Effects of Nrf2 overexpression on proliferation,activation and collagen type I synthesis in cultured hepatic stellate cells stimulated by ethanol

AIM：To investigate the effects of nuclear factor E2-related factor 2 (Nrf2) overexpression on the proliferation, cell cycle distribution, collagen type I (Col I) synthesis and alpha-smooth muscle actin (α-SMA) expression in cultured hepatic stellate cell line HSC-T6 stimulated by ethanol. METHODS：Cultured HSC-T6 cells were transfected with pEGFP-Nrf2 or pEGFP-N1 (empty vector) plasmid by liposome transient transfection. The cells were divided into control group, ethanol group, ethanol+pEGFP-Nrf2 group and ethanol+pEGFP-N1 group. The mRNA expression of Nrf2, α-SMA and Col I was determined by RT-PCR, and their protein expression was detected by Western blotting. Cell proliferation was assessed by MTT assay, and cell cycle was detected by flow cytometry. RESULTS：The pEGFP-Nrf2 plasmid was successfully transfected into HSC-T6 cells, and the mRNA and protein expression of Nrf2 was higher than other three groups 48 h after transfection (P<0.05). Compared with control group, the cell proliferation and the mRNA and protein expression of α-SMA and Col I in ethanol group and ethanol+pEGFP-N1 group were significantly increased (P<0.05), and the numbers of HSC-T6 cells were decreased in G1 phase and increased in S phase (P<0.05), without significant differences between the two groups (P>0.05). Meanwhile, the cells in ethanol+pEGFP-Nrf2 group showed significantly decreased proliferation level, down-regulated mRNA and protein expression of α-SMA and Col I, higher numbers in G1 phase and lower numbers in S phase compared with ethanol group and ethanol+pEGFP-N1 group (P<0.05). CONCLUSION：Nrf2 overexpression could significantly down-regulate the expression of α-SMA and Col I and cause G1/S phase arrest in HSC-T6 cells cultured with ethanol, thus inhibiting the proliferation and activation of the cells.     

西藏降水化学分析

1987-1988年及1997-2000年间,在西藏拉萨、定日、当雄、安多采集降雨样品及部分大气浮尘样品,分析测定了pH、电导率、CO2分压、总悬浮颗粒含量及10多种离子浓度。共测量了300场次降雨的pH值、电导率和其中60场次降雨的化学成分含量。结果显示：青藏高原降雨常呈弱碱性,1987-1988年间加权平均pH值为8．36,1997-1999年间为7．5。造成高原降雨呈弱碱性的主要原因是来自地面富含钙的粉尘。西藏是世界上空气污染最轻的地方,但是从20世纪80-90年代的降雨中,NO3^-与SO4^2-含量增加,pH值降低,表明保护这片脆弱环境的紧迫性。     

西藏自治区首次发现螟黄赤眼蜂

为发掘西藏地区本土的赤眼蜂资源,本研究利用灭活米蛾卵卡在西藏林芝嘎玛地区的梨园采集到一个赤眼蜂种群。采用ITS2序列比对鉴定所采集的赤眼蜂种类,并测定该蜂的生物学指标。结果表明：西藏林芝嘎玛地区所诱集的赤眼蜂鉴定为螟黄赤眼蜂Trichogramma chilonis Ishii,羽化率为80%,雌性比为57.14%,耐饥饿时间为1.08 d,后足径节长度为157.6μm。本研究将为发掘西藏地区赤眼蜂资源提供参考,并为利用赤眼蜂在西藏自治区开展生物防治实践奠定基础。     

深绿木霉蛋白质TraT2A诱导兰州百合抗灰霉病的作用

采用生长速率法和活体试验法分别测定了深绿木霉Trichoderma atroviride蛋白质Tra T2A对兰州百合灰霉菌的抑制作用和诱导抗病效果及持效期。结果表明TraT2A高浓度(5×液)具有较高的抑制作用,抑制率为47.44%,低浓度(100×液)具有较高的诱导抗病作用,其诱导效果可达55.89%;TraT2A 100×液处理兰州百合植株3 d后挑战接种灰霉菌,分别于0、1、3和5 d对兰州百合叶片中的PAL、PPO、POD和SOD酶活性及丙二醛、叶绿素含量变化进行了测定。发现TraT2A诱导处理后可提高百合叶片中与抗病性相关的防御酶PAL、PPO、POD、SOD活性和叶绿素含量,降低丙二醛的含量;在接种后1、3和5 d时,4种酶活性和叶绿素含量显著高于对照,丙二醛含量则低于对照,4种酶活性在第5 d时均达到最大值,PAL、PPO、POD和SOD分别是对照的1.47、2.28、1.36和1.49倍;在接种后1、3和5 d时,叶绿素含量分别比对照高10.13、12.05和6.05 mg/g;丙二醛含量仅为对照的0.68、0.40和0.51倍;TraT2A防治百合灰霉病的持效期为7 d,高于阿泰灵和速克灵的持效期。     

缬沙坦联用吲达帕胺缓释片对2型糖尿病伴高血压左心室肥厚及舒张功能的影响

目的观察缬沙坦联用吲达帕胺缓释片对2型糖尿病伴高血压左心室肥厚及舒张功能的影响。方法2型糖尿病伴高血压左心室肥厚及舒张功能不全患者120例,随机分为对照组和观察组,每组各60例。对照组服用缬沙坦80mg,每日1次;观察组服用缬沙坦80mg及吲达帕胺缓释片1.5mg,每日1次。所有病例观察20周,主要观察药物降压疗效、对左心室肥厚及左心室舒张功能的影响。结果缬沙坦和吲达帕胺缓释片联用比单用缬沙坦的降压效果更好。疗程结束后,观察组的舒张末期室间隔厚度及舒张末期左心室后壁厚度的改善程度明显优于对照组(P<0.01)。结论缬沙坦与吲达帕胺缓释片联用能有效的降低2型糖尿病伴高血压左心室肥厚及舒张功能不全患者的血压、逆转左心室肥厚及改善左心室的舒张功能。     

禽致病性大肠杆菌Hcp2b对雏鸡气管黏膜细胞因子-细胞因子受体相互作用通路的影响

T6SS(type Ⅵ secretion system)是革兰阴性菌中常见的一种分泌系统,其效应蛋白Hcp2b作用机制迄今仍未明晰.本研究以禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)Hcp2b蛋白为研究主体,旨在探究Hcp2b蛋白在APEC感染鸡气管黏膜过程中发挥...     

中国沙棘子叶叶肉细胞电流全细胞记录的研究

实验得出适合膜片钳实验的耐盐木本植物中国沙棘子叶原生质体的游离条件,即取当天脱壳的子叶,放入渗透浓度为0.88 mol/L,pH为5.8,酶液的组分为10 g/LCellulase R-10、0.5 g/LPectolyase Y-23、1.5 g/LMacrozymeR-10、1 g/L Hemicellulase、1 g/L BSA、1 g/L PVP-40、2 mmol/L CaCl2、10 mmol/L Mes和5 mmol/L Vc的溶液中,在26℃、黑暗条件下,静置4 h。并且利用Multiclamp 700B放大器和Clampex 9.2软件,记录到了该原生质体质膜全细胞内向K 通道电流(-459.137 pA及-290.527 pA)和非选择性阳离子通道的外向电流(8.036 pA)。这为沙棘属木本植物细胞的电生理特性及其耐盐性机制关系的研究奠定基础。     

用ELISA方法进行猪圆环病毒病血清学调查

本研究用猪2型圆环病毒ORF2基因的表达产物包被酶标板，建立ELISA诊断方法，用此方法对临床1257份送检血清进行了检测，其总阳性率为57．28%(720／1257)，仔猪阳性率为30．83％(119／386)，肥猪阳性率为64．93％(137／211)，母猪阳性率为71．50％(419／586)，公猪阳性率为70．27％(52／74)。这一结果表明猪圆环病毒在我国流行较普遍，且抗体阳性率随猪体年龄的增长而升高。     

我国猪群中TTV的鉴定及其分子流行病学分析

为了确定Torque teno virus(TTV)在我国猪群中是否存在及其感染情况,本研究利用套式PCR方法首次检测了来自广东、福建和江西等7个省份的258份血液样品和组织样品.结果表明猪群中TTV1和TTV2感染总阳性卒分别为37.6%和82.6%.两者的混合感染率为38.4%.挑选部分阳性样品用套式PCR引物扩增出TTV1和TTV2的部分非编码区(UTR)片段,并将扩增出的部分UTR基因与已报道的TTV1和TTV2病毒UTR序列进行比较分析,同时我们选择了8份阳性样品进行了TTV1和TTV2的全长基因的扩增和克隆.分析结果显示TTV可分为TTV1和TTV2两大分支,其中我们分离获得的TTV1和TTV2之间的UTR核苷酸同源性分别为80.8%～98.5%和94.2%～100%,而与参考株相比同源性分别为82.7%～100%和95.5%～99.1%.本研究首次证实在我国猪群中存在TTV感染,提示我们对猪群感染的TTV是一个不容忽视的新病原.     

中国部分地区猪圆环病毒2型的基因型分析

对中国11个省(市)部分猪场收集的812份病料,应用ORF2-PCR进行检测,发现有235份为PCV2阳性病料.利用鉴别PCR方法从235份阳性病料中,检出10份PCV2a基因型和133份PCV2b基因型,检出率分别为4.2%、56.6%.进一步对ORF2-PCR检测阳性的部分模板进行全基因组扩增,构建阳性重组质粒,对插入质粒的片段进行测序鉴定,利用DNAStar进行同源性分析,同GenBank参考毒株绘制系统发育树,从系统发育树中也可分出PCV2a、PCV2b 2种基因型.鉴别PCR和测序结果说明,我国部分地区流行的猪圆环病毒2型以PCV2b基因型为主,少数为PCV2a基因型,也有既非PCV2a又非PCV2b的基因型(PCV2c?).