胞叶绿素a和类胡萝卜素总浓度与对照差异不显著,但单细胞叶绿素a和类胡萝卜素含量分别比对照组下降42.58%和42.68%,二者差异均显著。菌藻共培养组藻细胞油脂含量达到细胞干重的29.90%,比对照组增加78.00%,差异显著,油脂产率（2.14 mg·L^-1·d^-1）比对照组增加了1.68倍。2种培养体系中藻细胞脂肪酸主要组分相似,均为棕榈酸（16﹕0）、亚油酸（18﹕2）和亚麻酸（18﹕3）。REY-1共培养处理使藻细胞的单不饱和脂肪酸相对含量比对照增加了32.37%,短链脂肪酸肉豆蔻酸（14﹕0）相对含量比对照增加了2.12倍,差异显著。此外共培养组藻细胞新合成一种长链脂肪酸-芥酸（22﹕1）,相对含量达到藻细胞总脂肪酸的1.68%。【结论】水稻种子内生泛菌REY-1能在BG11培养液中长期存活并与蛋白核小球藻产生互作,显著提高小球藻生物量和油脂含量,大幅提高小球藻油脂产率并影响脂肪酸相对组成比例的生物学效应。水稻种子内生菌可以作为开发小球藻共生菌的优良微生物新资源。