传染性法氏囊病疫苗免疫雏鸡局部体液的免疫学变化

应用间接ELISA法,检测了传染性法氏囊病疫苗免疫雏鸡4种局部体液(泪液、气管液、胆汁、肠液)免疫球蛋白IgG、IgM、IgA含量的动态变化。结果发现免疫雏鸡局部体液3种免疫球蛋白含量较未免疫对照雏鸡均有不同程度地升高;IBD超强毒株攻击后,对照雏鸡上述指标均明显低于疫苗免疫雏鸡,发生典型IBD,并全部死亡,而疫苗免疫雏鸡免疫保护率达60%,表明疫苗免疫后,可增强雏鸡的局部体液免疫功能。     

鸡感染传染性支气管炎病毒的免疫机理

由于鸡传染性支气管炎病毒极易发生点突变、基因缺失、插入及重组,导致病毒不断产生变异,新的血清型和基因型不断出现,使得实际生产中免疫接种失败的现象不断发生。而鸡感染传染性支气管炎病毒的免疫机制一直是国内外研究的热点之一,它的免疫反应包括非特异性免疫和体液免疫、细胞免疫及黏膜免疫,这些免疫反应相互作用、互相补充,各自发挥着重要作用。文章从机体针对该病毒感染的免疫基础、分子基础和其激发的多种免疫反应等角度阐述了该病毒感染机体的免疫机制。     

免疫鸡群肾型传染性支气管炎病毒的分离和鉴定

[目的]鉴定免疫鸡群肾型传染性支气管炎病毒（IBV）。[方法]以接种IBV的鸡胚尿囊液为模板,根据GenBank中登录的IBV的N基因序列设计引物,通过RT-PCR扩增出目的片段,经酶切鉴定后对其进行测序鉴定。[结果]PCR扩增片段长度为409bp,将其Ⅳ基因核苷酸序列与不同地区分离株（山东、黑龙江等）以及欧洲呼吸型疫苗株（M41）的IBV核苷酸序列进行比较,结果表明,不同毒株的核苷酸同源性在85．6％～100．0％,此次分离所得IBV的N基因与IBVSD0708株（EU352625）N基因的核苷酸同源性高达99．3％,而与呼吸型疫苗株M41（M28566）的同源性仅为87．3％。测序结果及序列分析可以证实分离到的病毒为IBV,命名为HN／HL株。[结论]该研究为鸡传染性支气管炎病毒的控制奠定了基础。     

鸡传染性鼻炎灭活油乳剂苗研究

本研究用司本—８０和硬脂酸铝加入白油为油相，吐温—８０加入灭活的副鸡嗜血杆菌液为水相，制备成油乳剂苗．该苗属油包水类型，４℃放置６个月稳定，５倍量接种产蛋鸡，结果无不良反应。该苗免疫鸡群后一个月，其凝集抗体效价为１：６４～１：１２８，攻毒保护率为１００％，免疫期６个月．     

低聚异麦芽糖对IBD中等毒力疫苗免疫增强作用的研究

选用两种在山东省普遍使用的中等毒力IBD疫苗,将试验分成12组,分别在12日龄和19日龄两次免疫商品鸡,同时在10日龄时用低聚异麦芽糖饮水,连用7d,二免后13d人工接种vvIBDV,连续观察14d。根据血清学检测指标、囊指数、BBIX值、病理组织学检查、临床保护率和病理保护率结果,都充分表明低聚异麦芽糖对传染性法氏囊病中等毒力疫苗具有显著的免疫增强作用,而且对提高法氏囊等免疫器官的保护作用及疫苗对其损伤后的修复作用也有显著效果。     

IBDV中国超强毒株Harbin-1基因组B节段的克隆和序列分析

给SPF鸡人工接种鸡传染性法氏囊冱病毒中国超强毒株Harbin-1，用LiCl分级沉淀方法从法氏囊组织纯化病毒基因组dsRNA，通过RT－PCR分两段扩增获得B节段的cDNA片段Ph12与pb34。将pb12与pb34分别克隆到pGEM-T载体上测序，然后进行序列分析，对各毒株VP1序旬进行同源性分析而得出的系统树表明Harbin-1与超强毒株IL3、HK46、UK661和OKYM之间的亲缘关系较其它毒株更近，但强弱毒株之间没有明显的界限，在Harbin-1 B节段序列中没有发现上述超强毒株所独有的7个氨基酸。     

传染性法氏囊病病毒中间株有关特性的研究

CEF－9是传染性法氏囊病病毒超强毒株vvIBDV-Gx在鸡胚成纤维细胞上传代致弱过程中的第9代毒。我们对其分子生物学及生物学特性进行了研究，结果表明其VP2基因序列即具有超强毒的特性，又兼有部分致弱毒的特征；其致病性介于超强毒株和致弱株之间；在体内外均不稳定的，体外继续传代可继续致弱，回归体内可迅速返强。这说明CEF－9是vvIBDV驯化时，毒力强弱转化的中间过渡形式。     

鸡新城疫-减蛋综合征-传染性法氏囊病三联油乳剂灭活疫苗的研究

用NDLaSota弱毒株、EDS76毒株、IBD地方分离株JD2及D78株 ,分别接种鸡胚、鸭胚 ,收集尿囊液等含毒组织 ,结合JD2囊组织毒 ,制备各种病毒抗原 ,经福尔马林灭活后按一定比例混合 ,再加入含硒免疫增强剂 ,与白油佐剂乳化成油包水型三联乳剂疫苗。对三联苗各项技术指标进行了测定 ,证明本疫苗安全、无副作用 ,接种后 2～ 3周产生免疫保护 ,ND和EDS76攻毒保护率为 10 0 %。通过免疫抗体检测 ,该三联苗均能产生较高效价的抗体 ,其中IBDAGP抗体效价达7 4 2 (log2 ) ;NDHI抗体效价达 9 2 4 (log2 ) ;EDS76HI抗体效价达 9 18(log2 )。种鸡注苗后 8周测定其 1日龄雏鸡IBDAGP抗体阳性率为 96 35 %。本疫苗在河北省一些种鸡场和蛋鸡场进行区域试验 ,获得满意效果 ,有效控制了ND、EDS76及IBD的发生及流行。     

Relative quantification and detection of different types of infectious bursal disease virus in bursa of Fabricius and cloacal swabs using real time RT-PCR SYBR green technology

In present study, different types of infectious bursal disease virus (IBDV), virulent strain DK01, classic strain F52/70 and vaccine strain D78 were quantified and detected in infected bursa of Fabricius (BF) and cloacal swabs using quantitative real time RT-PCR with SYBR green dye. For selection of a suitable internal control gene, real time PCR parameters were evaluated for three candidate genes, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH), 28S rRNA and beta-actin to IBDVs. Based on this beta-actin was selected as an internal control for quantification of IBDVs in BF. All BF samples with D78, DK01 or F52/70 inoculation were detected as virus positive at day 1 post inoculation (p.i.). The D78 viral load peaked at day 4 and day 8 p.i., while the DK01 and F52/70 viral load showed relatively high levels at day 2 p.i. In cloacal swabs, viruses detectable were at day 2 p.i. for DK01 and F52/70, day 8 p.i. for D78. Importantly, the primers set were specific as the D78 primer set gave no amplification of F52/70 and DK01 and the DK01 primer set gave no amplification of D78, thus DK01 and D78 could be quantified simultaneously in dually infected chickens by use of these two set of primers. The method described here is robust and may sever as a useful tool with high capacity for diagnostics as well as in viral pathogenesis studies.