烯丙孕素内服溶液的临床药效和靶动物安全性研究

研究国产烯丙孕素内服溶液的临床药效和靶动物安全性,为其新兽药注册和临床合理应用提供依据。通过发情间隔、发情率、发情集中度、妊娠率等指标评价烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情的临床效果;通过比较给药前后的临床体征、血常规指标、血清生化指标及组织病理学变化,评价烯丙孕素内服溶液对靶动物母猪的安全性。实验性临床试验中,国产烯丙孕素内服溶液高（25 mg·d-1）、中（20 mg·d-1）、低（10 mg·d-1）剂量组以及空白对照组的母猪从停药到出现发情反应的间隔时间分别为（3.45±0.81）（3.35±0.66）（5.21±2.65）和（11.71±5.39）d,发情率分别为100%（20/20）、100%（20/20）、95%（19/20）、70%（7/10）。扩大临床试验中,国产烯丙孕素内服溶液组和进口药物对照组的母猪在药物调控下均表现出良好的同期发情效果,发情间隔分别为（3.59±1.07）d和（3.75±1.22）d,发情率分别为96.72%（59/61）和98.33%（59/60）。靶动物安全性试验中,国产烯丙孕素内服溶液在5倍推荐剂量（100 mg·d-1）范围内对母猪的血液生理生化功能和主要脏器未造成明显的不良影响。结果表明,国产烯丙孕素内服溶液调控母猪同期发情,一次量20 mg,连续给药18 d,临床应用安全、有效。     

牛磺胆酸对小鼠腹腔巨噬细胞钙调素基因表达的影响

目的:观察牛磺胆酸(Taurocholate Acid,TCA)对小鼠腹腔巨噬细胞钙调素(calmodulin,CaM)基因表达的影响,探讨TCA对小鼠腹腔巨噬细胞的作用机制.方法:分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,应用荧光定量RT-PCR技术检测TCA对小鼠腹腔巨噬细胞CaM mRNA表达的影响.结果:与LPS刺激组相比较,高剂量(15μg/mL)和低剂量(0.15μg/mL)的TCA组小鼠腹腔巨噬细胞CaM mRNA的表达均显著高于LPS刺激组(P＜0.05).结论:TCA能显著促进小鼠腹腔巨噬细胞CaM mRNA的表达.     

不同方法提取淡色库蚊总RNA的定量比较分析

采用异硫氰酸胍法、Trizol法、Trizol改良法、CTAB法及Trizol+ CTAB 5种方法提取的淡色库蚊总RNA,以期得到最优方法.提取总RNA并用电泳及紫外分光光度计检测,经过Dnase I消化后反转录成cDNA,以此为模板,用CYP6F1引物作定量表达分析.结果表明,与其他几种方法相比,CTAB法提取的效果最好,提取的样品纯度高,完整性好,杂质较少,DNA残留少,降解不明显.CTAB法提取的RNA可以作为eDNA合成和基因克隆的模板,能够满足后续研究的需要.     

西门塔尔牛肌内和皮下脂肪miRNA表达谱及miR-27b靶基因分析

【目的】通过分析西门塔尔牛肌内脂肪和皮下脂肪差异表达miRNA,及对重要的候选miRNA-27b进行靶基因预测及相关生物信息学分析,探索miRNA在动物肌内脂肪生长、发育过程中的作用及其调控机制。【方法】利用miRNA微阵列芯片技术对肌内脂肪和皮下脂肪miRNA表达谱进行检测和分析以筛选差异表达miRNA;qRT-PCR方法验证4个在肌内脂肪显著高表达的候选miRNAs;采用Targetscan生物信息学计算方法预测目标miR-27b（对肌内脂肪沉积可能起重要调节作用）的靶基因,并对靶基因进行GO注释描述、富集分析及KEGG富集。【结果】miRNA芯片分析发现肌内脂肪和皮下脂肪共有88个差异表达极显著miRNA（P＜0.01）。候选的4个在肌内脂肪高表达miRNAs（miR-140、miR-145、miR-143、miR-27b）的qRT-PCR检测结果与芯片分析结果具有很好的一致性。KEGG富集显示,目标miR-27b的预测靶基因在MAPK、Wnt、Hedgehog、TGF-beta、GnRH等信号通路中显著富集,其中在MAPK信号通路中富集度最高。【结论】牛肌内脂肪和皮下脂肪组织中确实存在一些差异表达的miRNAs,某些重要的在差异高表达miRNA（如miR-27b）可能以独特的通路（如MAPK信号）来调节牛肌内脂肪的形成过程。     

玉米样品中转基因玉米Bt176含量检测

根据其检测特异性,转基因产品检测技术可分为筛选、基因、构建和转化体特异性检测四类.由于转化体特异性检测方法的具有高度特异性,目前,一些发达国家对于转基因产品检测方法正逐步过渡到转化体特异性序列的检测方法.本研究针对转基因玉米Bt176的外源基因3'端与玉米基因组DNA相接区序列设计具有转化体特异性的引物和荧光探针.利用实时荧光定量PCR,以已知Bt176含量样品为标准样品建立内外源基因标准曲线,利用该标准曲线对多个玉米样品Bt176玉米成分含量进行检测,结果显示该方法检测结果准确,检测特异性强,Bt176玉米检测极限浓度达到0.001 ng/μL.同时该方法操作简单,适合转基因样品大批量检测.     

呼伦贝尔沙地治理战略布局探讨

根据呼伦贝尔沙地自然地理条件和生态建设工程的实际状况，将呼伦贝尔沙地治理规划成3大措施区、5大治理类型区，在每个类型区提出了相应的治理重点和主攻方向，并结合工程治理、休牧禁牧、生态移民实现沙地的全面保护和治理，消除沙害，使沙区生态环境根本好转，实现沙区经济社会可持续发展。     

离子液体2-甲基咪唑四氟硼酸盐分子结构与氢键关系的研究

离子液体作为一种新型绿色溶剂,已引起广泛关注。采用密度泛函理论,在B3LYP/6-311++G(d,p)水平下,计算2-甲基咪唑与四氟硼酸结合能为-1 100.09 kJ/mol,并且采用NBO理论与AIM研究其结构与分子内氢键作用。     

鸡Lpin1基因3′-UTR遗传变异及其对miRNA结合位点的潜在效应

【目的】研究鸡Lpin1基因3′-UTR遗传变异/单倍型及其在品种间的分布，并预测这些变异对miRNA结合位点的潜在效应。【方法】根据鸡Lpin1基因组序列（GenBank登录号：NC_006090）设计一对特异性引物，采用PCR直接测序结合克隆测序的方法，进行鸡Lpin1基因3′-UTR及其邻近外显子在品种间的遗传变异/单倍型分析。【结果】①从6个品种中发现了8个变异位点，包含两个插入/缺失变异。这些变异均位于鸡Lpin1基因的3′-UTR，3′-UTR的变异频率为17SNPs/kb；②在鸡Lpin1基因3′-UTR区域，从固始鸡、卢氏绿壳蛋鸡中分别检测到7个变异位点，未检测到河南斗鸡品种内的变异；③用次要等位基因频率≥5%的6个变异位点（g.11A＞T，g.77C＞G，g.108_109delinsG，g.110_111delinsG，g.270A＞G和g.348G＞T）进行单倍型的构建和分析，从6个品种鸡中共检测到6种单倍型，其中P1和P4单倍型是群体的优势单倍型，频率均大于30%，河南斗鸡仅包含一种单倍型；④g.77C＞G变异可引起多个miRNA结合位点的增加/丢失。【结论】鸡Lpin1基因3′-UTR具有丰富的变异，3′-UTR变异位点/单倍型在品种间的分布存在明显的差异。     

新靶标铁苋菜在除草化合物筛选研究中的应用

铁苋菜具有特殊的生物学特性,属于旱田难防杂草。采用商品化除草剂硝磺草酮及巴佰金对铁苋菜进行室内防除试验,同时验证与硝磺草酮及巴佰金结构类似的新化合物对其的防除活性。结果表明,结构类似的除草化合物对铁苋菜的防除活性较为接近;铁苋菜作为新的生测靶标,可应用于化合物除草活性生测筛选研究。     

QSAR及其在农药设计中的应用和进展

在介绍定量结构 -活性关系 (QSAR)的基本原理后 ,重点评述了 QSAR各种方法的主要原理、优缺点及其在农药设计中的研究应用进展 ,包括取代基多参数法 (Hansch法 )、Free- Wilson法、分子轨道法 (MO)、距离比较法 (DISCO)、比较分子力场分析法 (Co MFA)、分子模拟法 (MS)、分子对接法 (MD)、人工神经网络法 (ANN)以及 Leapfrog法等。