六个甘蓝型油菜油酸脱氢酶（FAD2）假基因的克隆和分析

以甘蓝型油菜湘油15为材料,采用PCR方法克隆并分析了56个FAD2基因克隆和47个FAD2基因cDNA克隆,从中发现6个新的FAD2基因拷贝。它们与公布的甘蓝型油菜FAD2基因(AY577313)具有87%以上的同源性,没有内含子,在开放阅读框中存在1~12个终止密码子,其中有2个拷贝具有转录功能。将这6个FAD2基因拷贝在酿酒酵母中进行体内表达实验,通过气相色谱检测脂肪酸组成证明其不具备油酸脱氢酶功能,与对照相比,也没有改变酵母体内脂肪酸组成。由此推测这6个FAD2基因拷贝为假基因。     

复合微生态制剂对肉仔鸡血清生化指标和十二指肠组织形态的影响

本试验旨在研究由鼠李糖乳杆菌和啤酒酵母共生培养物制备的复合微生态制剂对肉仔鸡血清生化指标和十二指肠组织形态的影响。试验选用1日龄健康艾维茵肉仔鸡240只,随机分为6个组,每组4个重复,每个重复10只鸡。对照组饲喂基础日粮,抗生素组饲喂含600 mg/kg金霉素的基础日粮,4个试验组饲喂基础日粮,并在饮水中分别添加0.1%、0.5%、1.0%、1.5%复合微生态制剂。试验结果表明,复合微生态制剂能有效提高肉仔鸡血清钙、磷、总蛋白、球蛋白和白蛋白的含量(P＜0.05),能降低胆固醇的含量和白球比(P＜0.05),并使十二指肠肠绒毛密度增加,长度显著增长(P＜0.05)。复合微生态制剂对肉仔鸡血清中某些生化指标和十二指肠组织形态有一定的影响。     

高产单细胞蛋白酵母的诱变育种及培养条件优化

从啤酒废酵母泥中分离纯化出5株酿酒酵母,以其中单细胞蛋白(SCP)含量较高的SY-5为出发菌株,通过紫外诱变分生孢子,经过初筛和复筛,得到1株高产SCP的诱变菌株SY-5-7,比出发菌株高7.84%,达到48.67%。通过单因素试验对诱变菌株SY-5-7培养条件进行优化,结果表明,最适培养条件为培养基起始pH值5.0、培养温度26℃、接种量2%、发酵周期为70h,碳源为50g/L蔗糖、氮源为10g/L酵母膏。在此基础上进行培养,SY-5-7的生物量比初始条件提高了约35%。     

超氧化物歧化酶在酿酒酵母碱胁迫抗性中的功能研究

[目的]研究酿酒酵母超氧化物歧化酶与其碱胁迫抗性的相关性。[方法]采用可见分光光度法,测定碱胁迫条件下酵母菌超氧化物歧化酶活性（SOD）指标;采用平板滴定生长试验,检测酿酒酵母铜/锌超氧化物歧化酶缺失菌株（sod1Δ）和锰超氧化物歧化酶缺失菌株（sod2Δ）的碱胁迫抗性;采用台盼蓝染色,检测碱胁迫条件下酵母细胞的存活率。[结果]在pH值为7.9条件下处理2h可明显诱导酵母细胞内SOD活性升高;与野生型酵母菌株相比,sod1Δ和sod2Δ基因缺失菌均表现碱胁迫敏感表型,并且碱胁迫条件下细胞存活率明显下降。[结论]超氧化物歧化酶在调控酿酒酵母碱胁迫抗性中发挥重要作用。     

甲壳素降解液防治番茄南方根结线虫病

以番茄为试材,通过盆栽试验,研究4株芽孢杆菌与1株酵母菌组合后对甲壳素的降解效果,以及甲壳素降解液防治番茄南方根结线虫病的效果。结果表明,所有菌株组合后的降解效果最好,其降解液的粘度最低、几丁质酶活性最高。用甲壳素降解液处理番茄根际土壤,可提高土壤中细菌、真菌和放线菌的群落数量,降低番茄南方根结线虫的根结率和根结指数。甲壳素降解液对南方根结线虫病防治效果为54.29%,是甲壳素培养基处理的2.58倍。     

酵母菌属间杂交融合子筛选及其特性研究

通过对酿酒酵母(糖蜜酒精生产菌种)和耐热的马克斯克鲁维酵母原生质体融合,筛选到一株产酒率、耐热性状较两亲株有所提高的融合子R36,并测定了R36最适生长温度、生长曲线、致死温度等生理特性,以及耐酒精浓度、耐糖浓度等发酵性能。     

啤酒酵母葡聚糖对断奶仔猪生产性能及淋巴细胞转化率的影响

为了探讨啤酒酵母葡聚糖在断奶仔猪日粮中的适宜添加剂量及其对断奶仔猪细胞免疫功能的影响,本研究进行了2个试验。试验1选用100头(28±2)d断奶的二元杂交断奶仔猪,按单因子试验设计随机分为5个处理,分别饲喂含葡聚糖0、25、50、100mg/kg和200mg/kg的日粮。结果表明:随葡聚糖添加剂量的增加,平均日增重在14￣28 d及0￣28 d呈二次曲线变化(P<0.05)。试验2选用80头(28±2)d断奶的二元杂交断奶仔猪,随机分为2个处理,分别饲喂含葡聚糖0mg/kg和50mg/kg的日粮。在试验的第14天和第28天,每重复取1头仔猪前腔静脉采血,测定外周血淋巴细胞转化率。结果显示,在断奶仔猪日粮中添加50mg/kg葡聚糖提高了仔猪在14￣28d及0￣28d的日增重(P<0.05)。而且,也提高了仔猪在0￣14 d、0￣28 d及28￣35 d的平均日采食量(P<0.05)。但是对淋巴细胞转化率没有影响。结果表明:在断奶仔猪日粮中添加50mg/kg啤酒酵母葡聚糖,可以提高断奶仔猪的生产性能,而且没有性别差异。     

定向选育氨基酸营养缺陷型苹果酒酵母突变株的研究

以苹果酒酵母(Saccharomyces cerevisive)1750为材料,利用甲基磺酸乙酯(EMS)对其进行诱变,定向筛选出2株氨基酸营养缺陷型突变株,利用生长谱法对缺陷型进行了鉴定、分析。结果表明,诱变菌液在基本培养基中饥饿培养3 h后,菌体浓度趋于稳定;在高氮源培养基中培养4 h后加入制霉菌素,于10 h时结束其抑制作用,能取得较好的诱变效果。该定量化的参数确定方法为营养缺陷型突变株的筛选奠定了基础。     

酿酒酵母细胞壁和细胞膜应对高渗胁迫机制研究

酿酒酵母是食品发酵最常用的菌种之一,酵母应对高渗胁迫的能力决定食品发酵的成功与否以及食品腐败的危害程度。为研究高糖压力对酿酒酵母的影响,测定了酿酒酵母在应对极端高糖压力(0.6 g/mL)时细胞壁几丁质和葡聚糖含量的变化,采用CFW染料和葡聚糖特异性降解酶对细胞壁的敏感性进行分析,并进一步通过双染料(PI和Hoechst 33342)染色对酿酒酵母细胞膜完整性进行分析,最后通过RNA测序研究了酿酒酵母在极端高糖压力下表达的全局差异基因。结果表明:高糖压力改变了酿酒酵母细胞壁和细胞膜的特性。全局转录测试结果显示,高糖压力通过下调酿酒酵母与细胞壁完整性(CWI)信号传导途径相关的基因ROM1、RLM1、PIR3、YGP1、CWP1等,进行细胞壁损伤的应激反应,高糖压力还通过下调酿酒酵母与细胞膜成分相关的基因(如PDR15和YOR1)造成了细胞膜损伤。最后,比较了酿酒酵母在不同压力因子(0.2 g/mL糖、0.4 g/mL糖、0.6 g/mL糖和柠檬醛压力)下细胞依赖RLM1调控的CWI信号传导途径的差异调节,结果发现,在CWI中起关键作用的RLM1仅在0.6 g/mL糖的极端压力下被下调。     

抑制瘤胃甲烷排放的酵母菌的筛选及培养条件优化

减少瘤胃甲烷排放措施的研究已成为当前的研究热点之一。本研究以酒、面包和畜禽专用酿酒酵母产品为原材料,从中分离到三株酵母菌,将其制成冻干粉,通过体外产气试验,筛选出了一株抑制瘤胃甲烷排放效果最为显著的酵母菌株。然后以该酵母菌株作为研究对象,进行分子生物学鉴定;采用分光光度计比浊法测定该酵母菌株的生长曲线,确定菌体生长规律;并以此为依据,设计单因素试验考察该酵母菌株最适宜的生长条件。结果表明,分离得到的酵母菌株均为酿酒酵母saccharomyces cerevisiae;抑制瘤胃体外甲烷排放效果最显著的1株酵母菌分离自面包中;该酿酒酵母菌株的对数生长期为8～24h,其最佳培养条件为:生长温度30℃,pH 5.5,培养基中葡萄糖的浓度4.0%。