鸡白细胞介素18研究进展

鸡白细胞介素(IL-18)是一种新发现的细胞因子,其cDNA全长597 bp,编码198个氨基酸的前体多肽,分子量约为23 kDa,IL-18氨基端的29个氨基酸残基起胞内定位作用;鸡IL-18是IFN-γ诱生剂,通过IFN-γ发挥抗感染、促生长等作用,参与对微生物感染诱导产生细胞和体液免疫反应的初次免疫应答;鸡IL-18作为免疫佐剂,具有增强免疫和治疗作用,还具有抗肿瘤免疫作用。     

水翁花提取物的PPARγ配体活性鉴定

[目的]鉴定水翁花提取物2,4-二羟基-6-甲氧基-3,5-二甲基查耳酮(DMC)的PPARγ配体结合活性及其特点。[方法]用GAL4嵌合体报告基因试验检测DMC的PPARγ配体结合活性;用油红O染色法检测DMC对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响;用[3H]-2-脱氧葡萄糖摄取试验检测DMC对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取的影响;用荧光实时定量PCR检测经DMC处理的3T3-L1脂肪细胞中PPARγ靶基因的表达情况。[结果]DMC能以剂量依赖型的方式对PPARγ产生激活作用,促进脂肪细胞的分化,显著提高脂肪细胞的葡萄糖摄取率,并且提高脂肪细胞中一些PPARγ靶基因的表达量。[结论]DMC能通过激活PPARγ促进脂肪细胞的葡萄糖摄取。     

Effects of the exopolysaccharide fraction (EPSF) from a cultivated Cordyceps sinensis on immunocytes of H22 tumor bearing mice

In order to explore the effects of exopolysaccharide fraction (EPSF) from one of the anamorph strains of Cordyceps sinensis on immunocyte activity of H22 tumor bearing mice, ICR mice were treated with EPSF for 7 days by intraperitoneal injection at doses of 15 mg/kg (low-dose), 30 mg/kg (mid-dose) and 60 mg/kg (high-dose) after H22 tumor cells were implanted. At the end of the experiments, the tumor weight of each mouse was measured. Phagocytosis of mouse peritoneal macrophages was tested by neutral red uptake. The TNF-alpha expression of macrophages was assayed by ELISA. Proliferation ability and cytotoxicity of spleen lymphocytes were determined by MTT methods. The mRNA levels of cytokine TNF-alpha and IFN-gamma mRNA of spleen lymphocytes were detected by RT-PCR. The results indicated that EPSF not only significantly inhibited the H22 tumor growth, but also significantly elevated immunocytes' activity. It significantly enhanced the phagocytosis capacity of peritoneal macrophages and proliferation ability of spleen lymphocytes at all the three doses; it significantly promoted macrophages' TNF-alpha expression and spleen lymphocytes' cytotoxicity. EPSF also significantly elevated TNF-alpha and IFN-gamma mRNA expression of splenic lymphocytes. This experimental finding suggests that EPSF could elevate the immunocytes' activity in H22 tumor bearing mice.     

牛IgG Fc受体Ⅱ胞外区在大肠杆菌中的表达及特性鉴定

从牛肺巨噬细胞cDNA文库中扩增编码牛IgGFc受体Ⅱ(boFcγRⅡ)胞外区基因,PCR产物经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体pET28a的T7启动子下游,构建重组表达质粒pETboRⅡ。以pETboRⅡ转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析诱导表达菌体可见分子量约为27kDa的蛋白条带,该表达蛋白在细胞质中主要以不溶性包涵体形式存在。Westernblotting和Dotblot检测表明,boFcγRⅡ重组蛋白在变性条件下可与牛IgG特异结合,提示牛FcγRⅡ胞外区可能存在IgG线性结合表位。     

巨胚水稻W025糙米浸水后γ-氨基丁酸含量变化的研究

富含γ-氨基丁酸（GABA）的降血压功能水稻正受到越来越多的关注。W025是通过化学诱变和杂交选育而成的水稻新品系,具有巨胚特征,遗传分析表明巨胚基因受单隐性基因控制。进一步研究W025和其原始品种金南风浸水后γ-氨基丁酸（GABA）含量及其合成关键酶——谷氨酸脱羧酶活性的动态,并用半定量RT-PCR检测了2个谷氨酸脱羧酶转录本在浸水过程的表达变化。结果表明,（1）GABA主要集中在胚部,浸水后W025的GABA积累量显著高于金南风。（2）随着浸水时间延长,谷氨酸脱羧酶（GAD）的活性呈逐渐增加趋势,W025胚部的酶活性显著高于金南风。GAD活性的变化与GABA的积累显著正相关,表明浸水后种胚GABA的积累与谷氨酸脱羧酶的催化反应有关。（3）2个谷氨酸脱羧酶基因OsGAD1与OsGAD2在W025和金南风之间没有转录水平的差异。提示可能存在其它的谷氨酸脱羧酶基因对浸水后GABA的积累起关键作用。     

60Coγ辐射对烟草M1代种子萌发及幼苗的影响

用不同剂量（200~400Gy）的60Coγ射线对3个不同品种的烟草干种子辐射,对其M1代种子萌发及幼苗进行调查,测定了M1代发芽率、发芽势和发芽指数,测量了幼苗7天、14天芽长及根长,对所得数据用新复极差法进行多重比较。结果表明,在200~400Gy范围里,随着剂量增加,烟草种子的发芽率、发芽势和发芽指数均降低,幼芽、幼根生长缓慢,各剂量处理与对照相比均达到0.01或者0.05水平,其中对芽长和根长的抑制作用最为明显,各剂量处理与对照相比均达到极显著水平,其次为发芽指数、发芽势、发芽率。     

纳米Cs_2O/γ-Al_2O_3固体碱催化红麻籽油制备生物柴油

以纳米γ-Al2O3粉体为载体,应用等体积浸渍CH3COOCs制备Cs2O/γ-Al2O3催化剂,并通过TPD-CO2、XRD、TEM等手段对催化剂的碱性、结构和表面形貌进行表征,并将其用于催化红麻籽油制生物柴油反应.通过催化剂活性评价结果,分析了纳米固体超强碱制备过程及酯交换反应过程中各种因素的影响.结果表明,催化剂的粒径为10-25 nm,负载量为2mmol.g-1时,催化剂具有强碱性,其活性最好.甲醇与红麻籽油的摩尔比为9∶1,催化剂用量为油料的2.5%,反应时间3 h,转化率可达到90.7%.     

抗热应激饲料添加剂对猪生长性能的影响及作用机理研究

将112头育肥猪随机地分为7组,在1~6组的日粮中分别添加以下抗热应激添加剂:γ-氨基丁酸0.004%、γ-氨基丁酸0.008%、γ-氨基丁酸0.004%+巴氯芬0.001%、巴氯芬0.001%、γ-氨基丁酸0.004%+巴氯芬0.001%+维生素C(Vc)0.01%、微生态制剂0.05%,第7组为对照组。结果表明:第3、5、6组的日增重分别比对照组提高了15%、18%、18%(P0.05)。无论哪一种添加剂,都可提高猪的采食量,但根据料肉比的结果,以第5组的效果最好。与对照组相比,各处理组皆可使猪消化道内的大肠杆菌和乳酸菌的数量有不同程度的降低(P0.05),而使饲料中蛋白质、钙和磷等营养物质的消化率有不同程度的升高(P0.05)。血清学分析结果表明:与对照组相比,第3组的碱性磷酸酶活力明显升高(P0.05),第4组的球蛋白含量和第6组的葡萄糖含量明显地低于对照组(P0.05),其它血清学指标无明显差异。综上所述,最佳的抗热应激和促生长饲料添加剂为γ-氨基丁酸+巴氯芬+Vc组合。     

鸡α-干扰素对罗曼雏鸡免疫功能的影响

为研究鸡α-干扰素对罗曼雏鸡免疫功能的影响,将60羽健康1日龄罗曼雏鸡随机分为2组,即对照组、试验组。试验组鸡于1日龄胸肌注射鸡-α干扰素,0.5 mL/羽;对照组鸡同期每羽注射生理盐水0.5 mL。试验开始后,于第4 d、8 d、12 d、16 d、20 d对鸡进行翅下静脉采血,并于20日龄剖杀摘取免疫器官。研究表明,鸡注射α-干扰素后,其外周血液ANAE+T淋巴细胞百分率和鸡脾相对湿重显著高于对照组,鸡α-干扰素在一定范围内可提高雏鸡免疫功能。     

山羊IFN-γ基因的克隆表达与多克隆抗体制备

为获得山羊IFN-γ重组蛋白,提取山羊外周血淋巴细胞总 RNA,反转录得到 cDNA,以此为模板经PCR扩增获得IFN-γ的ORF区,构建重组克隆载体。经PCR扩增得到编码山羊IFN-γ成熟肽的基因序列,连入重组表达载体 pET-32a,转入 BL21（Codon Plus）感受态细胞中,测序并分析。重组表达载体经IPTG诱导后,对产物进行SDS-PAGE分析,并过镍柱纯化。用获得的纯化蛋白免疫家兔制备抗体。结果显示,编码山羊IFN-γ成熟肽部分的片段长432 bp;SDS-PAGE分析显示,融合蛋白大小约为34．9 ku,在30℃条件下,以0．3 mmol／L的IPTG诱导6 h,可得到大量可溶性表达的目的蛋白;间接 ELISA测定制得的多克隆抗体效价为1∶106。