湖南湖北两省H_6亚型禽流感病毒表面基因的序列分析

2008年至2009年间,在湖南和湖北两省的活禽市场中分离到了14株H6亚型禽流感病毒,为了解这14株病毒之间的分子特征和差异,我们运用PCR和测序鉴定对这14株病毒的NA基因进行了分型,并对其表面基因HA和NA进行序列测定及序列分析。14株H6亚型病毒中,H6N2亚型12株,H6N6亚型2株。序列测定和进化分析结果显示：DK/HN/284的HA基因与其它13株的HA差异性较大,差异性达到19.4%～20.2%,其余13株毒同源性在94.2%～99.9%;N2亚型NA基因的同源性在91.1%～99.9%,差异性比较大;两株N6亚型NA基因同源性为89.5%,差异明显。这些数据表明：不同毒株呈现一定的地域性差异。与我国周边其它地区的H6亚型禽流感毒株序列进行比较发现,只有DK/HN/284的HA基因与香港早期的毒株可能有着共同的来源,其余都与香港和韩国等的毒株有着较大的差异性,并且各个毒株的HA基因上潜在的糖基化位点和受体结合位点也有所不同,这些数据表明,这些毒株表现出明显的异源性。     

H9亚型禽流感病毒NJ01株动物回归试验前后生物学特性比较

将鸭源H9亚型禽流感毒株NJ01在SPF鸡胚上所传第四代（E4）,经静脉注射回归8日龄非免疫樱桃谷鸭,取死亡鸭肺组织作为病毒重分离材料,接种SPF鸡胚,收获24～96h死亡鸡胚尿囊液,混合为F1,取F1,按上述方法再次进行回归试验并分离病毒,收获的病毒液记为F2,取E4、F1及F2病毒液,对其生物学特性进行了比较研究。研究结果表明：F2较E4对鸡胚的敏感性增强,其MDT／MLD值减小,对44日龄非免疫樱桃谷鸭静脉攻击的感染性增强,以10^8.5ELD50／羽的剂量攻毒后1d＋2d喉拭子的病毒重分离阳性率由3／5增至4／5。     

李花粉生活力试验

采用发芽法和３ 种不同的染色法对木奈李、普通李和普通桃的花粉生活力进行了测定，同时对花粉生活力测定时的培养条件和测定方法进行了研究比较。结果表明品种类型、 Ｇ Ａ 浓度等试验因素、花粉生活力测定的方法等都会对花粉生活力的高低产生显著的影响。     

J亚群禽白血病病毒SU基因与兔IgG Fc基因在Sf9细胞中的融合表达

为获得J亚群禽白血病病毒(ALV-J)SU和兔IgG Fc的融合蛋白,采用PCR方法扩增出SUJ-IgG Fc基因,并克隆至pFastBac1质粒,构建转移载体pFastBac1-SUJ-IgG Fc;再将其转化DH10BacTM感受态细胞,获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-SUJ-IgG Fc;最后转染Sf9细胞,获得重组病毒rBac-SUJ-IgG Fc。免疫荧光试验结果显示,重组杆状病毒表达的融合蛋白可被ALV-J单抗JE9以及羊抗兔IgG所识别。Western blot结果显示:表达的融合蛋白与ALV-J单抗JE9以及羊抗兔IgG都有很好的反应性,其分子量大小约为95 ku。该融合蛋白的表达为鸡细胞表面ALV-J受体的研究提供了有力工具。     

禽白血病病毒亚群重组囊膜蛋白基因的表达效果

用ELISA法测定了重组杆状病毒rBac-4817env感染的Sf9细胞中重组囊膜蛋白基因的表达效果。用特异性抗禽白血病病毒J型群（ALV-J）单克隆抗体JE9荧光染色证明了重组病毒能够在感染的Sf9细胞中表达ALV-J的env基因；糖基化抑制试验的结果表明，Sf9细胞表达的env基因产物是一种糖基化蛋白。不同量的重组病毒感染细胞与基因产物的表达产量无正相关，然而当每个细胞感染的病毒量2-800个时，表达产量相对较好。表达产物以感染后72-96h较高，并随着感染时间的延长，分泌到细胞外的重组基因产物有所增加，但在120h后，表达产物分解增加。研究结果对今后获取大量的基因的产物，并对其特性进一步研究奠定了基础。     

H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫产生期内T淋巴细胞表型亚类的检测与研究

采用免疫荧光法、使用流式细胞检测仪对经H9亚型禽流感病毒人工感染SPF鸡、H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫SPF鸡以及经免疫后使用H9亚型禽流感病毒攻毒后的SPF鸡外周血、脾脏、胸腺中T细胞表型亚类(CD4+、CD8+、TCR1+)的变化规律进行了监测,结果表明,H9亚型禽流感油乳剂灭活苗免疫后抗原的缓慢释放可在一定程度上激发机体的细胞免疫应答,使免疫活性T淋巴细胞得到活化,免疫后鸡体外周血中CD4+、CD8+和TCR1+T细胞的数量呈现出一明显升高的过程;同时,人工感染免疫鸡后,脾脏和胸腺TCR1+T细胞的数量上升,外周血CD4+、CD8+和TCR1+T细胞的数量少量降低或维持不变,随后短期即恢复正常;而人工感染SPF对照鸡后,外周血CD4+、CD8+和TCR1+T细胞的数量呈现下降趋势.     

"神蜂"牌J9311蜂胶囊对血脂的影响及对遗传安全性研究

本实验通过标准试验动物模型进行神蜂牌J9311蜂胶胶囊药效学研究结果显示:与对照组大鼠相比,J9311蜂胶胶囊低中高各剂量组均可使大鼠血清TC值降低(P＜0.05),证明蜂胶及蜂王浆等混合制剂确实具有较好调节血脂的作用.同时还对其进行动物遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验)结果均为阴性,表明该品在生物学上是安全可靠的.     

基于J2EE的广东国税信息门户应用系统设计开发

分析了传统税务信息系统的弊端,研究了关于开发本系统的J2EE、XML、XSL和MVC等技术,采用分布式多层体系结构的解决方案,在中软业务基础平台之上搭建广东国税信息门户应用系统。从研究、讨论、设计和实现几方面论述了本系统采用的多层体系结构所具有的较强的通用性、较好的可复用性和较灵活的可扩展性以及较高的信息集成性。     

Mortality and weight loss of Atlantic salmon,Salmon salar L., experimentally infected with salmonid alphavirus subtype 2 and subtype 3 isolates from Norway

Pancreas disease (PD) caused by salmonid alphavirus (SAV) has a significant negative economic impact in the salmonid fish farming industry in northern Europe. Until recently, only SAV subtype 3 was present in Norwegian fish farms. However, in 2011, a marine SAV 2 subtype was detected in a fish farm outside the PD‐endemic zone. This subtype has spread rapidly among fish farms in mid‐Norway. The PD mortality in several farms has been lower than expected, although high mortality has also been reported. In this situation, the industry and the authorities needed scientific‐based information about the virulence of the marine SAV 2 strain in Norway to decide how to handle this new situation. Atlantic salmon post‐smolts were experimentally infected with SAV 2 and SAV 3 strains from six different PD cases in Norway. SAV 3‐infected fish showed higher mortality than SAV 2‐infected fish. Among the SAV 3 isolates, two isolates gave higher mortality than the third one. At the end of the experiment, fish in all SAV‐infected groups had significantly lower weight than the uninfected control fish. This is the first published paper on PD to document that waterborne infection produced significantly higher mortality than intraperitoneal injection.     

麻核桃及普通核桃花粉营养成分含量对花粉生活力的影响

以涞水县郭各庄村4个麻核桃品种和2个普通核桃品种的新鲜花粉为试验材料,测定了其花粉的生活力以及花粉中游离氨基酸、可溶性蛋白、可溶性糖和淀粉的含量。结果表明:麻核桃花粉的生活力极低,平均仅为25.37%,普通核桃花粉生活力平均为97.58%,麻核桃花粉生活力极显著低于普通核桃。在花粉营养成分方面,麻核桃花粉游离氨基酸含量平均为0.63%,普通核桃花粉游离氨基酸含量平均为0.38%,麻核桃花粉游离氨基酸含量显著高于普通核桃;麻核桃花粉可溶性蛋白、可溶性糖含量分别为0.67%和5.65%,普通核桃花粉可溶性蛋白、可溶性糖含量分别为2.55%和12.4%,麻核桃花粉可溶性蛋白、可溶性糖含量均极显著低于普通核桃;麻核桃花粉淀粉含量平均为3.96%,普通核桃花粉淀粉含量平均为3.85%,二者之间淀粉含量无显著差异。