ASAS百年纪念论文:21世纪的泌乳生物学

几十年前,人们就已经获悉乳腺功能等方面的知识,如营养物质在乳腺内的代谢路径、激素对乳腺发育的调控和泌乳等。现今研究者已经突破了诸如生长因子、细胞凋亡机制和信号传导等基础的生物学信息,而选择具有完整基因序列的小鼠作为研究调控乳腺功能和乳腺内基因网络的模型,并且随着分子生物学技术的发展,研究者已经能够调控小鼠过表达或完全敲除某一特定基因,从而研究它们在体内环境中的特定功能,进而在发育和组织特异性的基础上,利用乳腺特异性启动子去除与乳腺功能相关基因。这些研究已经证明了啮齿类动物乳腺的发育和功能是非常复杂的,但可为具有相同发育阶段（青春期、妊娠、泌乳和子宫复旧）的反刍动物和猪的乳腺功能提供研究方向。研究者面临的挑战就是如何从大量且价钱昂贵的家畜中获得相似的可用信息。其中的一个解决办法即为通过体外乳腺上皮细胞模型控制基因的表达,如利用小RNA干扰敲除特定的基因等;但功能基因组学、蛋白质组学和代谢基因组学的基础理论信息最终会推动泌乳生物学的巨大发展;这些新技术的利用要求研究者必须有生物信息学的良好基础。未来10年内,祖细胞生物学作为一个热点研究领域,将在促进泌乳的效率研究中也会起着举足轻重的作用。未来培养这一领域的研究者对让他们获得大量的关于家畜乳腺生物学的基础知识,提高家畜的生产性能做出贡献。     

捻转血矛线虫感染性三期幼虫gst基因的筛选及抗干燥功能分析

为研究干燥作用对捻转血矛线虫L3期幼虫mRNA表达的影响,筛选并分析干燥相关表达基因,本试验利用mRNA差异显示技术得到了捻转血矛线虫干燥相关基因,通过相对荧光定量PCR验证所获基因的表达情况,并在秀丽隐杆线虫中通过RNA干扰抑制相关同源基因的表达检测干燥后复苏虫体生存率以研究基因抗干燥功能。结果显示,差异表达序列GH-U02A与已知捻转血矛线虫谷胱甘肽-S-转移酶(GST)氨基酸同源性为94%。对秀丽隐杆线虫Ce-gst-7基因进行RNA干扰后,虫体在干燥后的生存率降低,证明gst基因在线虫中有抗干燥功能。     

广东省猪繁殖与呼吸综合征病毒的限制性片段长度多态性分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）属动脉炎病毒科动脉炎病毒属成员,包含7个开放阅读框（ORFs）,目前有两个血清型,即欧洲型和美洲型,而美洲型毒株又可分为多个亚型。其中ORF1a和ORF1b编码病毒的多聚酶,ORFs2—6编码膜蛋白,ORF7编码病毒的非糖基化核衣壳蛋白。在所有结构蛋白中,GP5被认为是最重要的结构蛋白。GP5或GP5编码的M同源蛋白被认为介导了病毒进入和吸附到靶细胞。除此之外,GP5的中和性抗原决定簇位于其胞外区的中间区域。早期的研究表明,ORF5是PRRSV基因组中功能变异最大的一个区域,其异源性不仅发生在美洲株,欧洲株也证实了其较大的变异。ORF5的遗传多样性与RNA病毒的RNA多聚酶的变异是一致的,且病毒的选择性压力使病毒更能在宿主细胞中扩散。     

鹌鹑血液中小分子RNA表达的初步研究

利用改进的Trizol法首次从鹌鹑血液中提取小分子RNA,比较小分子RNA在组织与血液中的表达差异,为简化小分子RNA的提取程序,提高实验研究效率以及探讨小分子RNA的遗传特性提供可供借鉴的资料.结果发现:①改进Trizol法提取血液中的总RNA,效果显著,条带清晰;②发现血液中只存在一种小分子miRNAs(18～22bp);③影响小分子RNA提取效率的关键因素包括样本的新鲜程度和RNA酶的污染.研究结果表明,通过改进的Trizol法提取血液中小RNA方法是可行的,小分子KNA在家禽血液中的表达具有特异性,snoRNAs,piRNAs在血液中不表达.     

家蚕蛹虫草多糖的提取及纯化工艺研究

蚕蛹虫草[Cordceps militaris(L.)Link]又称北冬虫夏草,是一种潜在的中药和具有滋补作用保健营养品.其有效活性成分虫草多糖(CMPS)被认为是非特异性免疫调节剂,可激活肌体的免疫活性细胞,虫草多糖的纯化为其功能、性质的研究提供材料,为虫草多糖的规模提取提供依据及产品的深度开发(例虫草多糖注射针剂)开辟了新路.     

岩生忍冬不同提取成分的体外抗菌抗病毒活性研究

对岩生忍冬不同提取成分进行抗菌抗病毒活性研究,为岩生忍冬资源开发与利用提供参考资料和理论依据。采用理化反应方法对岩生忍冬主要化学成分进行定性分析;采用微量肉汤稀释法测定岩生忍冬不同提取成分对14种标准菌株的最小抑菌浓度(MIC);以鸭坦布苏病毒(DTMUV)和牛轮状病毒(BRV)分别感染BHK-21细胞和MA-104细胞,通过光镜观察细胞病变结合噻唑蓝比色法,选择治疗指数作为药物体外抗病毒效果的评价指标,采用药物对病毒入侵细胞的阻断作用、直接灭活作用及增殖抑制作用3种方式分别检测岩生忍冬提取物体外抗DTMUV和BRV的效果。结果表明,岩生忍冬含有多糖、黄酮类、有机酸类、酚和鞣质类、三萜、甾体类和皂苷类等化学成分;岩生忍冬的多糖、黄酮、鞣质和皂苷4种成分对14种实验菌株均表现出抑制作用,但其抑菌活性存在一定差异;岩生忍冬水提物对DTMUV和BRV均表现出阻断作用、抑制作用和杀灭作用;岩生忍冬水提物3种作用方式抗DTMUV的药物半数抑制浓度分别为2.01 mg/mL、0.81 mg/mL和0.28 mg/mL,TI值分别为5.81、14.42和41.71;岩生忍冬水提物通过3种作用方式抗B...     

不同浓度乙醇对蜂胶中的铅提取效果的研究

采用不同浓度的乙醇90％、85％、80％、75％、70％、65％、50％，对蜂胶的有效成分进行提取，测定其提取液和残渣中的铅含量，并计算其提取率。结果表明：随乙醇浓度的上升，提取率及提取液中的铅含量增高。其中乙醇浓度为75％、70％和65％的蜂胶提取液中的铅含量均小于1ppm，符合我国食品卫生法关于食品中的铅含量不得超过1ppm的规定。     

茶多糖的提取与初步纯化

本试验采用水煮醇沉淀法研究了影响茶叶多糖(TPS)提取的因素,并利用苯酚-硫酸法测定多糖含量.通过控制和改变提取时间、提取温度、乙醇沉淀体积倍数研究这些因素对提取结果的影响,并比较了Sevag法与三氯乙酸(TCA)法除蛋白质的效果,再利用凝胶柱层析法时TPS进行初步纯化.结果表明.TPS最佳提取的条件为100℃、4 h、2.5倍体积乙醇沉淀效果最佳.粗糖提取率为9.1624%,相对含量为44.6%.TCA法除蛋白质效果较好,经凝胶柱层析,确定本方法所提取的茶叶多糖为一种糖蛋白.     

沉默病毒编码的miRNA——新型抗病毒治疗法研究进展

miRNA是一类在转录后水平调节基因表达的非编码RNA。病毒编码的miRNA在调控病毒基因自身表达及病毒与宿主相互作用方面起着重要作用,这一类miRNA有助于提高病毒的致病性。因此,通过使用与病毒miRNA互补的单链核苷酸即抗miRNA寡核苷酸(anti-miRNA oligonucleotides,AMOs)来抑制病毒miRNA的表达,从而沉默其功能达到抑制病毒复制的效果,这可能成为一种治疗病毒性感染的新方法。文章描述了研究较深入的病毒miRNA与其功能及AMOs的修饰方式,并讨论了AMOs应用的可能性。