仔猪胰腺细胞体外培养体系的建立

为了研究体外培养仔猪胰腺细胞的适宜条件,试验选取1日龄的仔猪胰腺组织置于冰上清洗、修剪,对消化酶、离心方式、培养皿铺被方式、培养液及添加不同促生长因子等多种因素进行筛选和优化。结果表明:0.25%胰酶消化所获得的细胞强于0.1%胶原酶消化获得的细胞,细胞清亮,易于生长;采用500 r/min离心5 min、多次离心所获得的细胞较Percoll不连续密度梯度离心和5%BSA等密度梯度离心所获得的细胞贴壁率高,生长能力强,易于培养传代;采用0.1%明胶或20μg/mL的层黏连蛋白铺被培养皿均比无铺被的培养皿获得更多的贴壁细胞;以RPMI 1640、M199、F12、L-DMEM多种培养液培养仔猪胰腺细胞,表现出多种细胞形态和生长趋势;在基础培养液中添加上皮生长因子、角质化生长因子、β-巯基乙醇和白血病细胞抑制因子、转铁蛋白与亚硒酸盐混合试剂等促干细胞增殖因子可促进不同形态细胞的增殖。说明按此方式培养可获得大量、多种细胞形态的仔猪胰腺祖/干细胞。     

PRRSV GP5蛋白在杆状病毒表达系统中的表达

参照包含猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV) VR2332株完整ORF5基因的载体pMD18T-ORF5的核酸序列设计引物,扩增全长的PRRSV ORF5基因片段,同时以SOE-PCR技术扩增缺失信号肽和跨膜区的ORF5核酸片段ORF5NC,分别克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBac-HTA,获得重组转移载体pFastBacHTA-ORF5及截短表达的重组转移载体pFastBacHTA-ORF5NC。将供体质粒分别转化DH10Bac细胞,获得重组穿梭质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,在Sf9细胞中分别成功表达了全长的GP5重组蛋白和缺失信号肽、跨膜区的截短GP5重组蛋白。2种重组蛋白经纯化后,免疫小鼠制备抗血清,ELISA方法检测免疫GP5全长和截短重组蛋白的小鼠血清中抗体滴度分别为1∶800和1∶1 600,表明重组蛋白具有良好的免疫原性。本试验为进一步分析重组蛋白诱导中和抗体产生的能力以及为PRRSV基因工程亚单位疫苗的研究奠定基础。     

大米提取复合糖对断奶仔猪生长性能、肠道形态与功能的影响

本试验旨在研究大米提取复合糖在无诱食剂条件下对断奶仔猪生长性能、肠道形态与功能的影响。试验选取(26±2)日龄健康、体重相近的三元杂断奶仔猪160头,随机分为5个组,每组4个重复,每个重复8头猪,A组饲喂标准饲粮,B组饲喂基础饲粮(标准饲粮中去除甜味剂、香味剂、葡萄糖、蔗糖),C组饲喂标准饲粮+3%大米提取复合糖,D组饲喂基础饲粮+3%大米提取复合糖,E组饲喂基础饲粮+5%大米提取复合糖。结果表明:1)与A组相比,B组的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)差异不显著(P>0.05),C组的ADG、ADFI显著提高(P<0.05);与B组相比,D组的ADG、ADFI和料重比(F/G)差异不显著(P>0.05),E组的ADG、ADFI显著提高(P<0.05),F/G显著降低(P<0.05)。2)与A组相比,B组的粗蛋白质(CP)表观消化率显著降低(P<0.05),C组的CP表观消化率有提高的趋势(P=0.069);与B组相比,D组的养分表观消化率无显著差异(P>0.05),E组干物质(DM)、CP和粗脂肪(EE)表观消化率均显著提高(P<0.05)。3)与A组相比,B组的隐窝深度(CD)显著提高(P<0.05),绒毛高度/隐窝深度(V/C)有降低的趋势(P=0.073),C组的绒毛高度(VH)和V/C显著提高(P<0.05);与B组相比,D组的VH和CD均无显著差异(P>0.05),V/C有提高的趋势(P=0.053),E组的V/C显著提高(P<0.05)。4)与A组相比,B组闭合蛋白(occludin)的mRNA表达量显著提高(P<0.05),C组闭合小环蛋白-1(ZO 1)的mRNA表达量显著下降(P<0.05),occludin的mRNA表达量显著提高(P<0.05);与B组相比,D组ZO 1和occludin的mRNA表达量显著提高(P<0.05),E组ZO 1的mRNA表达量有提高的趋势(P=0.075),occludin的mRNA表达量显著下降(P<0.05)。5)与A组相比,B组的血清总抗氧化能力(T AOC)显著降低(P<0.05),C组的血清T AOC无显著差异(P>0.05);与B组相比,D组和E组的血清T AOC显著提高(P<0.05)。6)5个组之间的回肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和血清免疫球蛋白G(IgG)含量无显著差异(P>0.05)。综上所述,在无诱食剂条件下,断奶仔猪饲粮中添加大米提取复合糖可以通过提高养分消化吸收、抗氧化能力和肠道屏障等途径实现对仔猪生长性能的改善。     

陇西南塬区农业生产系统结构与效益研究

本研究通过对陇西南塬区农业生产系统的结构分析，确认该系统的特征为产业结构不合理（以种植业为主），种植业以粮食生产为主，复种指数低（１１１％）；养殖业中草食家畜比例低，饲养技术落后，良种率低；林果业效益低下；人口密度高，劳动力过剩，生产能源短缺等。通过系统分析提出了调控方针，该系统整体效益提高的关键是发展以草食家畜为核心的养殖业，种植业应及时调整结构，提高经济作物和饲料作物的比例，提高复种指数，林果     

网络版《中国草业开发与生态建设》数据库的更新

针对网络版《中国草业开发与生态建设》专家系统知识库、模型库和空间库的特点,提出以下更新方案:知识库和模型库的更新采用2个途径进行,即数据库管理员直接在服务器端进行更新和普通用户在远程客户端以提交数据的形式进行更新。由于空间数据库处理的复杂性和传输量大的特点,空间数据库的更新主要还是由数据库管理员在服务器端进行。本研究虽在一定程度上全面详细地阐述了数据库的更新过程,具有一定的可行性,但仍有许多需改进的地方,如普通用户提交的数据在传往服务器端前的验证标准的制定、空间数据更新技术的改进等。     

Evaluation the Clinitek status automated dipstick analysis device for semiquantitative testing of canine urine

The aim of this prospective study was to evaluate the Clinitek status™ analyser using Multistix10SG™/Microalbustix™ dipsticks (all: Siemens Dx) for canine urine (n = 101) compared to reference methods: visual reading (Combur9 dipstick, Roche), refractometry, microscopy, and quantitative protein/creatinine analysis (Pentra400, AxonLab). The automated analyses were done twice and visual tests were performed by two examiners.An excellent to good concordance was demonstrated between the first/second analysis with the Multistix10SG and the Combur9 dipstick, respectively with Cohen’s κ-values ranging from 0.776 to 1.000. Agreement between both dipsticks was good for glucose (κ = 0.753), blood (κ = 0.793), protein (κ = 0.788), and moderate for bilirubin (κ = 0.431) and ketones (κ = 0.540). In 6/101 specimens, false positive ketone reactions were obtained with the Multistix10SG™. Multistix10SG™ could not be used for determination of pyuria or specific gravity. Semiquantitative/quantitative protein results correlated well (ρ = 0.90) and creatinine measurements moderately (ρ = 0.76). Due to automated data transmission to the laboratory information system, the Clinitek status™ is of advantage in veterinary laboratories/clinics.     

Effects of dobutamine on cardiovascular function and oxygen delivery in standing horses

Dobutamine is routinely used to improve cardiovascular function in anaesthetized horses. However, dobutamine in conscious horses is insufficiently investigated. Ten research horses that were already instrumented for a preceding trial were included into the study. Cardiovascular variables were recorded and blood samples taken after instrumentation (Baseline), before starting dobutamine and after 10 min of dobutamine infusion (2 µg kg⁻¹ min⁻¹). A significant increase in systemic blood pressure, mean pulmonary artery pressure and right atrial pressure, and a decrease in heart rate were observed with dobutamine compared with baseline measurements. Arterial and mixed venous haemoglobin and oxygen content, as well as mixed venous partial pressure of oxygen increased. No significant changes in cardiac output, stroke volume, systemic vascular resistance, arterial partial pressure of oxygen, or oxygen consumption, delivery and extraction ratio were detected. Concluding, dobutamine increased systemic blood pressure without detectable changes in stroke volume, cardiac output or systemic vascular resistance in conscious horses.     

PA-X基因的长度变化对H3N2犬流感病毒复制能力和致病性的影响

H3N2犬流感病毒(canine influenza virus, CIV)已在中国多地的犬群中流行,是禽流感跨宿主感染并形成新分支的近期案例。研究表明,PA-X基因与甲型流感病毒适应新宿主的能力相关,且其长度能够影响甲型流感病毒的复制及致病能力。为了解PA-X基因的长度变化对H3N2 CIV复制能力及致病力的影响,本研究利用H3N2 CIV的8质粒操作系统,拯救了三株重组H3N2 CIV毒株：PA-X基因表达大小为232个氨基酸多肽的亲本病毒CIV＿PA-X＿232;对PA编码区第191、192位氨基酸的密码子进行改造,PA-X基因不表达蛋白的重组病毒CIV＿PA-X＿Knock;对PA+1编码区第232位氨基酸进行突变,PA-X基因表达大小为252个氨基酸多肽的重组病毒CIV＿PA-X＿252。通过比较3株重组病毒的聚合酶活性,在MDCK细胞中的复制效率及对小鼠致病性的差异,来评价表达不同长度的PA-X基因对H3N2 CIV的影响。结果显示,CIV＿PA-X＿252和CIV＿PA-X＿Knock的聚合酶活性显著(P<0.05)高于CIV＿PA-X＿232,且CIV＿PA-X＿...     

深化草业经济体制改革实行草原有偿承包制度

实行草原有偿承包制度,是草业经济体制改革的重要突破。本文在总结草原有偿承包制度产生与发展过程的基础上,阐明草原有偿承包制度的基本内容,阐述了建立草原有偿承包制度之理论、法律、现实和实践根据及其在草地畜牧业经济建设中的重大意义。