培养液容积,深度和更替时间对水牛牛巴贝斯虫体外培养的影响

采用改进的微气静相培养技术，了培养液容积、深度、更替时间对体外培养牛巴贝斯虫的影响。结果表明：增减液层深度对牛巴贝斯虫的生长繁殖影响明显，理想的液层深度是６．２ｍｍ；在保持单位面积上培养液容量不变的情况下，培养容积大小对培养无影响；隔２４ｈ更换上清液，能使牛巴贝斯虫稳定地生长，延长更换增减液的时间能显著地抑制牛巴虫的生长繁殖。试验还在此基础上清液利用较大容积（１６．０ｍｌ）对１株牛巴贝斯虫进行了长     

鹿结核病流行概况

鹿结核病是由牛型结核分支杆菌(Mycobacterium bovis)引发的一种恶性传染病。目前,世界上大多数鹿场都可以检测到其病原体,该病对养鹿业的危害是巨大的。现就鹿结核病在世界范围内的流行情况、流行特点以及某些国家对鹿结核病的控制政策等作一综述。     

几种人工牛黄新配方与天然牛黄护肝作用的比较

用比较药理学研究方法，在同等条件下，对人工件黄新配方Ｈ、Ｉ和Ｊ与牛黄（天然、人工）在护肝作了步比较观察，结果表明：人工牛黄、新配方Ｈ、Ｉ和Ｊ都具有降低ＣＣＩ４诱发小鼠血清谷丙转氨酶升高的作用；新配方Ｈ和Ｉ还具有降低Ｄ－半乳糖胺诱发小鼠血清谷丙转氨酶升高的作用。     

牛分枝杆菌哺乳动物细胞侵袭蛋白4E的原核表达、纯化及其圆二色谱分析

为了阐明牛分枝杆菌侵入宿主细胞和在肺泡巨噬细胞长期存活的机理，本研究以牛分枝杆菌的DNA为模板，通过PCR的方法扩增克隆牛分枝杆菌哺乳动物细胞侵袭蛋白4E（Mammalian cell-entry protein 4E，mce4E）基因，将所扩增基因克隆于原核表达载体pET30a（＋）并进行测序，结果显示该基因与GenBank上所公布的牛分枝杆菌和人分枝杆菌mce4E基因同源性为100％。将重组表达载体转入宿主菌BL21进行诱导表达，表达蛋白经SDS-PAGE分析和Western-blotting免疫印迹鉴定，结果证明目的蛋白获得高效表达，表达量占菌体总量的53．3％，分子量约为45ku；利用Ni-NTA琼脂糖柱对表达蛋白进行纯化，纯化率大于95％；纯化的蛋白经过透析复性、圆二色谱（CD）测定，结果表明重组蛋白为典型的α螺旋型结构，经Jascow32软件分析计算，mce4E蛋白含有39．1％的α螺旋，60．9％的无规卷曲，无β-折叠和转角，为进一步开展牛分枝杆菌致病机理的研究和寻找新的药物作用靶位点奠定了基础。     

牛分枝杆菌特异性基因的PCR扩增及二联PCR反应的建立

为了研究牛结核病的PCR诊断方法,本研究以牛分枝杆茵(M.bovis)Vallee111株染色体DNA为模板,以RecA和Ppsl基因特异性引物进行PCR扩增,获得约860 bp和430 bp的DNA片段.将PCR纯化产物进行测序,通过BLAST序列分析,与GenBank中登录的M.bovis AF2122/97 RecA基因和Ppsl基因的核苷酸序列同源性均达到99%.在同一PCR反应中同时加入RecA和Ppsl基因特异性引物建立RecA-Pps1二联PCR反应.同时,RecA和Ppsl PCR扩增的敏感性分别达到585 fg和195 fg,特异性均达到100%,为进一步研究RecA和Ppsl基因以及其在牛结核病诊断中的应用奠定了基础.