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41.
42.
参考 Genbank收录的 TGEV- Miller株的基因序列 ,自行设计合成 1对引物 (TGEVP5 /P6 ) ,对不同代次的 TGEV疫苗弱毒 STC3及种毒 、种毒 进行了 RT- PCR扩增 ,产物经琼脂糖凝胶电泳分析 ,均出现 1条大约 12 6 2 bp的目的条带 ,经 Eco R 酶切 ,都产生了 871bp和391bp左右的两个片段 ,与预期大小相符。将种毒 RT- PCR扩增目的条带回收纯化后克隆入PMD18- T载体中 ,转化宿主菌 DH5 α,挑选阳性克隆 (命名为 PTs) ,提取重组质粒 ,用 Hpa 、Eco R 对重组质粒进行酶切鉴定以及 PCR扩增 ,然后进行序列测定 ,并进行了序列分析 ,证实与国外标准毒株 Miller、Fs772 / 70、Purdue、TO14等有较高的同源性 相似文献
43.
JEV、PPV、PRRSV、PRV多联PCR的应用研究 总被引:3,自引:0,他引:3
用 JEV、PRRSV二联 PCR,PPV、PRV二联 PCR以及这 4种病毒 4联 PCR对来自内蒙、广州、广西、天津、北京、吉林病料进行检测 ,共检了 1 4 6份病料。其中 PRRSV阳性 7份 ,PPV阳性 1 2份 ,PRV阳性 2 1份 ,PRV和 PPV混合感染 4份。并对 5份人工接种 JEV小鼠病料检测 ,其中 4份为阳性。随后对部分阳性 PCR扩增产物进行点杂交和核苷酸测序鉴定 ,证实了 PCR扩增准确性。对内蒙 PRRSV阳性扩增带测序结果显示 ,我国流行 PRRSV为美洲型 ,在扩增片段的核苷酸序列上有 3个碱基差异 相似文献
44.
浙江淳安新安江开发公司封山育林效益研究 总被引:2,自引:0,他引:2
浙江省淳安县新安江开发公司所属16个国营林场22475.53hm~3荒山迹地,封山育林30年,现有天然次生林总蓄积量135万m~3,年总生长率8.07%,活立木直接经济价值2.25亿元。到1987年止公司已获中间利用净收入2135万元。近20年累计天然次生林比无林地多涵蓄水10亿m~3,每年进入水库的泥沙量减少80%,对调节水库水源、延长发电年限、纯洁水质都起到良好作用。公司长期实施的5项管护技术,把封山育林提高到科学经营水平,在千岛湖区成功地建立了森林生态屏障。 相似文献
45.
哺乳动物体细胞克隆研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
哺乳动物体细胞克隆技术是近年来才发展起来的技术,但体细胞克隆绵羊-多利的诞生却引起了世界轰动,充分显示了其重在的科学研究价值和潜在的应用价值。本文对哺乳动物体细胞克隆技术研究现状,理论基础研究,应用等方面作一综述。 相似文献
46.
本文应用聚合酶链反应(PCR)技术从构建的新城疫病毒(NDV)cDNA文库中扩增含编码F糖蛋白前体──Fo酶切位点序列的359bp的F蛋白基因cDNA片段。将此359bpcDNA片段经光敏生物素标记后,即成NDV-cDNA探针。该探针能特异性地从感染的尿囊液中检测出NDV强毒株和疫苗毒株的基因组RNA,而不与IBDv-dsRNA、AIBv-ssRNA、EDS76-dsDNA、MDV-dsDNA,FPV-dsRNA及AILV-dsDNA发生交叉杂交反应。试验结果表明:尽管该探钎含有编码Fo蛋白酶切位点序列的碱基顺序,但它还是不能把NDV的强、弱毒株区分开。这说明NDV强、弱毒株比区域内的碱基存在着相当大的同源性。不过,此探针对NDV来说具有特异性,这就为NDV的诊断技术开创了基因水平检测的新途径。 相似文献
47.
简怀玉 《湖南农业大学学报(自然科学版)》1990,17(3)
本文研究一类2k阶非线性偏微分方程组之解的正则性,没有假定通常的椭圆性条件而只假定所谓"无穷远处"的椭圆性条件,证明了解的k-1阶导数为李普希兹连续的. 相似文献
48.
49.
安徽省鸡免疫抑制性疾病的流行病学调查 总被引:8,自引:0,他引:8
采集了安徽省6个主要养鸡地区65群鸡的185只病鸡共986份组织样品,对可引起免疫抑制性疾病的5种最常见病毒进行了PCR检测。结果,传染性腔上囊病病毒(IBDV)、鸡传染性贫血病毒(CIAV)、马立克氏病病毒(MDV)、禽白血病病毒(ALV)和网状内皮增生症病毒(REV)的群阳性率和个体阳性率分别为73.08%和40.91%、46.15%和25.95%、41.54%和17.84%、18.46%和7.57%、13.85%和4.86%,其中被检鸡之二重或多重混合感染的总阳性率为24.33%。调查结果证实,免疫抑制性疾病在安徽省的商业鸡群中普遍存在,并与鸡群疾病多而复杂、损失大相关。 相似文献
50.
Detection of Colletotrichum coccodes from soil and potato tubers by conventional and quantitative real-time PCR 总被引:4,自引:1,他引:4
Colletotrichum coccodes is the causal agent of the potato blemish disease black dot. Two PCR primer sets were designed to sequences of the ribosomal internal transcribed spacer (ITS1 and ITS2) regions for use in a nested PCR. The genus-specific outer primers (Cc1F1/Cc2R1) were designed to regions common to Colletotrichum spp., and the species-specific nested primers (Cc1NF1/Cc2NR1) were designed to sequences unique to C . coccodes . The primer sets amplified single products of 447 bp (Cc1F1/Cc2R1) and 349 bp (Cc1NF1/Cc2NR1) with DNA extracted from 33 European and North American isolates of C. coccodes. The specificity of primers Cc1NF1/Cc2NR1 was confirmed by the absence of amplified product with DNA of other species representing the six phylogenetic groups of the genus Colletotrichum and 46 other eukaryotic and prokaryotic plant pathogenic species. A rapid procedure for the direct extraction of DNA from soil and potato tubers was used to verify the PCR assay for detecting C. coccodes in environmental samples. The limit of sensitivity of PCR for the specific detection of C. coccodes when inoculum was added to soils was 3·0 spores per g, or the equivalent of 0·06 microsclerotia per g soil, the lowest level of inoculum tested. Colletotrichum coccodes was also detected by PCR in naturally infested soil and from both potato peel and peel extract from infected and apparently healthy tubers. Specific primers and a TaqMan fluorogenic probe were designed to perform quantitative real-time (TaqMan) PCR to obtain the same levels of sensitivity for detection of C. coccodes in soil and tubers during a first-round PCR as with conventional nested PCR and gel electrophoresis. This rapid and quantitative PCR diagnostic assay allows an accurate estimation of tuber and soil contamination by C. coccodes . 相似文献