Fusion Expression and Purification of Marek’s disease virus Tegument Protein VP16 and Its Antibody Preparation

马立克氏病病毒(Marek’s disease virus ,MDV)UL48基因编码的蛋白与单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus ,HSV)衣壳蛋白VP16为同源物，将其克隆入pET-32a载体中，获得pET-VP16, 转化Escherichia coli BL21感受态细胞，经IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳显示:融合蛋白获得可溶性表达，表达蛋白的相对分子量约为67 kD；将表达的融合蛋白过His·Bind柱，获得纯化的蛋白，将该蛋白免疫家兔，制备多克隆抗体。通过间接ELISA和Western blot鉴定制备的多克隆抗体的效价和特异性，结果表明，该抗体具有较高的特异性，间接ELISA效价大于2×10－5。     

侧金盏花CBF转录激活因子基因片段的克隆

[目的]探索CBF转录激活因子基因在侧金盏花中是否存在。[方法]以侧金盏花基因组DNA为模板,根据拟南芥CBF基因序列的保守区设计1对特异性引物,通过PCR扩增获得1个DNA片段,将其克隆到pUCm-T载体中,转化大肠杆菌TG1,筛选阳性克隆并对其进行测序鉴定。[结果]测序结果显示通过PCR扩增获得的基因片段长448 bp。在GenBank中检索,该序列与从拟南芥和其他作物中克隆的CBF同源基因序列同源性较低,说明是一个新的基因片段,初步认定该片段是侧金盏花CBF基因片段。[结论]该研究为进一步克隆侧金盏花CBF转录激活因子基因全长序列、鉴定其生物学意义奠定了基础。     

植物激活蛋白对白术根腐病和斑枯病的诱抗效果及其对产量的影响

植物激活蛋白能显著提高白术对病害的抗性。试验表明700~1300倍液植物激活蛋白喷施白术叶面,隔30 d喷1次,对白术根腐病和斑枯病的诱抗效果分别达53.9%~81.2%和39.7%~63.3%。植物激活蛋白能显著提高白术商品性和产量,白术的单术重量增加35%以上,白术产量提高46%以上。6月初使用700倍激活蛋白,间隔30 d,整个生长期使用5次对白术抗病增产效果最好,对斑枯病诱抗效果达63.3%,增产129.93%。     

UK114基因的克隆和表达载体的构建

本研究采用PCR法扩增得到重组UK114 cDNA序列,将其克隆于T-easy载体并进行了序列测定与分析。结果表明该序列全长1 017 bp,有一个开放的阅读框(40 nt~450 nt),可编码137个氨基酸(14.2 kDa),与UK114的序列比较,同源性为91%,突变的86个核苷酸中都为无义突变,开放阅读框中仅有一个核苷酸突变。此外,本实验构建了pBV114表达载体,选择阳性克隆提取质粒进行酶切,琼脂糖检测获得约1 kb和3.7 kb的两个片段。     

基因活化剂对紫色甘薯块根产量的影响

基因活化剂使用浓度(A)设3个水平375×(A1)、750×(A2)、1 500×(A3)稀释液;使用时间(B)设4个水平浸渍种苗基部1 h(B1)和1次(B2)、2次(B3)、3次(B4)叶面追肥,收获时测定块根鲜重.结果表明A1,A2,A3的块根产量分别比对照提高38.60%,61.70%和42.54%,B1,B2,B3和B4的块根产量分别比对照提高38.74%,64.33%,47.37%和40.06%,与对照差异均达显著水平(P＜0.05).A2B2为最佳水平组合,平均块根产量比对照提高89.77%,且与所有水平组合之间都有显著差异(P＜0.05).用750倍的基因活化剂浸渍种苗基部1 h再追肥1次,可显著提高紫色甘薯的块根产量.     

植物激活蛋白对水稻抗性相关基因转录水平的影响

 在cDNA芯片分析结果的基础上，对从交链孢真菌（Alternaria spp.）中提取的新型植物激活蛋白对水稻抗病相关基因转录水平的影响进行了研究，同时检测了抗病防御相关酶活性和稻瘟菌抗性的变化。结果表明，水稻幼苗经 2 g·ml-1激活蛋白喷雾处理后，NPR1基因从第天时转录水平开始提高，第3天和5天时转录活性继续增强；EIN2基因的转录在第1天、3天时转录水平显著提高，第5天时又有所回复，但仍高于对照；CTR1的转录在第1天时虽无影响，但第3天和第5天转录水平明显降低，而PR4 的转录在各检测时段均未表现明显变化。5 d后叶片的稻瘟菌病情指数和平均每叶病斑数开始显著降低，14 d时对稻瘟菌的诱抗效果最为明显。叶片苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性在处理后1 d迅速增加，7 d和9 d时活性增加达到高峰期； -1,3-葡聚糖酶活性在处理后3 d开始增加，5 d时增幅最大，随后增幅降低，14 d时略低于对照水平；几丁质酶活性在处理后前3 d低于对照，5 d后活性平稳增加，14 d时降至略低于对照的水平。     

糯与非糯小麦配粉对馒头品质的影响

[目的]研究糯与非糯小麦配粉对馒头品质的影响.[方法]对6个非糯小麦品种品质指标间的相关性进行分析.[结果]馒头总评分与面粉白度、弱化度、衰减值呈正相关,与其他品质指标呈负相关,但都没有达到显著水平.[结论]糯小麦面粉制作馒头的评分较低,不适合制作馒头.糯小麦与非糯小麦配比为1∶9时馒头的评分最高.     

翠冠梨引种试验及整形拉枝对其经济性状的影响

为了丰富洞庭湖平原果树品种资源,对浙江梨树优良品种翠冠梨进行了引种试验,结果表明,翠冠梨在生长结果习性、果实品质、搞递性与适应性等方面均优于本地梨树品种黄花梨.对翠冠梨进行拉枝试验表明,拉枝能促进翠冠梨侧枝生长和树冠迅速形成,有利于提高产量.     

发展黄南州草地畜牧业的战略对策

根据黄南州的自然条件和易灾特点,其草地畜牧业的发展,大体可分为两步走:第一步是从强化牧业基础建设入手,变被动抗灾为主动防灾,集中解决冬,春季节牲畜的“温饱”问题。同时,顺应自然条件,发展季节性畜牧业生产,走建设养畜和科学养畜的道路。第二步是在畜牧业生产基本稳定的基础上,加强畜牧业商品基地、服务体系建设,发展区域化、专业化、集约化生产和社会化服务,把资源优势转化为商品优势,向草地畜牧业现代化进军。     

淮南猪染色体的研究

采用微量外周血淋巴细胞培养以及核仁组成区银染色(Ag—NORs)技术,对淮南猪体细胞核型以及核仁组成区进行了研究,结果表明,淮南猪二倍体细胞染色体组成为38xy(公)或38xx(母),NF=64;细胞分裂中期银染阳性核仁组成区为1、2、3和4的频率分别为0.3659、0.2683、0.1951和0.1707,平均有2.17条染色体的核仁组成区被正染。