柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG2基因的克隆与表达

根据生物信息学预测的基因序列设计引物,应用RT-PCR方法从柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子总RNA扩增获得了鸡柔嫩艾美耳球虫表面抗原2(surface antigen 2,SAG2)基因序列,将其与pGEM-T easy载体连接后转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,以带有限制酶切位点的特异性引物用PCR方法扩增不含SAG2 N端信号肽序列的ORF序列后克隆至表达载体pET-32 a(+),构建了重组表达质粒pET-32 a(+)-SAG2,并将其转化至E.coliBL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了SAG2重组抗原在大肠杆菌的高效表达,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白的分子量约为47 ku。菌体经超声处理后进行SDS-PAGE分析表明,表达蛋白以包涵体的形式存在。     

荧光定量PCR检测小鼠卵母细胞中Mad2 mRNA的表达

目的:应用SYBR G reen I染料法建立检测Mad2 mRNA表达的实时荧光定量PCR的方法,并探讨小鼠卵母细胞减数分裂成熟中Mad2 mRNA的表达。方法:采用实时荧光定量PCR的方法,以SYBR G reen I为荧光染料,梯度稀释的重组质粒为模板制作标准曲线,并以此方法分析了小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中Mad2 mRNA表达的动态变化。结果:建立了实时荧光定量检测方法分析小鼠卵母细胞中Mad2 mRNA的表达,该方法灵敏、特异,扩增效率接近100%。进行了标准曲线的制作,以及对目的基因Mad2转录水平的绝对定量。结论:实时荧光定量PCR是检测基因表达水平的理想选择,在小鼠卵母细胞减数分裂成熟过程中Mad2 mRNA表达存在动态变化。     

猪瘟病毒的分离鉴定及其E2基因序列分析

2004~2005年上海和江苏3家猪场发生仔猪急性死亡,用ELISA鉴别试剂盒证明为猪瘟感染。用PK15细胞分离病毒,传代至第3代无细胞病变,RT-PCR扩增E2基因为阳性,扩增片段经纯化后克隆入T载体并进行序列测定。通过DNAStar软件对3株病毒的基因序列进行了比较,同时构建了系统进化树,结果表明,三株病毒分离株均扩增出269bp片段并且核苷酸序列100%同源,这3株与Alfort、Shimen株、兔化弱毒株(HCLV)和Brescia4个标准毒株核苷酸序列同源性均在90%以上,说明在江苏、上海地区分离得到的3株猪瘟病毒与流行毒株在基因序列上没有发生大的变异。     

喷施KH_2PO_4对胡萝卜采种的影响

通过叶面喷施磷酸二氢钾(KH2PO4)溶液,对胡萝卜种株生长势、种子产量、质量和种子活力进行了研究。结果表明,种株抽薹后喷施2g·L-1KH2PO4溶液不仅可提高叶片光合速率和蒸腾速率,而且可显著提高种株的茎粗、节长、花盘横径及生物产量,可使种子产量和千粒重显著增加,种子的发芽活力显著提高。     

EHEG O157△ler/stx(pBR322∷stx 1/2B∷eae)的构建与生物学特性分析

为了获得安全性好,对出血性大肠杆菌具有良好免疫保护作用的疫苗株,本实验以构建的O157△ler/stx基因缺失突变株为载体,将决定特异性粘附的eae全基因插入到质粒pBR322∷stx1/2B中,构建了基因工程菌O157△ler/stx(pBR322∷stx1/2B∷eae),对该基因工程菌进行生物学特性分析,实验结果表明,该菌正常培养可表达eae;具有粘附HEp-2细胞的特性;该菌培养上清对Vero细胞没有毒性作用;给小鼠口服接种该工程菌后可在肠道中定居至少10 d;14日龄小鼠口服活菌量为5×109CFU/只,小鼠生长正常,没有出现任何临床症状;该菌通过口服免疫小鼠可以诱导肠道粘膜免疫应答和体液免疫应答.这些结果表明,该工程菌安全性好,免疫原性强,是有价值的预防EHEC O157感染的基因工程疫苗候选株.     

无籽西瓜嫁接稀植配套新品种兴科无籽2号的选育

兴科无籽2号是安徽省无子西瓜研究所1998年以MR四倍体为母本、XR8二倍体为父本杂交,1999 年育成的无籽西瓜新品种。该品种中晚熟,果实黑皮红瓤,中心可溶性固形物含量11％-12％,耐重茬,耐湿、耐贮运。生长势和分枝力强,1株多果和连续坐果习性好。667m2栽植200-300株,单株结果3-5个,单果重5-7kg,产量 4000-5000kg／667m2,是较理想的嫁接稀植技术配套品种。适合华南、长江流域和淮河流域栽培。     

飞船搭载对西瓜SP_2植物学性状及果实经济性状变异的影响

在飞船搭载西瓜种子(品种浙蜜2号高代自交系)SP1(航天1代)试验的基础上对SP_2(航天2代)的试验结果进行分析,研究了各SP2株系植物学性状和果实经济性状等的变异和遗传稳定性。结果表明:西瓜各SP2株系果实大小及中心可溶性固形物含量继续发生变异,尚未稳定,有91.6%的株系平均中心可溶性固形物含量高于对照,某些株系内部植株果实表面产生蜡粉、种子变大等变异,其他性状如植物学性状等与SP_1及对照相似,未发生变化。     

季铵化壳聚糖对冬枣的保鲜作用

为研究季铵化壳聚糖(HPTAC-CTS)对冬枣的保鲜效果,于-1℃～-2℃冷藏温度下,采用2%季铵化壳聚糖对冬枣进行涂膜保鲜处理,可保鲜贮藏冬枣80d。贮藏后果实不变形,果皮硬度高,果肉仍然很脆;腐烂率低于4%,好果率超过96%;失重率低于<5%,外观、口感可达贮藏前的水准;含糖量、含酸量、维生素C含量基本不变,保持原有风味和营养。     

不同浓度CO2对黄瓜光合速率的影响

研究了CO2浓度在200、350、500、700、1 000 mg/kg处理下的黄瓜叶片的光合速率.结果表明:增加CO2浓度,可显著提高黄瓜叶片的光合速率,在强光下,效果尤其明显.黄瓜叶片光合速率对不同CO2浓度的响应都有一个由低到高再低的趋势.空气CO2浓度,细胞间隙CO2浓度与光合速率是一致的,在高CO2浓度下,气孔导度一般不是光合速率的限制因子.