侧耳菌原生质体融合子的子实体发育及遗传重组

通过原生质体融合技术得到侧耳菌亲和与非亲和菌种的融合产物,亲和菌种间体细胞杂交得到异核体,而非亲和菌种杂交得到保留有双亲基因的结合体（核）。结合核子实体发育受光照、温度、营养及培养基的物理状态等因素影响。结合体不能形成初始融合菌落,但大多数成熟的子实体中存在锁状联合,与异核体相比,结合体具生长速率缓慢,有丝分裂阶段形成锁状联合及子实体发育不同步等特点。体细胞杂交后代可以分离到四种遗传型菌落：原养型、一种亲本营养缺陷型、另一亲本营养缺陷型及重组子营养缺陷型。一些结合体具备异常等位基因,说明在受体细胞染色体重排中有大片段随机整合位点。     

青霉、木霉对平菇菌丝生长的影响及消毒液的初筛

[目的]研究青霉、木霉对平菇菌丝生长的影响,并筛选用于防控空气及环境中病原菌的有效消毒液。[方法]在平菇生长 PDA培养基上接种霉菌开展菌丝对峙试验,观察相交时两者菌丝生长状况。研究过氧化氢、新洁尔灭、84消毒液、来苏尔、高锰酸钾、75％医用酒精对侧耳木霉、绿色木霉、哈茨木霉、桔青霉、托姆青霉和短密青霉共6种青霉、木霉菌株的生长抑制作用。[结果]菌丝对峙试验表明,青霉、木霉菌对平菇的危害主要有争夺营养、竞争性杀伤菌丝、产生拮抗、侵袭缠绕穿透平菇营养菌丝、产生毒素毒害生长菌丝。6种消毒液对不同的霉菌抑制作用各有不同,均有一定的抑制,效果强弱与霉菌的不同属有明显的区别。新洁尔灭对6种霉菌的抑制作用差异显著,3％过氧化氢、84消毒液、5％来苏尔、高锰酸钾和75％酒精对3种木霉作用差异不显著,对3种青霉作用差异显著。[结论]新洁尔灭对青霉木霉菌的预防抑制效果显著,可作为生产中消毒防杂用药使用。     

杏鲍菇采后木质化相关基因实时定量PCR中内参基因的选择

【目的】筛选出合适的内参基因,为分析不同贮藏时期杏鲍菇(Pleurotus eryngii)子实体中木质化相关基因的表达提供支持。【方法】以4℃低温贮藏0,3,6,9,12,15和18d的杏鲍菇子实体为材料,采用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,RT-qPCR)技术,分析了β-actin、18SrRNA、β-tubulin、ELF和GAPDH 5个候选内参基因在不同贮藏时期杏鲍菇的表达情况;通过GeNorm和NormFinder 2种软件筛选出最稳定的内参基因;选取最佳内参基因,采用相对表达定量法对木质素合成途径中的关键酶,即苯丙氨酸转氨酶(Phenylalanina ammonia-lyse,PAL)基因的表达进行定量分析。【结果】5个内参基因均能特异扩增,其中GAPDH基因表达丰度较低,不适合用作内参基因;经GeNorm软件分析计算,β-actin、β-tubulin、ELF、18SrRNA表达稳定度平均值M分别为0.527,0.527,0.584,0.875,最适内参基因组合为β-actin、β-tubulin和ELF;由NormFinder软件分析计算,β-actin、β-tubulin、ELF、18SrRNA稳定值S分别为0.221,0.356,0.583,1.092,β-actin稳定性最高;综合分析认为β-actin的表达稳定性最高,为最佳内参基因;以β-actin为内参基因,发现4℃低温贮藏3,6,9,12,15和18d的杏鲍菇子实体中PAL基因表达量分别比新鲜样品(0d)增加了11.3%,10.8%,11.3%,11.5%,11.4%,10.7%。【结论】β-actin可作为杏鲍菇子实体采后贮藏条件下品质变化相关基因表达研究的内参基因。     

Composition of nutrients in the sclerotium of the mushroomPleurotus tuber regium

A tuberous sclerotium of the mushroomPleurotus tuber regium was analysed for proximate, amino acid and mineral content. The sclerotium had low protein, ether extract, amino acid and mineral content compared to the pileus of the same mushroom and similar mushrooms. Cystine, methionine, serine, arginine and lysine were exceptionally low. Because the sclerotium is milled with melon seeds in traditional preparation of a vegetable meat-substitute, nutrient intake of a human subject consuming 100 grams of the meat-substitute was compared to intake of one consuming 100 grams of stewed broiler meat. The meat-substitute provided more minerals than broiler meat but only a fraction (40–65%) of the amino acids of broiler meat.     

35个山东主栽平菇菌株的ISSR遗传差异分析

平菇是我国北方栽培的主要食用菌品种,其菌株多,遗传背景复杂。本研究采用ISSR标记技术对35个山东省主要栽培的平菇菌株进行DNA指纹分析,并利用NTSYS-PC分析软件对这些供试菌株的遗传差异性进行聚类分析。研究结果表明,从107个随机引物中共筛选到16个备用引物,通过利用16个引物对这35个平菇菌株的DNA进行ISSR-PCR,共扩增出259条清晰的DNA片段,大小介于0.3～4.2kb。聚类分析发现,相似水平在66.5%左右时,35个菌株分为3个组群,即黑色、灰黑色和白色子实体3个组群。本研究为山东省平菇遗传信息库的建立和平菇遗传育种工作奠定了一定的基础。     

利用废弃烟叶栽培糙皮侧耳初探

以棉籽壳培养料为对照,测定了烟叶渣培养料中糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)的菌丝满袋时间及子实体中氨基酸、无机盐、重金属和烟碱的含量.结果表明,当配方为79％烟叶渣、10％谷壳、10％麸皮,辅料添加量为1％(其中石膏:碳酸钙:过磷酸钙=2:2:1)时,糙皮侧耳的采收时间比棉籽壳组缩短了3d,且子实体中有15种氨基酸的含量高于棉籽壳组,重金属汞、铅、镉、砷的含量均符合《中华人民共和国农业部行业标准》(绿色食品食用菌NY/T 749-2003),烟碱含量＜7.8mg/kg.     

香菇DNA导入平菇原生质体及转化子鉴定研究

采用氯化苄方法提取香菇总ＤＮＡ，用Ｇｅｎｅ Ｐｕｌｓｅｒ Ⅱ电击系统将香菇ＤＮＡ导入平菇单核原生质体，通过香菇ＤＮＡ的导入，利用基因互补原理获得了能出菇的转化子１－１和１３－４８，并对转化子进行了拮抗试验、菌丝生长速度分析，酯酶同工酶分析和ＲＡＰＤ分析。     

原生质体紫外线诱变选育无孢高产平菇的研究

本研究对无孢平菇菌株P22原生质体进行紫外线诱变处理,经拮抗试验,孢子印检测,扫描电镜和出菇试验,筛选出一株中低温型、高产、菇形好的无孢平菇突变菌株4-10。品比结果显示,4-10新菌株两年平均生物效率达112％,较出发菌株P22增产19.8％,较对照菌株P51增产22.7％。研究结果表明,原生质体紫外线诱变是一种快速简便且有效的育种方法。     

杏鲍菇漆酶的生物学特性

从杏鲍菇、双孢蘑菇、美味侧耳、茶薪菇、凤尾菇和香菇子实体中提取漆酶，用分光光度法测定酶活，发现杏鲍菇漆酶酶活最高，实验结果表明，杏鲍菇漆酶是一种较稳定的高温酶，其最适PH为3．0，最适温度60℃；Pb^2＋,K^ 对酶活有较大的激活使用，而Fe^3 ,Fe^2 则对酶活有较强的抑制作用。     

四种抗菌素对侧耳科三种食用菌菌丝生长的影响

该研究测试了卡那霉素、头孢霉素、氨卞青霉素、潮霉素4种抗菌素对秀珍菇、平菇和杏鲍菇菌丝生长的影响。结果表明:卡那霉素、头孢霉素、氨苄青霉素对3种食用菌菌丝生长及菌落形态基本没有影响,有些浓度处理对菌丝生长还具有微弱的促进作用。潮霉素对3种食用菌菌丝生长有很大的抑制作用,12.5mg/L的潮霉素能够完全抑制秀珍菇的菌丝生长,50mg/L的潮霉素能够完全抑制平菇和杏鲍菇菌丝的生长,研究结果为进一步建立3种食用菌的农杆菌介导的遗传转化体系打下了基础。