蝉棒束孢菌的生物学活性研究进展

蝉棒束孢菌（Icaria cicadae Miq．）是中药蝉花（Cordyceps ciecadae Shing）的无性型,作为一种功能食品被用于预防和治疗多种疾病,具有广阔开发利用前景。从蝉棒束孢菌化学成分、生物活性及发酵生产等方面的研究现状进行概述,探讨了该研究领域的发展前景。     

高雄山虫草无性型-细脚拟青霉原生质体制备及其再生的初步研究

对细脚拟青霉RCEF3456菌株原生质体的形成和制备有影响的多个因素,如菌丝生长时间、酶种类、酶浓度以及酶解时间等进行研究。结果表明,得到制备原生质体的最佳产量(8.0×107个.mL-1)的方法是培养18 h的菌丝、1%溶壁酶 1?llulase"Onozuka"R-10 1%蜗牛酶、酶解2.5 h,而且,酶解过程都是在30℃条件下进行的;同时,对原生质体的形成以及再生过程进行显微观察,再生率为1.2%。     

昆虫病原真菌在当前和未来的温室生态系统中的作用

There are several biopesticides based on entomopathogenic fungi available in the market for use against insect pests in greenhouse ecosystems.Although most are compatible for use with predators and parasitoids in greenhouse ecosystems,much more research is needed to determine the intraguild interactions for each combination of host, pathogen, predator, and parasitoid.Our research has demonstrated that, although direct effects on the predators could be demonstrated in laboratory bioassays, different results were found under greenhouse conditions, indicating that results obtained in the laboratory may be a poor predictor of what occurs in the greenhouse.In both cases, additive effects were obtained under greenhouse conditions,demonstrating compatibility. In addition, there is increasing evidence that entomopathogenic fungi have significant potential for dual management of invertebrate pests and plant pathogens.Our studies demonstrated that 3 species of Lecanicillium had significant effects on both aphids and cucumber powdery mildew, Sphaerotheca fuliginea;that the fungus Paecilomyces fumosoroseus was compatible with a mirid predator,Disyphus hesperus,when used concurrently against greenhouse whitefly,Trialeurodes vaporariorum;and that Lecaniciullium longisporum was compatible with a predatory midge,Aphidoletes aphidimyza when used concurrently against green peach aphids.     

硒对蝉花孢梗束营养和功能成分的影响

以亚硒酸钠为硒源,通过蝉花孢梗束的富硒培养,探究硒对蝉花孢梗束营养和功能成分的影响,并对富硒蝉花孢梗束蛋白质的营养价值进行评价。结果表明,蝉花孢梗束中硒的含量随培养基中外源添加量的增加而提高,当培养基中亚硒酸钠浓度为100 mg·kg^-1时培养的蝉花孢梗束中硒含量达到142.22 mg·kg^-1。富硒培养的蝉花孢梗束中蛋白质、脂肪、腺苷和甘露醇的含量均较对照组有显著的提高,在培养基中亚硒酸钠浓度为75 mg·kg^-1时富硒蝉花孢梗束的蛋白质氨基酸比值系数分(SRCAA)为52.60,高于对照组。聚类分析表明,总体上富硒培养时亚硒酸钠浓度越高对蝉花孢梗束营养和功能成分影响越大。综合分析得出,当培养基中亚硒酸钠浓度为75 mg·kg^-1时既能提高蝉花孢梗束中蛋白质、脂肪、腺苷和甘露醇的含量,又能提高蝉花孢梗束的蛋白质营养价值。     

竹林中虫草及其相关真菌的研究

对安徽省3个不同地区竹林样地的虫草及虫生真菌进行了野外采集和调查,发现安徽省竹林中分布的虫草分别为多座线虫草（小蝉草）Ophiocordyecps sobolifera、大蝉草 Cordyceps cicadae、拟细线虫草 O. gracilioides、一种线虫草 O. sp.;主要虫生真菌分别为蝉棒束孢 Isaria cicadae、细脚棒束孢 I. tenuipes、球孢白僵菌 Beauveria bassiana、布氏白僵菌 B. brongniartii、柱孢绿僵菌 Metarhizium cylindrosporae。其中蝉棒束孢最多,在3个地区竹林中均占60%以上。竹林中主要寄主为蝉若虫,在3个地区竹林中均占80%以上。并且对竹林中蝉棒束孢的发生规律和发生周期进行了研究。     

西双版纳自然保护区玫烟色棒束孢分布的时空动态及寄主多样性

为明确西双版纳自然保护区虫生玫烟色棒束孢的时空动态及寄主多样性，以期为玫烟色棒束孢的开发利用提供理论依据和材料。本研究于2017年7月—2018年9月，对西双版纳自然保护区石灰岩山季雨林、热带季雨林、季风常绿阔叶林、热带丛生竹林、暖热性针叶林5种生境中玫烟色棒束孢的发生季节、生境分布和寄主进行了调查研究，采用形态学和ITS序列对菌株进行种类鉴定。结果表明，在西双版纳自然保护区共采集玫烟色棒束孢674株。从时间动态来看，玫烟色棒束孢于当年10月至次年4月为发生流行期，12月或次年1月为发生高峰期。从空间分布来看，玫烟色棒束孢主要分布于热带丛生竹林和石灰岩山地雨林的低、高和中海拔地带，分别采集到150和133、118、104株，相对丰度分别为22.3%、19.7%、17.5%和15.4%；热带季雨林和季风性常绿阔叶林中相对较少，分别采集到77和73株，相对丰度分别为11.4%和10.8%；暖热性针叶林生境仅采集到19株，相对丰度为2.8%。从海拔分布来看，石灰岩山季雨林生境中，玫烟色棒束孢在高、中、低海拔生境中分布的差异不明显，低海拔生境中菌株数量略高于中海拔和高海拔生境。玫烟色棒束孢的寄主节肢动物有2纲12目，包括昆虫纲11目，蛛形纲1目，其中优势寄主为鳞翅目和膜翅目，其相对丰度分别为40.4%和36.4%。该研究为玫烟色棒束孢生物多样性研究提供了重要内容，也为害虫生防高毒力玫烟色棒束孢菌株筛选提供材料。     

两株棒束孢菌的鉴定及其对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾的致病力

为明确分离自茶卷叶蛾和中华大刀螳僵虫的2株虫生真菌的归属及生防潜力,采用形态学特征和rDNA-ITS序列分析其分类地位,测定了其对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾幼虫的致病力,并初步筛选了其最适培养条件.结果表明:2株真菌均为环链棒束孢Isaria cateniannulata,分别命名为ICBS918和ICTL911.在1.0×10⁸孢子/mL浓度下,ICBS918和ICTL911对茶卷叶蛾幼虫的累计校正死亡率均达100%,LT₅₀分别为3.13 d和3.15 d;对茶小卷叶蛾幼虫的累计校正死亡率分别为100%和95%,LT₅₀分别为3.25 d和3.31 d.接菌后8 d,2菌株对茶卷叶蛾幼虫的LC₅₀分别为0.47×10⁵孢子/mL和1.01×10⁵孢子/mL;对茶小卷叶蛾幼虫的LC₅₀分别为2.20×10⁵孢子/mL和1.34×10⁵孢子/mL.2菌株23 ℃下最适生长培养基均为综合马铃薯培养基,最适产孢培养基均为蛋白胨马铃薯葡萄糖琼脂培养基;在萨氏培养基上,菌株ICBS918和ICTL911分别在24~30 ℃及24 ℃时生长速度最快,在27 ℃和21 ℃时产孢量最大.表明2株环链棒束孢对茶卷叶蛾和茶小卷叶蛾幼虫均具有较好的生防潜力,可作为生防菌进行开发和应用.     

亚洲柑橘木虱2株高致病力病原真菌菌株的筛选

【目的】筛选对亚洲柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama具有高致病力的真菌菌株,为其微生物农药的研发奠定基础。【方法】测定5株球孢白僵菌Beauveria bassiana(菌株A~E)和5株玫烟色棒束孢菌Isaria fumosorosea菌株(菌株A~E)的生长速率、产孢量以及对木虱若虫的侵染致死率等,并进行比较分析。【结果】5株球孢白僵菌培养10 d后产孢量存在较大差异,A菌株的产孢量最少(7.96×107mL~(-1)),E菌株的产孢量最多(3.78×108mL~(-1)),两者差异显著;在喷施球孢白僵菌孢子1×106mL~(-1)7 d后,对柑橘木虱低龄若虫的致死率与对照差异不显著,以A菌株的致死率最高(78.0%),E菌株次之(77.0%)。5株玫烟色棒束孢菌株培养10 d后,B菌株产孢量最多(6.04×108mL~(-1)),E菌株的最少(6.28×107mL~(-1)),两者差异显著;在喷施玫烟色棒束孢孢子1×106mL~(-1)7 d后,除D菌株外,其他制剂对亚洲柑橘木虱低龄若虫的致死率均显著大于对照,B菌株的致死率最高(81.0%)。【结论】综合考虑产孢量及致病力等指标,球孢白僵菌E菌株和玫烟色棒束孢B菌株是具有良好研发前景的柑橘木虱生物防治高致病力优良菌株。     

玫烟色棒束孢基因组候选效应因子的预测分析

在玫烟色棒束孢（Isaria fumosorosea）全基因组10 061个蛋白质序列的基础上,经过SignalP v4.1分析得到1 112个具有信号肽的蛋白序列;以此为基础用TMHMM v2.0分析得到1 030个跨膜数小于2的蛋白序列;1 030个具有信号肽的蛋白经过TargetP v 1.1分析得到1 001个定位为S的蛋白序列;最后经过ProtComp v 9.0分析,得到929个蛋白质定位于细胞质中的分泌蛋白序列。929个蛋白中包含半胱氨酸含量大于等于6的蛋白序列共495个,其中146个蛋白序列的串联重复序列大于或等于9。共137个蛋白在病原物-寄主互作数据库（Pathogen-host interaction database,PHI）中获得注释,其中91个蛋白为候选效应蛋白。挑取小于300个氨基酸的蛋白序列,共筛选到19个候选效应因子。最终从10 061个蛋白序列中筛选得到19个候选致病效应因子。     

竹蝉生物学特性的研究

竹蝉在浙江省为6a1代，若虫于地下吸食竹子鞭、根的汁液以卵在竹上枯枝中和各龄若虫在土下越冬，成虫发生在6月底，7月初到9月上中旬，刺吸竹、树树汁液为补充营养，有扑灯、鸣叫习性；7－8月在竹上已死2－3年的枯竹枝上产卵，每产卵孔中有卵12－21粒，卵于下年7月上旬孵化。若虫5龄，生活于土下5－40cm深的竹鞭两侧，每穴1虫，虫穴与地面有垂直的通气孔；若虫性好斗，两虫相遇，常争斗致伤或致死。天敌较多，重要的有竹蝉卵旋小蜂，38．3％－41．4％的产卵孔中发现有旋小蜂的幼蜂，1头幼蜂可食竹蝉卵2－4粒。竹蝉履甲取食若虫，挖掘500余头老熟若虫于室内饲养，若虫被食率28．71％－32．58％。蝉花菌也寄生若虫，经5a调查，寄生率为32．5％－37．8％。防治竹蝉可采取加强竹林管理、挂枝诱成虫产卵、灯诱成虫及人工捕捉等措施。