黑曲霉3928植酸酶phyA基因PCR扩增条件的优化

根据国内外报道,利用微生物发酵技术生产植酸酶,是获得大量稳定高效植酸酶的主要途径,大量高浓度的植酸酶主要存在于真菌中,但是由于黑曲霉天然菌株产植酸酶酶量低,并且直接使用成本也较高。构建基因工程菌以提高产酶量,进而进行大规模的发酵生产,已成为全球对植酸酶的研究重点。因此,有必要建立直接对植酸酶基因片段有效扩增的相关技术,优化反应条件。聚合酶链式反应(PCR)用于扩增位于两端已知序列之间的DNA区段,自Mullis在1983年建立以来,已成为分子生物学及相关领域的经典试验方法,技术本身也获得长足进步,可靠性不断提高。对PCR扩增…     

次氯酸钠处理对E.tenella球虫卵囊的影响

１４日龄爱维茵鸡接种Ｅ．ｔｅｎｅｌａ广东株７．５ｄ后,扑杀,其盲肠粘膜刮取物及内容物以１：５次氯酸钠（含活性氯不低于７．５％）处理２０ｍｉｎ后,离心清洗,加２．５％的重铬酸钾,置敞开的大平皿中,２８℃环境下孢子化。同时设未经次氯酸钠处理的对照组。４８ｈ与７２ｈ后分别取样检查其孢子化率。结果发现,次氯酸钠处理组孢子化率与未经次氯酸钠处理的对照组无显著差异。所得孢子化卵囊接种鸡的试验结果表明,低剂量下,未处理组显示出较强的致病力,不过平均卵囊数相差不大;较高剂量下,处理组病变略轻,而平均卵囊数明显高于未处理对照组。     

犊牛大肠杆菌药敏试验

1材料 1．1供试菌株的分离签定与培养 1．1．1菌株分离 从我县中兴农牧奶牛场因腹泻死亡的病犊一头,取肝脏作细菌分离,接种于普通营养琼脂平板,37℃培养24小时,挑取表面光滑、边缘整齐、灰白色、半透明的小菌落,接种于麦康凯琼脂平板,37℃培养24小时,再从麦康凯琼脂平板上挑取孤立的红色菌落。     

猪丹毒QL251弱毒株安全性及免疫原性试验

猪丹毒ＱＬ２５１弱毒株是我所保存的猪丹毒强毒菌种Ｃ４３００９的变异株，对其进行了毒力和免疫原性的测定，该菌株毒力原来是３－５个活菌可致死小白鼠，现在对小白鼠皮下注射７．４×１０~８活菌，小白鼠全部健活，对敏感猪皮下注射９．４×１０~（１０）活菌均健活且无任何反应；小白鼠免疫９－１２个活菌７２％保护，对猪免疫２９０－５９０×１０~４活菌１００％保护。     

大肠杆菌对兽医临床抗菌药物耐药情况分析

对2001年在山东农场分离到的大肠杆菌，按Kirby-Bauer药敏纸片法进行了21种兽医临床常用抗菌药物的耐药性测试，结果耐药现象严重。多重耐药性在大肠杆菌中普遍存在，常用药物如喹诺酮类、四环素类和磺胺类等大部分抗菌药耐药率很高。     

鸡大肠杆菌多价灭活苗的制备与应用

近年来，由于大肠杆菌耐药性菌株不断产生，用抗菌药物进行预防和治疗很难取得满意的效果，而且大肠杆菌血清型很多，不可能生产适合各地区全价疫苗。笔者针对内蒙古包头市某大型养鸡场在不同饲养地点分离的6个具有优势血清型的大肠杆菌菌株，制备大肠杆菌多价灭活菌苗，经安全性检验、稳定性检验，表明该疫苗安全有效：     

一株猪源大肠埃希氏菌卡那霉素耐药基因的研究

提取一株猪源大肠埃希氏菌卡那霉素耐药菌株E.coliBJ96147的质粒DNA进行转化,转化子能稳定表达其全部抗生素抗性,表明E.coliBJ96147对卡那霉素（K）、庆大霉（GM）、链霉素（S）、氯霉素（C）、四环素（Tc)、复方新诺明等六种抗生素的抗性由耐药性R质粒介导;根据已发表的编码卡那霉素抗性的磷酸转移酶[APH（3′）-Ⅱ]钝化酶基因的核苷酸序列,设计合成了一对引物P1和P2,用PVR技术检测其钝化酶基因,结果该引物扩增出了预期的578bp大小的PCR产物,淫限制性内切酶HindⅢ进行酶切分析,发现产物被切成二条带,与预出现的389bp及189bp二条带相符,说明PCR可用于检测猪源大肠埃希氏菌卡霉那素磷酸转移酶[APH（3′）-Ⅱ]钝化酶基因。     

大肠杆菌(O157)酶联免疫检测及注意事项

1材料与方法 1.1材料 抗原为Eae-Stx1/2B纯化蛋白;EHEC O157标准菌株(EDL933).抗体为单抗2H9纯化腹水,蛋白浓度为4.16毫克/毫升. 1.2方法 EHEC O157检测方法的建立.抗原包被浓度和抗体工作浓度的初步选择,用PBS调整Eae-Stx1/2B纯化蛋白浓度为8、4、3、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06微克/毫升,纵向包被1小时,封闭,洗涤,单抗从1:1000开始进行倍比稀释,横向加入各孔内,37℃反应1小时,加酶标二抗,洗涤,加底物液显色后终止,测定OD值.以OD值接近1.0,且前后稀释度出现较大变化时,该孔的包被浓度初步确定为最佳包被浓度,该孔抗体的稀释倍数为单抗的初步工作浓度.抗原的最佳包被温度和包被时间的确定.取5块酶标板,用初步确定的Eae-Stx 1/2B纯化蛋白的最佳包被浓度包被酶标板,分别于37℃0.5小时、37℃1小时、37℃2小时、37℃3小时、37℃4小时温育和4℃过夜;以初步确定的单抗工作浓度进行间接ELISA检测,测定其OD值.OD值最大最稳定的为最佳包被温度和时间.     

肉鸡大肠杆菌病发病情况报告

鸡大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌的某些致病菌株所引起的一类疾病。其特征是引起鸡的心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、滑膜炎、大肠杆菌病肉芽肿、败血症、肠炎、脑炎等多种临诊病型。随着我国集约化养鸡业的不断发展，饲养密度的增加，鸡的大肠肝菌病呈明显的上升趋势，给养鸡业造成了巨大的经济损失。笔者2004年在禽病诊治工作中，遇到两起肉鸡出现高致死率的病例，经过临床及实验室诊断，证明为鸡大肠杆菌病。现将发病情况报告如下：     

猪源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及其生物特性研究

为研究和开发动物新型微生态制剂,改变抗生素滥用、药物残留等现状。通过热处理从健康猪肠道内容物、粪便、土壤中分离芽孢杆菌,结合形态特征、生理生化特性及16S rRNA序列分析进行鉴定;对菌株耐胆盐性、酸性耐受性及产酶情况等特性进行研究。结果表明,分离到11株芽孢杆菌,经细菌形态学、生理生化特征和16S rRNA序列分析的结果显示,3株为枯草芽孢杆菌;特性研究结果证实菌株SR-096具有较好的耐胆盐性、酸性耐受性和产脂肪酶、淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的能力。说明枯草芽孢杆菌SR-096具有较强的抗逆性和潜在的益生性能,为研制微生态制剂提供了优良的菌种参考。