Duplex PCR 快速检测松材线虫

利用duplex PCR技术对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)与拟松材线虫(B. mucronatus)的rDNA部分核苷酸序列扩增.根据松材线虫与拟松材线虫的ITS1序列区别,设计出特异性引物,检测松材线虫的存在;在5.8S,28S保守序列区设计通用引物,检测伞滑刃线虫的存在.     

通过自制PCR试剂盒确诊雏鹅细小病毒感染

通过 PCR条件选择 ,组装了可用于确诊鹅细小病毒 (goose parvovirus,GPV)感染的试剂盒。首先根据 Gen Bank中已发表的鹅细小病毒不同株的核苷酸序列 ,设计并合成了 GPV特异性简并引物 ,利用该引物确定 PCR扩增条件 ,并鉴定了扩增产物的特异性。根据上述扩增条件 ,组装 GPV诊断试剂盒。试剂盒共有 3个反应管 ,贮于 - 2 0℃ ,应用时取 1号管 ,加入煮沸的肝脏悬液上清 ,2、3号管分别为阴性和阳性对照。按固定条件扩增 ,结果显示 ,待检病料的检出率在 96 %以上。该试剂盒操作简单 ,效果稳定 ,可用于 GPV感染的确诊     

Spread of potato virus Y in potato cultivars (Solanum tuberosum L.) with different levels of sensitivity

The aim of this work was to correlate the appearance of the symptoms, multiplication and spread of virus after mechanical inoculation of potato (Solanum tuberosum L.) cultivars showing different levels of susceptibility and sensitivity to Potato virus Y^NTN (PVY^NTN). The potato cultivars used were the resistant cultivar Sante and susceptible cultivars Igor, Pentland squire and Désirée. The spread of the virus PVY^NTN in infected plants was monitored using different methods: DAS-ELISA, tissue printing, immuno-serological electron microscopy and real-time PCR. In all three susceptible cultivars, the virus was detected in the inoculated leaves 4–5 days after inoculation. From there virus spread rapidly, first into the stem, then more or less simultaneously to the upper leaves and roots. Real-time PCR was shown to be very sensitive and enabled viral RNA to be detected in non-inoculated leaves of susceptible cultivar Igor earlier than other methods. Therefore, for exact studies of plant–virus interaction, a combination of methods which detect viruses on the basis of their different properties (coat protein, morphology or RNA) should be used to monitor the spread of viruses.     

夏季狗牙根草坪不同建植方法及秋季交播黑麦草对成坪效果的影响

以狗牙根Cynodon dactylon种子和营养体为材料，在武汉地区，对5种不同建植方法建成的草坪从盖度变化、成坪时间、均一性、建植成本及秋季交播多年生黑麦草Lolium perenne后翌年狗牙根的草坪质量等方面进行综合比较。结果表明：采用夏季建植狗牙根草坪并于秋季交播多年生黑麦草的方法来建植四季常绿草坪，狗牙根采用撒茎覆沙法效果最佳，其他方法依次为开沟埋茎法、闻铺草皮法、穴植草茎法；种子直播法在翌年需重新建坪。     

退耕还草产业化技术经济效果评价方法探讨

以平凉市退耕还草产业化技术开发为例,以产业化系统链中各子系统间的功能协调统一为依据,以退耕还草产业化机制为纽带,在研究建立平凉市退耕还草产业化技术经济效果包括4个一级指标(基础指标、配套指标、服务指标和效益指标)和17个二级指标体系的基础上,采用层次分析法(AHP法)、隶属度函数法和综合效益指数法作为退耕还草产业化技术经济效果的评价方法.经比较得出:平凉市退耕还草产业化技术开发综合指数达到0.595 1,属初步产业化阶段,相对发展指数达到27.268%,年均产业化进步速度达到6.817%.     

植物育种的物理学方法

介绍了草原生态恢复中选育优良牧草种子的一些物理学方法,包括电场、磁场、物理辐射、激光、离子束和交变应力等在植物的生物学效应、诱变育种和转基因技术中的应用.     

九种根际促生菌最适培养条件初探

测定了分离自燕麦和小麦根际九株促生菌对温度、pH值、光照及培养方式的需求,结果表明:虽然九株促生菌适应范围较广,即在5~45℃、pH4~9、3种光照条件(12h黑暗12h光照、24h光照和24h黑暗)和3种培养方式(全天振荡、间歇振荡和静止培养)下均能较好生长,但不同菌株的最适培养条件不尽相同。通过对各菌株的最适培养条件进行了测定和分析,为后续确定促生菌的最佳发酵条件和生态适应性评价提供了依据。     

猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

用PCR方法配合生化鉴定，从有肺炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressive atrophic rhinitis，PAR)症状猪的鼻拭子中分离出66株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida，Pm)。然后做了药敏试验，并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测，用豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对产毒素多杀性巴氏杆菌(Toxigenie Pasteurella multocida，T^ Pm)进一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一致；PCR分型表明有46株为D型Pm，18株为A型：Pm，1株为B型Pm，1株无法定型；有8株用PcR检测为T^ Pm；豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株T^ Pm的进一步鉴定也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8株T^ Pm都为D型，都分离于有严重PAR症状的猪。     

实时荧光定量PCR构建绵羊PrP基因标准品质粒和标准曲线

羊痒病是一种传染性的致死性神经退行性疾病,常引起绵羊和山羊发病,该病在欧洲流行了大约250年,但是它的流行病学和传播机制还不是很清楚.正常的朊蛋白（PrPc）不能引起神经退行性病变,虽然目前已经对许多组织的PrP mRNA进行了检测,但是对它的生物学功能还知之甚少,对PrP基因表达的机制尚不清楚.研究显示,不同组织来源的细胞中朊蛋白的表达程度差异很大,主要出现于神经细胞中.PrPc在细胞中的高水平表达可促使PrPc向PrPsc转变,目前的研究中,对绵羊PrP mRNA的转录机制尚未阐释清楚.因此,对绵羊外周和中枢系统PrP mRNA的表达进行定量,有助于探讨各组织器官中的PrP在羊痒病的发生过程中的作用.