基于响应面法优化莱氏绿僵菌SZCY200812的液相发酵条件

为提高莱氏绿僵菌菌株SZCY200812液相发酵时孢子萌发率和生物量,为固相发酵产孢提供高质发酵液,本研究采用单因素及Box-Behnken试验设计结合的方法对该菌液相发酵过程中培养液种类、装液量、pH、摇床转速及培养温度等条件进行优化,确定最佳的液相发酵培养条件。结果表明,通过单因素试验初步确定利用SDY培养液、装液量100/250 mL、pH 7、摇床转速180 r/min及温度25℃,第120 h每10 mL液态发酵生物产量为0.8433 g。通过响应面法建立了莱氏绿僵菌SZCY200812液体发酵培养菌丝生物量与自变量回归模型,根据模型所得结果得出装液量为100.82/250 mL,摇床转速178.85 r/min,温度24.80℃,pH 6.73条件下为理论最佳液态发酵培养条件。为便于生产,得出该菌株SZCY200812在SDY培养液中最佳的培养条件为：装液量101/250 mL、pH 6.7、摇床转速179 r/min以及温度25℃,第120 h每10 mL液相发酵生物产量达0.8637 g。综合以上结果,影响莱氏绿僵菌SZCY200812液相发酵的因素由强至弱依次为pH(...     

国内外杀虫绿僵菌制剂的登记现状与剂型技术进展

\t\t\t\t\t目的\t\t\t\t\t通过分析在逆境胁迫过程中绿僵菌菌株MAX-2的Hog1基因的转录表达,为揭示该菌株耐逆特性的分子机理提供理论依据。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t方法\t\t\t\t\t将具有不同耐逆能力的3个绿僵菌菌株MAX-2、BUM2495和BUM723的分生孢子分别用盐处理(0.4、0.8 mol/L NaCl)和紫外线照射(5、15 min),测定孢子萌发率,并提取RNA,通过半定量RT-PCR方法分析其Hog1基因的转录表达差异。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结果\t\t\t\t\t从盐和紫外线逆境条件下菌株的孢子萌发率可以看出：这3个菌株的耐逆性能为MAX-2>BUM2495>BUM723,菌株间的差异都达到了极显著水平(P<0.01)。盐处理和紫外线辐射都能诱导绿僵菌Hog1基因的表达上调,不同菌株表达差异较大,MAX-2表达水平最高,BUM723表达水平最低。在较低程度的胁迫条件下(0.4 mol/L NaCl和紫外线照射5 min),MAX-2 的表达水平略高于BUM2495,而在较高程度的胁迫条件下(0.8 mol/L NaCl和紫外线照射15 min) MAX-2 的表达水平明显高于BUM2495,表明Hog1基因在较高程度压力条件下的高效表达与MAX-2的耐逆能力密切相关。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结论\t\t\t\t\t绿僵菌菌株MAX-2较高的耐逆能力与其Hog1基因的高水平转录表达相关。\t\t\t\t\t\t\t\t\t     

光肩星天牛幼虫感染绿僵菌后血淋巴中游离氨基酸含量的变化

采用高效液相色谱法测定了感染绿僵菌Metarhizium anisopliae后光肩星天牛Anoplophora glabripennis幼虫血淋巴中游离氨基酸的含量。结果表明,光肩星天牛幼虫血淋巴中共检测出 17种游离氨基酸,感染绿僵菌后不同时段,游离氨基酸总量呈现先下降后上升的变化趋势。感染24 ~72 h时,幼虫血淋巴中游离氨基酸总量与对照组相比均呈小幅下降趋势,各时间点氨基酸总量互有高低,但相差不大;感染72 h后至120 h时,游离氨基酸总量明显下降,120 h时降到最低值1 042.33 mg/100 mL;之后急剧上升,144和168 h时分别为120 h时的1.44和1.51倍。赖氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、酪氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、组氨酸、亮氨酸、丙氨酸、甘氨酸、蛋氨酸含量的变化与游离氨基酸总量的变化趋势大体一致;而脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸的含量呈波动变化。     

紫外光的照射与绿缰菌对多菌灵敏感性变化的关系

为了探明紫外光的照射与绿僵菌对多菌灵的敏感性变化的关系,首先进行了绿僵菌对多菌灵的敏感性测定。结果表明,所有供试野生型菌株的MIC均小于5.0μg/mL,EC50为1.658￣1.853μg/mL。紫外光对绿僵菌分生孢子照射后的结果表明,各菌株均出现了抗性菌落,突变率为2×10-6￣7×10-5,且这些抗性突变体能在600μg/mL下缓慢生长,EC50在245.47￣302.00μg/mL,其抗性至少比野生型菌株(<5.0μg/mL)高120倍。抗性突变体经再次的紫外光照射后,均回复突变成野生型菌株的敏感状态,在多菌灵5.0g/mL的PPDA培养基中均不能生长。表明了由紫外光诱导的绿僵菌抗性突变体在有紫外光的环境中其抗性是不稳定的。     

绿僵菌对东亚飞蝗的室内致病力测定

在室内用喷雾法测定了6株绿僵菌对东亚飞蝗的致病力,结果表明,其致病力强弱与菌株种类和接种剂量有密切关系,菌株对东亚飞蝗的致病力由强到弱顺序为MA3>MA4>MB6>MA6>MA5>MA11。接种MA3菌株的孢子浓度在1.0×108个/mL情况下,对4龄蝗蝻的LD50为4.46d。用不同剂量的MA4菌株的孢子油悬浮剂涂抹法接种4龄蝗蝻,发现其LD50仅为15.39个/头。另外,观察发现,MA3菌株具有很强的2次侵染能力。     

六种化学杀菌剂对Ma83菌株孢子萌发的影响

以孢子的萌发率为指标,在涂有一层杀菌剂药膜的琼脂表面接种金龟子绿僵菌Metarhiziumanisopliae的Ma83菌株孢子悬浮液,研究6种常用化学杀菌剂使用后不同时间对绿僵菌Ma83萌发的影响。试验结果表明,除保护剂波尔多液外,其它几种杀菌剂对孢子均有较强的杀伤作用,其中瑞毒霉、百菌清和甲基托布津对孢子的杀伤率100%,24 h未见有孢子萌发。随着时间的延长,药剂对孢子萌发的抑制呈下降趋势,但下降速度缓慢。     

应用绿僵菌复合剂防治桉树白蚁的几个技术问题

应用绿僵菌复合剂处理桉树袋苗防治白蚁危害,施药方法以浸泡法为宜,药剂利用率为100%,喷淋法所吸收的药剂只占用药量的59.89%。药剂稀释500倍以上对苗木都是安全的,浓度超过250倍时,对组培苗产生一定的药害,100倍对苗木产生较大的药害。林间应用实践表明应用绿僵菌复合剂防治桉树白蚁效果显著。     

金龟子绿僵菌对苜蓿生长的影响及对苜蓿抗蚜性的诱导作用

为明确金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae在促进植物生长和提高植物抗性方面的作用,以金龟子绿僵菌拌土种植紫花苜蓿Medicago sativa,于室内测定植株的生长参数、苜蓿斑蚜Therioaphis trifolii的取食选择性及其发育历期和繁殖力。结果表明,金龟子绿僵菌处理后7 d,植株株高比对照显著增加了0.87 cm;处理后14 d,植株分枝数为3.88个,根长为54.67 mm,均显著高于对照。株龄14 d的植株接入苜蓿斑蚜,至株龄28 d时,金龟子绿僵菌处理的植株株高、分枝数和根长均较对照显著增加;同时生物量、叶绿素含量和类胡萝卜素含量也有不同程度的升高。选择性试验结果显示,24 h内选择并驻留在金龟子绿僵菌处理植株叶片上的苜蓿斑蚜数量较对照显著减少28.57%。以金龟子绿僵菌处理的植株叶片饲喂苜蓿斑蚜,1～4龄若虫的发育均有所减缓,各龄若虫的发育历期均较对照叶片饲喂的各龄若虫有所延长,而成虫寿命较以对照叶片饲喂时显著缩短了30.09%,总生命历期显著缩短了18.83%。表明金龟子绿僵菌促进了紫花苜蓿植株的生长,同时增强了植株对苜蓿斑蚜的耐害性、排趋性与...     

深圳高尔夫球场草坪蛴螬发生及其生物防治效果研究

调查了深圳2个高尔夫球场春季草坪蛴螬发生情况,研究了昆虫病原真菌绿僵茵对球场不同龄期蛴螬的致病性。调查发现,不同草坪样地的虫口密度为0-16只／m^2,对草坪危害不严重,草坪质量为中等偏上;虫口密度与土壤含水量呈显著负相关,虫口密度与土壤温度显著正相关,草坪色泽、根系完整性都与虫口密度呈显著负相关;草坪密度随虫口密度的增加而减小,但二者间的相关性未达到显著水平。从球场采集到主要为害虫为红脚绿丽金龟成虫,经产卵和孵化饲养获得幼虫用于致病性试验,结果表明绿僵菌对各龄期幼虫均有较强致病力,其中对1龄幼虫作用最强。在土壤舍菌量66．7×10^8孢子／kg和33．3×10^8孢子条件下,1龄幼虫分别在6和9d内死亡率达到90％;在土壤含菌量16．7×10^8孢子／kg时,对1、2、3龄幼虫致死中时LT5。分别为7．3,14．3扣18．0d。增效剂能加速绿僵菌对蛴螬的作用。