柔嫩艾美耳球虫MIC4-N的真核表达

应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫的MIC4-N端基因并去掉信号肽,为了表达检测和纯化的方便,设计引物时改变了3＇端的终止密码子,使MIC4-N的C末端带有c-myc和6His抗原标签。通过双酶切,使加工好的MIC4-N基因连接到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,转化JM109感受态细胞。再经EcoRⅠ与NotⅠ双酶切、菌落PCR及测序鉴定,证明目的基因与真核表达载体pPICZαA构建成功,单酶切重组表达载体、电转转入GS115酵母感受态细胞中。用含高浓度Zeocin的YPD平板筛选酵母菌落,菌落PCR法鉴定转化成功的阳性菌,在BMMY培养基中摇瓶培养,并用甲醇诱导,经SDS-PAGE及Western Blot鉴定,蛋白分泌表达成功。     

植酸酶替代磷酸二氢钙对异育银鲫生长的影响

为了研究在饲料中用植酸酶替代不同水平的磷酸二氢钙（Ca（H2PO4）2）对异育银鲫生长及肠道排空速度的影响,以2.2g左右的异育银鲫为试验对象,用植酸酶分别替代饲料中0％（对照组Ⅰ）、20％（试验组Ⅱ）、40％（试验组Ⅲ）和60％（试验组Ⅳ）的Ca（H2PO4）2,对应的植酸酶梯度为O、500、1 000和1 500 U/kg,饲养56 d.结果表明,饲料中用植酸酶替代Ca（H2PO4）2后,对各试验组异育银鲫的生长无显著影响（P＞0.05）;添加500、1 000和1 500 U/kg植酸酶能提高异育银鲫肠道食糜排空率（P＜0.05）.因此,从生产上来看,异育银鲫饲料中可用植酸酶替代一定量的Ca（H2PO4）2,植酸酶的添加量以1 000 U/kg饲料为宜.     

Reducing Ammonia Volatilization from Maize Fields with Separation of Nitrogen Fertilizer and Water in an Alternating Furrow Irrigation System

The objective of this 2-yr field trial, with a central composite rotatable design, was to assess and quantify the effects of separation of nitrogen fertilizer and water with alternating furrow irrigation （SNWAFI） practices on soil ammonia （NH3） emission during the summer maize （Zea mays L.） growing season. Ammonia volatilization after N sidedress and irrigation ranged from 4.8 to 17.0 kg N ha-1 and 6.2 to 20.6 kg N hal, respectively, in 2008 and 2009. The lower N input contributed to lower NH3 loss but lower yield, whereas the higher N input induced higher yield as well as higher NH3 loss. Ammonia intensity （NH3 volatilization per crop yield） after N sidedress and irrigation was 1.2-3.0 kg NH3-N t-1 yield in 2008 and 1.1-3.2 kg NH3-N t1 yield in 2009. The predicted minimum NH3 intensity in 2008 was 1.6 kg NH3-N fl yield and was obtained with the combined application of 127 kg N ha^-1 and 108 mm irrigation water. In 2009, the predicted minimum NH3 intensity was 1.3 kg NH3-N t-j yield and was obtained with the combined application of 101 kg N ha-1 and 83 mm irrigation water. We conclude that SNWAFI practices with optimum rates of water and fertilizer can significantly reduce soil NH3 intensity and maintain yield. It was more beneficial for sustainable farming strategies to minimize the NH3 intensity rather than reduce absolute NH3 emissions alone.     

O3与O3/H2O2两个体系降解除草剂2,4-D反应特性研究

分别采用O3、O3/H2O2体系降解苯氧羧酸类除草剂2,4-D,探讨了降解过程中反应温度、pH值、O3混合气流量、有机物初始浓度等操作条件的变化对降解动力学的影响。结果发现,温度和pH值的影响较大,O3流量影响最小,温度升高、pH值增大、臭氧流量增加、2,4-D初始浓度降低均有助于降解速率的提高。O3/H2O2体系中,H2O2能促进O3分解产生大量自由基,导致2,4-D反应活化能降低。和O3相比,O3/H2O2体系降解效果好,降解时间短,反应条件温和,操作费用低,是很有发展前景的高级氧化技术。     

NaCl、Na2SO4和Na2CO3对南瓜幼苗的生理胁迫效应

为探讨中性及碱性盐胁迫作用差异及其原因,用Na+浓度分别为120、240和480 mmol/L的NaCl、Na2SO4和Na2CO3溶液处理南瓜幼苗6 d,将3种不同钠盐对南瓜幼苗的胁迫程度进行了比较。结果表明,Na2SO4胁迫除对南瓜幼苗干物重抑制程度大于NaCl外,其余指标的变化趋势都显示出NaCl盐害程度高于Na2SO4。但在Na2CO3胁迫下,南瓜幼苗干物重和叶绿素含量下降,脯氨酸含量明显增加,MDA含量上升加剧,而使根系活力下降。这些变化表明,Na2CO3对南瓜幼苗的伤害作用最大,NaCl次之,Na2SO4最小。     

尿素在砖红壤中的淋失特征——Ⅰ．NH^＋4-N的淋失

通过室内大型模拟土柱研究不同尿素施甩量与砖红壤中NH4-N的淋失关系。结果表明：各施肥处理渗漏液中20cm处NH^ 4-N的最高浓度值与施肥量大小成正相关，60cm和120cm处渗漏液中NH^ 4-N浓度值与施肥量关系不大，但120cm处渗漏液中NH ^4-N浓度仍超过水体富营养化标准0．2mg／L。在砖红壤中，尿素以NH^ 4-N形态大量淋失的可能性不大。     

表达猪轮状病毒VP4基因重组乳酸球菌表达载体构建及免疫原性分析

 【目的】构建猪轮状病毒主要保护性抗原VP4基因的重组乳酸乳球菌口服疫苗,为猪轮状病毒的防治提供有效方法。【方法】将猪轮状病毒免疫保护性抗原基因VP4主要结构功能区定向插入乳酸菌表面表达载体pNZ8112,电转化乳酸乳球菌NZ9000,构建了pNZ8112/NZ9000乳酸乳球菌表面表达系统。通过SDS-PAGE、Western-blot和免疫荧光方法鉴定,以此活菌系统口服免疫6～8周龄Balb/c小鼠,测定了免疫动物的局部体液免疫和系统免疫应答。【结果】证明插入的外源基因在菌体表面得到了正确表达,表达猪轮状病毒免疫保护性抗原的重组乳酸乳球菌免疫动物后,分别在粪便、泪液和阴道洗液中检测到了特异性分泌型IgA抗体和在血液中检测到了IgG抗体的存在;体外细胞中和试验结果表明,血清抗体对猪轮状病毒的中和效价为1﹕40。【结论】表达猪轮状病毒免疫保护性抗原的重组乳酸乳球菌口服免疫动物能够产生良好的局部和系统体液免疫应答而且具有免疫中和效力。     

密度调控对女贞人工林土壤铵态氮和硝态氮季节变化的影响

以江苏扬州市江都区7年生女贞人工林为对象,研究密度调控对其土壤铵态氮（NH4＋-N）和硝态氮（NO3--N）含量剖面分布特征及季节变化的影响。结果表明：不同调控密度下女贞人工林土壤NH4＋-N和NO3--N含量均随着土层深度的增加而逐渐降低,且表现出明显的季节变化;3种密度调控下土壤NH4＋-N 含量均是秋冬两季较高,春季最低,夏季又有明显回升,且3种密度中的2275株/hm2下NH4＋-N含量在4个季节均高于另外2种密度;土壤NO3--N 季节变化与NH4＋-N大体一致,在春季含量最低,但不同密度间变化趋势差异较大;土温、含水量及有机质均与土壤NH4＋-N和NO3--N含量存在显著的相关关系（p＜0.05）,且在夏季均达到极显著相关（p＜0.01）。     

玉米秸秆生物炭对土壤无机氮素淋失风险的影响研究

采用室内土柱模拟淋溶方法,研究生物炭对不同土层土壤淋溶液体积以及铵态氮(NH+4-N)和硝态氮(NO-3-N)淋失量的影响。实验所用的生物炭以玉米秸秆(炭化温度500℃)为原料制成,分别按照炭土质量比0(T1)、1%(T2)、2%(T3)和4%(T4)施用于褐潮土中。结果表明:淋溶实验过程中,淋溶初期生物炭对土壤NH+4-N和NO-3-N的固持作用比较明显,且对NH+4-N的固持主要发生在0~10 cm土层,而对NO-3-N的固持主要发生在10~40 cm;生物炭能够有效增加土壤的持水能力,与不添加生物炭处理(T1)相比,T2、T3、T4处理的土柱累积淋溶液体积分别减少了10%、20%、26%,无机氮素淋失量显著降低,分别减少27%、48%、61%;无机氮素淋失量的减少主要来自NO-3-N,相对于不添加生物炭处理,T2、T3、T4处理NO-3-N累积淋失量分别为62.4、44.4、34.5 mg,分别减少了28%、49%、58%。总的来说,土壤中添加玉米秸秆生物炭能够有效降低土壤无机氮素的淋失风险。     

大白菜 PHK4基因的功能初探

细胞分裂素参与植物生长和发育的许多生理过程。植物细胞分裂素受体属拟南芥细胞分裂素受体基因AHK4同源的细胞分裂于组氨酸蛋白激酶家族,是植物双组分信号系统的组分。克隆了大白菜的素受体基因PHK4（Pekinensis putative Histidine Kinase 4）,采用反向遗传学的方法对其功能进行分析,初步阐述了大白菜PHK4作为细胞分裂素受体起作用,对研究调控大白菜与细胞分裂素相关的生长发育过程奠定了理论基础。