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121.
表达猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白重组鸡痘病毒的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
从含有猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳蛋白(N)的质粒扩增出N基因,构建禽痘病毒转移载体。该载体含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制之下的PRRSVN基因、P11启动下的报告基因lacZ以及用于同源重组的禽痘病毒基因组的片段。在转移载体转染亲本病毒S—FPV-017感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)之后,采用蓝色表型筛选的方法,筛选到表达N基因的重组病毒,并对其进行了6轮蚀斑纯化。PCR方法鉴定证明重组病毒的基因组中含有完整PRRSVN基因,间接免疫荧光试验证明了PRRSVN蛋白在重组病毒感染的CEF细胞中获得表达,本研究为猪繁殖与呼吸综合征非复制型疫苗的研制打下了基础。 相似文献
123.
124.
疯牛病不仅给全球畜牧经济造成重大损失,而且还严重危害着人类的健康,而造成疯牛病传播的主要原因则是由于携带有致病因子的牛羊肉骨粉饲料及牛羊制品在各国之间的贸易往来。因而加强对进口饲料产品中牛羊源成分的检测是防止疯牛病流行的重要措施。本文就疯牛病的流行病学、病原学、病理变化与诊断以及牛羊源成分检测方法的研究进展作以简述。 相似文献
125.
采用试管凝集反应对海晏县的牦牛进行了布氏杆菌病的血清学检测,共检测177份血清样品,结果检出阳性血清9份,阳性率为5.08%。 相似文献
126.
目的观察结肠小袋纤毛虫(Balantidium coli)在体外培养条件下的生长情况。方法取粪样分别置于4℃~8℃冰箱,28℃和37℃恒温培养箱中,观察记录虫体数量,统计不同温度条件下滋养体生存时间。28℃恒温条件下,将粪液加入不同稀释液(蒸馏水、生理盐水及洛克氏液)中,观察滋养体的活力及数量;采用同样的观察方法,统计滋养体在双相培养基以及免血水培养基内的生存时间。在28℃和37℃恒温条件下,分别观察滋乔体在RSS培养液(Ringer液+血清+米粉)及不加米粉的RSS培养液内的生存时间。结果结肠小袋纤毛虫滋养体在体外的最适生存温度为28℃,在洛克氏夜中生存时间明显长于生理盐水和蒸馏水,在RSS培养基及双相培养基中可在培养24h时达到高峰。在含有诺氟沙星的兔血水培养基中,滋养体的数量可在培养后96h达到高峰,生存时间可达到180h。结论结肠小袋纤毛虫体外培养受很多因素的影响,有待于进一步研究。 相似文献
127.
目的 测不同温度及培养环境对离体绵羊痒螨生存能力的影响,进一步了解痒螨的传播机制,为制定防治瘁螨的有效措施提供理论基础。方法 置室内外自然温度和实验室恒温条件,以及5种相对湿度:50、60、70、80及90%RH,培养观察绵羊痒螨不同虫态(卵、幼虫、幼虫静止期、若虫、若虫静止期、雌虫、雄虫)的生存发育情况;同时观察痒螨在水、痂皮屑、羊毛、羊粪、土壤、皮组织等6种条件下的生存活力。结果 痒螨的最适生长发育温度及繁殖期在21℃-28℃范围内,随着温度的升高,痒螨存活时间缩短,绵羊痒螨对4℃低温有一定耐受力,但对35℃以上的高温耐受力较弱。在同一温度下,相对湿度越高,各虫态存活时间越长。结论 体外观察实验表明痒螨对外界环境有较强的适应能力,在缺乏营养的条件下仍能存活较长一段时间。 相似文献
128.
重组GP5AB蛋白间接ELISA检测PRRSV抗体方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用GST-GP5AB重组蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法。抗原最适包被浓度为2μg/mL,最佳封闭液为0.15%BSA,37℃封闭2 h后,再4℃封闭24 h,血清最适稀释度为1∶200,其作用时间为60m in,酶标抗体最适稀释度为1∶20 000,最适作用时间为90 m in,37℃显色10 m in,S/P≥0.284为阳性,S/P≤0.26为阴性,介于二者之间为可疑的判定标准。该抗原与猪其他4种临床症状类似的疾病的阳性血清反应呈阴性。批内和批间重复性试验结果,变异系数均小于7%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用本方法初步检测了一些疫苗免疫仔猪血清样品,并与重组N蛋白和PRRSV抗原同时进行比较,结果显示3种抗原检测的结果基本一致。 相似文献
129.
为了加强高职院校实验室管理,通过制订和完善实验室管理制度,如实验室技术人员管理、仪器设备的采购和实验用药品的管理、对学生的管理、创新实验项目的实验室管理、实验室网络平台和实验室对外技术服务的管理、病原微生物的保存与处理、病死动物的无害化处理、实验室应急事件处理等措施,实现统筹规划和资源共享,培养学生的实验兴趣,使学生初步掌握畜牧兽医专业实验研究的基本方法和实验操作的基本技能,促进实验室的科学化、规范化、制度化的管理,以达到全面提升学生实践操作技能的目的。 相似文献
130.
小反刍兽疫疫苗毒株与强毒株的鉴别性荧光RT-PCR检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
对GenBank已公布的小反刍兽疫病毒N基因序列进行分析,设计引物与探针,建立PPRV通用型与Ⅱ系疫苗毒特异型二重实时荧光RT-PCR方法,同时建立针对PPRVIV系强毒株的特异型荧光PCR方法。特异性试验和灵敏度试验表明:建立的二重荧光RT-PCR方法可特异性检测PPRV病毒,其HEX信号通道(通用型)和TAMRA信号通道(Ⅱ系疫苗毒特异型)的检测灵敏度分别可达10^1 TCID50/mL和10^2 TCID50/mL,完全满足PPRV的检测要求。用二重荧光RT-PCR方法对西藏采集的14份羊血清样品进行检测,并用建立的Ⅳ系强毒株特异型荧光PCR方法对二重荧光RT-PCR的检测效果进行评估,结果显示,该方法可有效甄别PPRV强毒株和疫苗毒株,避免假阳性结果的出现。 相似文献