绵羊痒螨兔亚种MMP2基因的转录水平及其重组蛋白间接ELISA的建立

本研究旨在分析绵羊痒螨兔亚种MMP2基因(PocMMP2)的虫体转录水平,及建立针对重组PocMMP2(rPocMMP2)蛋白抗体的间接ELISA检测方法(iELISA).通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定PocMMP2在不同发育阶段虫体、饱食与饥饿虫体的转录水平,采用原核表达系统获得rPocMMP2,经方阵...     

藏兽药蓝花侧金盏对兔螨的抑杀作用研究

目的:探讨藏兽药蓝花侧金盏对兔螨的抑杀作用。方法:应用体外培养杀螨实验,比较了蓝花侧金盏水提取物、甲醇提取物、乙酸乙酯提取物及石油醚提取物的杀螨活性,并对活性较强的提取物的毒力和治疗兔螨病效果进行了评价。结果:4种提取物中,乙酸乙酯提取物具有较强的体外杀螨活性,高剂量(500 mg/mL)在体外培养6 h内全部杀死螨虫,4种浓度(500、250、125和62.5 mg/mL)的半数致死时间分别为0.743、2.73、5.919和22.536 h,并且其能有效治疗兔螨病,总有效率为90%。结论:蓝花侧金盏乙酸乙酯提取物具有良好的杀兔螨活性。     

兔脑炎微孢子虫感染对家兔细胞免疫功能的影响

以临床症状和病理学变化确诊为兔脑炎微孢子虫感染的家兔为研究对象,用流式细胞计数仪检测外周血CD4+、CEB+细胞比例,并与健康家兔进行比较。结果表明兔脑炎微孢子虫病患兔外周血CD4+细胞比例与对照组相比无明显变化,P>0.05;而CD8+细胞比例明显高于对照组,CD4+/CD8+比值则明显低于对照组,P<0.05。提示兔脑炎微孢子虫患兔外周血CD4+/CD8+比值明显下降,机体免疫力减弱,可能是导致兔脑炎微孢子虫入侵机体,引起家兔发病的重要原因。     

壁面环形延程槽对转盘雾化影响的研究

本文分析了常用水剂农药在转盘上的流动状态，根据动量定量提出了转盘壁面开设一系列的环形延程槽以改善转盘的雾化效果，设计制作了 经转盘，并利用Marlvern粒子测试系统测量了转盘雾化的雾滴直径，试验结果证明壁面开设环形延程槽能够明显减少雾滴中经，改善转盘雾化效果。     

羟甲香豆素微乳对兔痒螨的杀螨活性

为探究羟甲香豆素微乳的杀螨活性和临床应用效果,以自然感染痒螨的家兔为试验动物,通过离体、在体杀螨试验,观察不同时间螨虫的死亡数、死亡率和半数致死质量浓度(LC₅₀)。离体试验结果表明, 9.00 g/L 羟甲香豆素微乳在7.50 min开始出现螨虫死亡,在45.00 min内杀死所有螨;4.50、2.30、1.10和 0.60 g/L 羟甲香豆素微乳杀螨时间分别为85、90、110、130 min,4.50、2.30 g/L羟甲香豆素微乳比5 g/L阿维菌素杀螨时间短（P<0.05）;1.10、0.60 g/L羟甲香豆素微乳与阿维菌素杀螨时间基本一致(P>0.05);羟甲香豆素微乳各剂量组杀螨活性明显高于阴性对照组,其LC₅₀为77.08 g/L,LC₅₀的95%可信限为67.59～87.03 g/L,毒力回归曲线为y= 115.56x +0.13;螨虫的死亡率与羟甲香豆素微乳的质量浓度有显著相关性（r=0.933 7,P<0.01）,羟甲香豆素微乳对兔螨毒性较强、作用较快。在体试验结果表明,羟甲香豆素微乳对家兔螨病具有明显治疗作用。     

7 羟基 4 甲基香豆素衍生物杀螨活性研究

为提高7 羟基 4 甲基香豆素（羟甲香豆素）的杀螨活性,以羟甲香豆素为原料,设计合成8种羟甲香豆素衍生物,通过H NMR和¹³C NMR数据分析进行结构表征,并进行体外杀螨活性检测。结果表明,质量浓度为0.5 g/L的3,6,8 三溴 7 羟基 4 甲基香豆素、8 乙酰基 7 羟基 4 甲基香豆素、7 （4 氯苄氧基） 4 甲基香豆素和7 乙酰氧基 4 甲基香豆素在24 h的致螨死亡率分别为100%、73.0%、68.3%和66.2%,与羟甲香豆素比较,差异极显著（P<0.01）;质量浓度为0.5 g/L的7 苯乙氧基 4 甲基香豆素和7 苄氧基 4 甲基香豆素在24 h的致螨死亡率分别为35.5%和34.7%,与羟甲香豆素比较,差异显著（P<0.05）。说明结构修饰是研发高活性羟甲香豆素类杀螨药物的可行途径,这对杀螨新药剂的进一步研究及应用具有重要指导意义。     

绵羊痒螨巨噬细胞迁移抑制因子重组蛋白对兔外周血单个核细胞Th1/Th2型和Th17/Treg型特征因子表达的影响

为了初步探讨绵羊痒螨巨噬细胞迁移抑制因子（PoMIF）对健康新西兰兔外周血单个核细胞（PBMC）中Th1/Th2和Th17/Treg细胞平衡的变化。采用RT-PCR从绵羊痒螨总RNA中扩增得到MIF全长基因,经原核表达、纯化重组PoMIF（rPoMIF）蛋白,并分析其氧化还原酶和互变异构酶活性。筛选与健康新西兰兔PBMC孵育的最佳rPoMIF浓度,且用最佳浓度rPoMIF（0.2 μg·mL^-1）与PBMC共同孵育0、1、6、12、24、36 h后收集细胞,用荧光定量PCR检测其Th1/Th2/Th17/Treg细胞相对应的特征性转录因子T-bet/GATA-3/RORc/Foxp3和特征性细胞因子IFN-γ/IL-4/IL-17A/IL-10 mRNA表达变化。结果表明：PoMIF全长363 bp,rPoMIF大小为32 ku（含pET32a标签蛋白19 ku）,且具有互变异构酶活性;rPoMIF刺激后PBMC中Th1细胞的T-bet和IFN-γ先下降后上升,Th2细胞的GATA-3和IL-4均呈下降趋势,且T-bet/GATA-3和IFN-γ/IL-4比值在12、24和36 h均升高;Th17细胞的RORc和IL-17A在各时间点下降,而Treg细胞的Foxp3和IL-10在各时间点升高,且RORc/Foxp3和IL-17A/IL-10比值在各时间点均变低。rPoMIF可造成家兔外周血单个核细胞的Th1/Th2和Th17/Treg平衡分别向Th1和Treg偏移。     

螨虱灵对兔螨的离体杀灭试验和临床应用效果

应用不同质量分数的自组配方制剂螨虱灵，对兔螨进行了离体杀灭试验，并对自然感染的病兔进行了治疗。结果表明，1000，2000倍的螨虱灵液的疗效显著，治愈率均达100%，临床上建议使用2000倍液。     

兔脑炎原虫的分离与鉴定

3只临床表现斜颈、麻痹和打滚的病兔,经病理组织学检查诊断为脑炎原虫病.取其脑组织制成乳剂,接种于兔肾细胞、Vero细胞、猫肾细胞和兔脉络丛细胞.用前3种细胞均分离出原虫.该虫体表现为多种形态,呈杆状、圆形或卵圆形;Gram染色呈阳性,Goodpasture氏染色呈红色.用20%H_2O_2处理虫体,在相差显微镜下见到虫体极丝的伸展.通过虫体的形态学、染色特征和极丝的突出实验,鉴定该虫体为脑炎原虫.兔肾细胞、Vero细胞和猫肾细胞的感染率分别为40%、40%和5%,而在兔脉络丛细胞原代培养物中未检查到虫体.     

兔脑炎原虫的超微形态与发育

用电镜连续７代动态地观察了培养细胞中兔脑炎原虫的超微结构与发育状态。脑炎原虫含有细胞核，但无线粒体、内质网和高尔基复合体等细胞器，其表面有几根极丝。脑炎原虫在培养细胞中除二分裂增殖外，还有裂体增殖和配体增殖。由于脑炎原虫有３种增殖方式，故在光学显微镜下呈多形态结构。