葛根素缓解镉对大鼠股骨胫骨中成骨细胞分化的抑制作用

旨在探究葛根素对镉(cadmium,Cd)抑制大鼠股骨胫骨中成骨细胞(osteoblast,OB)分化的缓解效应.选取40只3周龄SD雄性大鼠,随机分为4组,分别为对照组(CON)、镉组(Cd)、葛根素组(Pur)和镉+葛根素组(Cd+ Pur),每组10只.其中,对照组和镉组大鼠灌服超纯水,连续5周;含葛根素组(葛根...     

β-1,3-1,4葡聚糖酶基因双拷贝工程菌株的构建与发酵研究

本试验旨在研究β-1,3-1,4葡聚糖酶双拷贝基因毕赤酵母工程菌株的构建及发酵。首先,通过对质粒pGAP-glu-opt进行PCR扩增获得密码子优化的β-1,3-1,4葡聚糖酶基因glu-opt,用EcoR I和Not I双酶切后与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,获得重组质粒p9K-glu-opt。该重组质粒经Sac I线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,利用不含组氨酸的MDS平板和摇瓶培养,筛选重组菌株,命名为GS115/9K-glu-opt。制备GS115/9K-glu-opt感受态细胞,再用线性化的重组质粒pPIC-glu-opt二次转化,在含有抗生素Zeocin的YPDS平板上筛选glu-opt基因双拷贝重组菌株GS115/2xglu-opt。双拷贝重组菌在10 L发酵罐中进行高密度发酵培养及甲醇诱导表达,β-1,3-1,4葡聚糖酶最高酶活达到21 600 U/mL,约为单拷贝工程菌株X33/pPIC-glu-opt发酵活力的1.44倍;蛋白表达量达8.4 g/L,约为X33/pPIC-glu-opt的1.68倍。     

饲用β-甘露聚糖酶的研究及应用

β-甘露聚糖酶是最重要的饲用酶制剂之一,是一种新型饲料添加剂。添加β-甘露聚糖酶主要有促进动物生长,预防动物疾病;提高动物的饲料转化效率;减少粪便排泄,减轻环境污染等作用。作者从β-甘露聚糖酶的来源、理化性质、作用机理及其在动物生产中的应用4个方面阐述了饲用β-甘露聚糖酶的研究及应用。     

A new thiazinedione from Xanthium strumarium

A new thiazinedione was isolated from the fruit of Xanthium strumarium. Its structure was elucidated by a combination of spectral methods.     

牛β-酪蛋白多克隆抗体的制备及鉴定

以牛β-酪蛋白标准品为免疫原,免疫健康的新西兰大白兔,制备了兔抗牛β-酪蛋白的多克隆抗体。经亲和层析纯化后,用SDS-PAGE电泳及考马斯亮蓝染色检测抗体的纯度,经ELISA法测定β-酪蛋白抗体的效价为1∶1600。Western-blot分析发现,制备的抗体与β-酪蛋白可以发生特异性结合,表明成功制备了纯度较高和特异性较好的牛β-酪蛋白多克隆抗体,为乳腺生物反应器的研究提供了有效的工具。     

红色和橙黄色果肉西瓜番茄红素和β–胡萝卜素代谢基因的表达分析

以橙黄色果肉西瓜‘WM-Clr-2’及红色果肉西瓜‘PI 179881’为试材,采用HPLC法分析其番茄红素及β–胡萝卜素在7个发育时期的积累情况,同时采用q RT-PCR技术分析番茄红素和β–胡萝卜素代谢途径中8个关键酶基因(PSY1、PSY2、PDS、ZDS、CRTISO、LCYB、NCED1和NCED7)的表达量。结果显示,随着果实的发育,番茄红素和β–胡萝卜素含量均不断增加,且在同一时期,红色果肉‘PI 179881’中的含量始终大于‘WM-Clr-2’。q RT-PCR结果显示PSY1在‘PI 179881’中的表达量高于‘WM-Clr-2’,LCYB和NCED1在‘WM-Clr-2’中的表达量高于红色果肉‘PI 179881’。分析番茄红素及β–胡萝卜素的积累规律与相关基因表达规律说明PSY1的大幅上调表达,LCYB的下调表达及NCED1的低表达可能是红色果肉‘PI 179881’中番茄红素和β–胡萝卜素大量积累的主要原因。PSY1的低表达水平,LCYB和NCED1的高表达水平可能是橙黄色果肉‘WM-Clr-2’中番茄红素及β–胡萝卜素积累量少的主要原因。     

抑制素被动免疫对黄体中期山羊生殖激素分泌的影响

为了探讨抑制素在山羊生殖激素分泌调节中的作用 ,本试验用抗抑制素血清对黄体中期雌山羊进行了被动免疫试验。将酪 30 -抑制素 α(1,30 ) NH2 与兔血清白蛋白螯合 ,用去势雄山羊制备抗抑制素血清 (INH- AS) ,最终滴度为 1∶96 0 0 0。对照血清来自牛血清白蛋白免疫的去势雄山羊。 12只黄体期日本 SHIBA山羊 ,肌注 PGF2α(2 mg/只 )进行同期发情处理 ,处理后 3～ 5 d母羊出现发情。在发情后 10 d(发情当天为 0 d) ,将母羊分为 2组 ,每组 6只。试验组颈静脉注射 INH- AS(2 0 m L /只 ) ,并在注射前 (0 h)和注射后 6、12、2 4、4 8、72、96、12 0 h采取外周血样 (肝素抗凝 ) ;对照组注射对照血清 (2 0 m L/只 )。抗凝血样离心 (4℃、170× g、15 min)分离血清 ,- 2 0℃保存待测。血清 FSH和 L H含量用NIDDK放免试剂盒测定 ,其中 FSH标记纯品为 NIDDK- o FSH- I- 1,标准品为 NIDDK- o FSH- RO- 1,一抗为 NIDDK-抗- o FSH- 1;L H标记纯品为 NIDDK- o L H- I- 3,标准品为 NIDDK- o L H- RP- 2 4 ,一抗为抗 - o L H- YM。二抗为山羊抗家兔Ig G。血清 E2 和 P含量用1 2 5I放免盒测定。测 E2 时 ,为除去游离脂肪 ,样品用 0 .5 m L乙腈 +2 m L乙烷处理。试验结果表明 ,注射 INH- AS后 12 h,血清 FSH含量显著提高     

β-葡聚糖对肉仔鸡生长性能、免疫功能和肠道微环境的影响

本试验旨在研究饲粮中添加β-葡聚糖对肉仔鸡生长性能、免疫功能和肠道微环境的影响。选取1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡672只,随机分为4个组,每组14个重复,每个重复12只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮上添加100、150和200 g/tβ-葡聚糖的试验饲粮。试验期为42 d。结果表明:1)150 g/t剂量组1~21日龄肉仔鸡体增重显著高于对照组(P0.05)。2)150 g/t剂量组肉仔鸡血清免疫球蛋白含量高于对照组(P0.05)。3)21日龄时,150 g/t剂量组肉仔鸡盲肠内乳酸菌数量显著高于对照组(P0.05),空肠和回肠内沙门氏菌数量显著低于对照组(P0.05);42日龄时,150和200 g/t剂量组肉仔鸡盲肠内沙门氏菌数量显著低于对照组和100 g/t剂量组(P0.05)。4)饲粮添加β-葡聚糖对42日龄肉仔鸡空肠绒毛高度与隐窝深度比值影响显著(P0.05)。由此可见,饲粮中添加适量的β-葡聚糖可提高肉仔鸡出栏重,改善肉仔鸡生长性能,增加盲肠内乳酸菌数量,减少空肠、回肠和盲肠内沙门氏菌数量。     

多种动物血清中生物活性LH/CG的放射受体测定法(RRA)

利用绵羊卵巢黄体细胞膜作为 LH / CG受体来源 ,以放射性12 5 I- h CG作为示踪标记配体 ,以高纯度的h CG为标准品建立标准曲线 ,建立了一种有效的 LH- RRA测定方法。它能够直接检测多种动物血清中与受体结合的具有生物活性的 LH的动态变化。该法测定程序简单 ,在 2 h内完成并获得可重复性结果。测定方法的灵敏度为 0 .3ng/管 ,批内和批间误差分别为 ( 3.4 1± 3.14 ) %和 ( 8.70± 7.93) %。动物 (牛、兔、猪 )垂体液中 LH含量反应曲线和 h CG标准曲线平行良好。牛、羊、猪、兔、鼠和仓鼠血清中 LH的剂量反应曲线和h CG标准曲线的平行性表明 ,该 LH- RRA可以用来检测不同动物血清中的具有生物活性的 LH变化。回收试验表明 ,在该测定方法中加入 3、10、30 ng h CG时的回收率分别为 ( 10 0 .59± 5.55) %、( 99.55± 9.86 ) %、( 10 4 .2 8± 7.4 5) %,说明测定结果的正确性。该 LH - RRA的测定结果反映了动物正常的生理状态。本试验垂体中有活性的 LH水平远远高于外周循环中的水平 ,雌、雄动物循环血液中的 LH含量不一致。     

电刺激疑核对TNBS诱导的IBD大鼠TGF－β表达的影响

为探讨疑核对炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）相关细胞因子TGF-β的调控作用以及在IBD的发生发展过程中发挥的作用,以三硝基苯磺酸（TNBS）诱导IBD大鼠动物模型通过Real-Time PCR和ELISA方法,利用疑核定位技术,检测急性电刺激疑核前后,细胞因子TGF-β在TNBS诱导的IBD大鼠结肠、胸腺、脾脏、外周血淋巴细胞中mRNA水平的变化和血清中蛋白浓度的变化。结果表明,急性电刺激IBD大鼠疑核后TGF-βmRNA表达水平在结肠、脾脏和外周血淋巴细胞中均显著高于对照组和假刺激组;而在胸腺中TGF-βmRNA表达降低。急性电刺激IBD大鼠疑核后血清中TGF一8蛋白浓度显著高于对照组和假刺激组。由此认为,疑核可能通过对IBD相关细胞因子TGF一8的调控,介导IBD的发生、发展过程,从而对IBD的发生、发展发挥调节作用。