人源H3N2亚型猪流感重组病毒的分离鉴定及全基因序列分析

本研究由疑似猪流感病料样品中分离一株病毒,通过HA、HI、电镜观察、生物学特性测定及全基因序列测定表明,分离病毒株为H3N2亚型人流感病毒和H1N1亚型古典猪流感病毒(SIV)的重组体,命名为A/Swine/Fujian/F2/07(H3N2).该分离株含有8个基因片段,共13 442 bp,与GenBank中登录的H3N2亚型人流感病毒、H1N1亚型古典SIV和H3N2亚型SIV进行比较分析显示:分离株的HA、NS、NA基因与H3N2亚型人流感病毒株的同源性分别为84.7 ％～98.1％、94.4 ％～99.5％和88.6 ％～97.6％;与H3N2亚型SIV的核苷酸同源性分别为87.7％～98.5％、82.5 ％～99.9％和87.6 ％～98.4％;M基因与H3N2亚型人流感病毒和SIV的同源性均在90.1％以下,而与H1N1亚型古典SIV的同源性在97.6％以上.基因型分析表明分离株的PB2、PBI、PA、HA、NP、NA和NS基因片段来源于1975年～1982年的人流感病毒,而M基因来源于H1N1亚型古典SIV,充分证明猪作为流感病毒“混合器”的作用.     

鹅高致病性禽流感病理组织学观察

本文对发生H5N1高致病性禽流感禽场的鹅进行了病理学观察，证实此场鹅禽流感在剖检上以眼结膜潮红出血；心肌条纹状坏死，条带样出血；胰腺有白垩状或透明坏死点；胃肠出血等为特征。组织学观察以非化脓性脑炎，胰腺坏死，心肌坏死，坏死性脾炎为主要病变，揭示了鹅禽流感的病理学变化特征。     

施氮对新灌区不同间套种植模式产量及茬口养分特性的影响

在甘肃秦王川新灌区的大田试验表明，春小麦//蚕豆、春小麦/油菜、春小麦/马铃薯及春小麦//草木樨等4种间套种植模式均能提高农田的生产力；豆料作物与牧草显著地改善耕层的茬口养分特性，草木樨茬口不但速效养分含量高于其他模式，对提高土壤有机质和降低土壤容重也有明显效果。施氮能显著提高各种植模式的综合经济产量，但过量施氮时增产效果又有所下降，且在各茬口的速效磷含量产生较弱的负效应。     

冬季种养结合对稻田土壤微生物量及有效碳氮库的影响

以双季稻冬闲田种植绿肥与养鸡结合的新型种养制度为平台,通过冬季绿肥和鸡粪还田,减少水稻生育期化肥用量,探讨“冬季绿肥-双季稻”轮作种植制度和“冬季种养结合-双季稻”种养制度下对稻田土壤微生物碳、氮和可溶性有机碳、氮的影响。试验包括5个处理,分别为冬闲(F)、冬季种植黑麦草(R)、冬季种植紫云英(M)、冬季种植黑麦草与养鸡结合(RC)以及冬季种植紫云英与养鸡结合(MC)。结果表明,在整个试验的动态过程中,微生物量碳、氮及可溶性有机碳、氮含量高低总体趋势表现为绿肥养鸡>绿肥>冬闲,各处理间差异显著(P<0.05);“冬季种养结合-双季稻”种养制度能显著提高土壤微生物量碳、氮和可溶性有机碳、氮。各处理微生物量碳、氮和可溶性有机氮在3月24日达到最大值,RC、MC、R和M处理微生物量碳最大值分别为492.22,464.91,432.34和435.48 mg/kg;微生物量氮的最大值分别为118.20,101.03,70.13和85.46 mg/kg;可溶性有机氮的最大值分别为1001.47,926.21,832.80和870.75 mg/kg;可溶性有机碳在早稻苗期达到最大值,RC、MC、R和M最大值分别为278.95,266.40,246.13和249.84 mg/kg。微生物量碳含量的高峰在早稻移栽初期、晚稻孕穗期和灌浆期,微生物量氮的高峰出现在早稻分蘖期、齐穗灌浆期和晚稻孕穗期,可溶性有机碳在稻田养鸡及成鸡出栏后较高。与冬闲田种植绿肥和休闲相比,冬闲稻田种植绿肥结合养鸡对增加微生物生物量的贡献更大,并显著提高土壤的可溶性有机碳氮,间接反映了种养制度能提高土壤有机碳、氮的矿化速率和土壤的活性有机碳氮以及满足水稻生长期间自身养分需求。     

一种适用于双向电泳的家蚕微孢子虫总蛋白的制备方法

本文对适用于双向电泳的微孢子虫总蛋白提取方法进行了探讨。研究表明，采用液氮多次冻融结合手工研磨，再用裂解液抽提的方法能够得到产率较高且适用于双向电泳的家蚕微孢子虫总蛋白。     

植物内整流K~+通道AKT1的研究进展

K~+是植物生长发育所必需的大量营养元素。内整流K~+通道(Arabidopsis K~+transporter 1,AKT1)属于Shaker家族,是介导K~+吸收的重要通道,为质膜的K~+感应器,参与调节细胞的生长发育、调控气孔运动及植物蒸腾作用,能够提高植株的抗旱耐盐性,因而在植物生长过程中具有重要作用。该文概述了AKT1的结构、组织表达定位和表达调控及功能等方面的研究进展,并提出采用蛋白组学、基因工程技术及RNAi手段深入研究K~+、Na~+吸收及转运的协同调控机制,提高作物对土壤中K~+的利用效率及AKT1在植物生理代谢、抗逆性中的作用。     

禽流感病毒H9N2亚型三重PCR检测方法的建立

为建立简便快速检测禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)并同时区分出H9、N2亚型的方法,本试验根据基因库中H9亚型AIV的HA基因、N2亚型AIV的NA基因及AIV的M基因序列,分别设计了3对针对这3种基因保守序列的引物,建立了AIV H9N2亚型的三重PCR检测方法。应用该方法对H9N2亚型AIV模板进行PCR扩增,可得到3条与试验设计相符的目的条带,分别为313 bp (HA基因)、451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9亚型的N2亚型AIV模板进行扩增,出现2条特异性扩增条带,即451 bp (NA基因)和667 bp(M基因);对非H9、N2亚型AIV模板进行扩增则只出现一条目的条带,即667 bp(M基因);对其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。敏感性试验结果显示此三重PCR方法最低检出限为10^-2 ng/μL。应用所建立的三重PCR方法对120份临床病料进行检测的结果与病毒分离鉴定结果一致。各项试验结果均表明,该方法对于禽流感病毒尤其是H9、N2亚型禽流感病毒的检测具有快捷、特异、灵敏的特点。     

PA-X基因的长度变化对H3N2犬流感病毒复制能力和致病性的影响

H3N2犬流感病毒(canine influenza virus, CIV)已在中国多地的犬群中流行,是禽流感跨宿主感染并形成新分支的近期案例。研究表明,PA-X基因与甲型流感病毒适应新宿主的能力相关,且其长度能够影响甲型流感病毒的复制及致病能力。为了解PA-X基因的长度变化对H3N2 CIV复制能力及致病力的影响,本研究利用H3N2 CIV的8质粒操作系统,拯救了三株重组H3N2 CIV毒株：PA-X基因表达大小为232个氨基酸多肽的亲本病毒CIV＿PA-X＿232;对PA编码区第191、192位氨基酸的密码子进行改造,PA-X基因不表达蛋白的重组病毒CIV＿PA-X＿Knock;对PA+1编码区第232位氨基酸进行突变,PA-X基因表达大小为252个氨基酸多肽的重组病毒CIV＿PA-X＿252。通过比较3株重组病毒的聚合酶活性,在MDCK细胞中的复制效率及对小鼠致病性的差异,来评价表达不同长度的PA-X基因对H3N2 CIV的影响。结果显示,CIV＿PA-X＿252和CIV＿PA-X＿Knock的聚合酶活性显著(P<0.05)高于CIV＿PA-X＿232,且CIV＿PA-X＿...     

罐装奶粉真空度形成影响因素研究

奶粉营养成分丰富,为避免罐装奶粉在货架期内出现胀罐情况,保证产品货架期的稳定性,一般采用气调包装并在罐内形成一定真空度。为研究罐装奶粉真空度影响因素,制备罐装奶粉并测试不同条件下罐内的真空度。通过对罐装奶粉进行长期跟踪测试,研究存储时间、存储温度、气体比例对罐内真空度形成的影响。结果表明,随着存储时间增加,罐内真空度呈现先快速增大后趋于平缓的趋势;在存储前期,37℃、47℃条件下的样品形成的真空度较常温更大;二氧化碳（CO2）的比例对罐内真空度形成的影响显著。     

Putative human and avian risk factors for avian influenza virus infections in backyard poultry in Egypt

Highly pathogenic influenza A virus subtype H5N1 causes significant poultry mortality in the six countries where it is endemic and can also infect humans. Egypt has reported the third highest number of poultry outbreaks (n = 1084) globally. The objective of this cross-sectional study was to identify putative risk factors for H5N1 infections in backyard poultry in 16 villages in Damietta, El Gharbia, Fayoum, and Menofia governorates from 2010–2012. Cloacal and tracheal swabs and serum samples from domestic (n = 1242) and wild birds (n = 807) were tested for H5N1 via RT-PCR and hemagglutination inhibition, respectively. We measured poultry rearing practices with questionnaires (n = 306 households) and contact rates among domestic and wild bird species with scan sampling. Domestic birds (chickens, ducks, and geese, n = 51) in three governorates tested positive for H5N1 by PCR or serology. A regression model identified a significant correlation between H5N1 in poultry and the practice of disposing of dead poultry and poultry feces in the garbage (F = 15.7, p < 0.0001). In addition, contact between domestic and wild birds was more frequent in villages where we detected H5N1 in backyard flocks (F = 29.5, p < 0.0001).