适于玫烟色拟青霉液相发酵生产的培养基和初始接种量及pH

从美国引进对刺吸式口器害虫具侵染力的玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)菌株Pfr116,用5种培养液在25 ℃下进行深层培养,以菌丝生物量作为指标筛选出了适合于工业生产的发酵液配方(w/v):食用蔗糖2%,马铃薯20%,蛋白胨0.1%,NaNO3 0.01%,KCl 0.01%,MgSO4 0.025%,MnSO4 0.005%,FeSO4 0.005%及KH2PO4 0.05%.用此培养液对Pfr116 菌株进行48 h的深层发酵,可获>20 mg/mL的干菌丝产量,与萨氏培养液的菌丝产量无显著差异.通过对液培初始接种量和pH值进行优化,确定最佳初始接种量为培养液的菌丝含量1.5 ～2.0 mg/mL,最佳初始pH值为5～7.     

发酵法生产虫草素研究进展

综述液体和固体发酵法生产虫草素的研究状况,并展望其发展趋势.     

淡紫拟青霉发酵滤液对大豆胞囊线虫趋化性的影响

 实验室条件下,研究了大豆胞囊线虫幼虫对大豆根和根浸出液的趋化性以及淡紫拟青霉代谢产物对其趋化性的影响。结果表明,大豆胞囊线虫二龄幼虫(J₂)对大豆根存在着一定的趋化性,而淡紫拟青霉发酵滤液对J₂存在明显的驱避性。在根浸出液、真菌滤液及其混合液剂处理下,大豆胞囊线虫J₂在WA平板上靠近处理液的0~1cm区间中分布率存在极显著差异(P <0.0 1),而加样时间(液剂与线虫同时放置或提前2 4h处理)对其分布率没有显著影响。大豆幼根蘸取滤液后对线虫J₂在该区间的分布与不经处理的幼根差异显著(P <0.0 5),证明淡紫拟青霉发酵滤液可以明显地降低线虫与大豆根的亲和力,并强烈抑制线虫对大豆根的侵染。     

蛹虫草与其他天然抗氧化剂协同抗氧化作用研究

[目的]研究在蛹虫草提取液中分别按不同比例添加灵芝、香菇、猴头、紫苏和银杏提取液后组成的复合液抗氧化活性的情况变化。[方法]用微波法制备提取液,将灵芝、香菇、猴头、紫苏以及银杏提取液中的1种、2种或3种按不同的体积比与蛹虫草提取液组合,测定复合液总还原能力和清除羟自由基能力,并与单一提取液的测定结果相比较。[结果]蛹虫草提取液A与紫苏提取液E、银杏提取液F组合而成的复合液抗氧化性较好,其余组合抗氧化活性相对于单一提取液均有不同程度提高。[结论]食药用菌提取液与药用植物提取液组合而成的复合液具有较高的抗氧化活性,且大多数复合液的抗氧化活性好于单一提取液。     

淡紫拟青霉T-DNA插入突变体的表型分析

研究淡紫拟青霉T-DNA插入突变体,鉴定突变体的表型特征,为淡紫拟青霉致病机制分析及致病相关的基因克隆奠定基础。PCR检测筛选的14株T-DNA插入突变体,观察和测定菌落形态,菌落生长速率,产孢量,孢子萌发率和菌丝干质量等生物学性状,并比较突变体致病力。结果表明突变体均含有beta-tubulin基因序列,T-DNA已整合进入野生型菌株20-7的基因组中。通过与野生型菌株对比,发现突变体菌落形态发生了不同程度的改变。菌落生长速率明显增大的菌株占全部菌株的85.71%,只有BN-11菌株的菌落生长速率降低。产孢量显著变大的菌株有BN-11和BN-12,为菌株总数的14.29%。孢子萌发率发生改变的菌株占78.57%。菌丝干质量发生明显增大和减少的菌株都占全部突变体的21.43%。筛选获得了1株致病力增强的突变体BN-11和11株致病力显著降低的突变体。     

蛹虫草人工优质高产栽培技术研究

本试验通过对四个人工分离蛹虫草品种的菌丝体生长情况、子实体产量进行对比分析，结果显示：沈阳人工分离种（S）为优质品种，武汉（W）、河南（H）、北京（B）种为淘汰种。以大米加4个蚕蛹为基质的培养基子实体生物学效率最高；液体菌种生长周期短，生物学效率较高。     

反相高效液相色谱法分离和制备虫草素的方法研究

采用反相高效液相色谱法检测和制备了北冬虫夏草子实体中的虫草素,并对自制晶体与虫草素标准品进行了紫外和红外谱图比较。结果表明,子实体虫草素含量为2.82‰,在所设定条件下,虫草素与样品中的非目的成分达到了预期分离,重现性好,保证了流出曲线的峰对称性及基线的全分离。结果还表明,自制晶体的紫外特征与标准品比值的文献值相近,红外光谱规律一致,两者结构相同,为同一物质,制备虫草素纯度为99.7%。     

北冬虫夏草有效成分连续分离流程研究

根据溶剂的固定相与流动相之间的相对关系,采用了二元和四元组合的溶剂系统,顺次采用超临界流体萃取法、醇沉法、低压正相硅胶色谱法(富集虫草素,去除杂质)、反相高效制备液相色谱法、分步结晶法和反相高效液相色谱法,子实体及其中间产物中的虫草素含量变化情况。结果证明,95%以上的虫草素仍分布在超临界萃取后的子实体及其醇沉的上清液中,保证了含虫草素的中间产物未在制备前大量流失。北冬虫夏草子实体中3种有效化学成分的得率依次为:甾醇类物质8.51%,虫草多糖(CM-1为主)25%,虫草素(99.7%)0.036%。试验得知高纯度虫草素在水溶液中极不稳定,提出最佳保藏溶剂的极性或介电常数(ε)为73.5。     

虫生真菌蝉拟青霉及其角变株的比较研究

蝉拟青霉GZUIFR-JZD3菌株在沙氏培养基上可产生孢子型(JZD3-C)和菌丝型(JZD3-M)两类不同的角变。为了进一步研究其差异,笔者比较了两个角变株与原始菌株(JZD3)在不同培养基上的生长及产孢量。研究了其对甘蓝蚜的致病性并测定了它们的胞外多糖、蛋白酶、蛋白质、SOD和POD的含量。结果表明:3个菌株形态差异较大,在多数培养基上,JZD3生长最快,产孢量最大;胞外多糖、SOD、POD含量以及对蚜虫致病率也是JZD3菌株最佳;而蛋白酶和蛋白质含量则分别是JZD3-C和JZD3-M较高。     

蛹虫草产胞外多糖的液体优化培养条件研究

对蛹虫草进行发酵培养基配方正交设计试验 ,经统计学分析后得出的优化培养基配方如下 :玉米粉4% ,黄豆粉 0 6 % ,酵母汁 0 3% ,K2 HPO4 0 0 5 % ,Mg SO4 0 0 5 % ,接种量 3% ,pH5 5。此培养基组合在 2 5℃培养 1 4 4h的胞外多糖产量可达 1 83g/L。碳源因子对胞外多糖的产生影响显著