禽劳斯肉瘤病毒群特异性抗原基因gp27片段的克隆及序列测定

以RT-PCR方法从人工感染禽劳斯肉瘤病毒(Rous sarcoma virus，RSV)SR-RSV的SPF雏鸡体内及SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物中分别扩增出720bp的gp27片段，将RT-PCR产物重组到质粒栽体pUCl9中，并对重组质粒进行酶切分析及序列测定。结果表明，克隆片段为完整的目的基因，该片段的核苷酸序列与国外分离株RSV J02342的同源性达97．3％。     

小鼠乳清酸蛋白上游调控序列的克隆及其指导下CAT基因在家兔乳腺中的表达

应用PCR技术,从小鼠基因组中克隆了1.6kb乳清酸蛋白(WAP)基因5′上游调控序列,经酶切和测序证实与已知序列基本一致.为了证实此调控序列能否指导外源基因在乳腺中的表达,将此序列与报告基因CAT融合,构建了pWAP-CAT-polyA乳腺定位表达载体,脂质体包裹后,经乳导管将其注入到妊娠中后期家兔乳腺中进行暂时表达.分别于家兔分娩后1～10 d采奶,用ELISA检测乳汁中CAT含量.结果表明,所构建的载体在家兔乳腺中能够表达,表达水平在家免分娩后1～5 d较高.     

用3′RACE方法扩增并克隆口蹄疫病毒基因组3′末端序列

应用 3′RACE方法扩增并克隆了口蹄疫病毒 ( FMDV) OH99株基因组 3′端真实序列。测序结果表明 ,所扩增的目的基因片段长 15 0 0 nt,包括 3D基因部分序列、3′端非编码区 ( Non- Coding Region,NCR)和 Poly( A)尾巴 ,其中 3′NCR位于终止密码子 TAA之后 ,长 93nt,Poly( A)尾序列至少含有 5 6个 A。与参考毒株进行序列比较 ,结果显示 ,OH99株与 OTY TW/ 97株的核苷酸同源性较高 ,为 91.4 % ,而与 O1K、CHINA99、A12等毒株的核苷酸同源性较低 ,其同源性分别为 6 8.1%、71.0 %、70 .2 %。 3′NCR的末端存在保守性较高的基序 :CCCTCAGATG,TTTTCCC-CGCTTCCT。本研究为进一步研究 FMDV基因组的功能、构建 OH99株的反向遗传操作系统奠定了基础。     

六倍体小麦品种微卫星位点的序列变异

小麦微卫星XGWM261对小麦育种者是很有意义的，因为它与显著降低株高的基因（Rht8）是连锁的。早先的研究已表明在此XGWM261位点上存在3个主要的等位基因，并且大多数品种（90％）都是纯合的，因而形成了192、174或165bp的PCR产物。因为预先调查了澳大利亚小麦品种XGWM261位点上的杂合性和序列变异，所以我们用澳大利亚育种方案中24个重要的六倍体品种进行了克隆和PCR产物排序。     

伊氏锥虫HGPRT基因cDNA的克隆及其在E.coli中的表达

根据引物设计的一般原则，参照伊氏锥虫HGPRT基因的核苷酸序列设计、合成一对引物，PCR扩增伊氏锥虫HGPRT基因cDNA。低熔点琼脂糖回收：PCR产物，并将其克隆至pGEM—T Easy载体中，经酶切、PCR鉴定和序列分析，获得重组中间质粒pGEM／HGPRT。重组中间质粒pGEM／HGPRT经Nco I和Sal I双酶切，回收目的片段HGPRT，以非融合形式插入原核表达质粒pBV220构建表达质粒pBV／HGPRT，转化大肠杆菌DH5a，42℃诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳和薄层扫描分析，表达产物HGPRT的分子量约为23kD，与理论推算值相符，表达率占总菌体蛋白的19％，经间接ELISA检测，表达产物能被伊氏锥虫阳性血清所识别。     

基于粗糙熵的时序数据属性约简及规则提取研究

分析了近似质量在提取非确定性规则方面的不足，并基于粗糙熵的预测成功度概念，结合时序数据特点，提出一种属性约简及规则提取策略．该策略在对时序数据进行属性约简时，采用粗糙熵与时间距离相结合的方法，使得最终得到的约简在时序方面是较优的,最后使用UCI数据库进行仿真实验，效果良好．该策略在工程领域处理时序数据方面有一定的应用价值．     

鸡痘病毒282E4株2.2kbTK基因序列分析

将鸡痘病毒２８２Ｅ４弱毒株基因组中的３．７ｋｂＨｉｎｄⅢ片段克隆到ＫＳ（－）质粒中，亚克隆后，获得含ＴＫ基因正反方向插入的２．２ｋｂＨｉｎｄⅢ－ＣｌａＩ片段的质粒ｐＫＦＡ和ｐＫＦＢ，进而构建出正反方向的系列嵌套缺失质粒。用Ｔ７、Ｔ３引物所做的核苷酸序列分析表明，２．２ｋｂＨｉｎｄⅢ－ＣｌａＩ ＴＫ基因序列长为２１５９ｂｐ，含有两个完整的读码框架（ＯＲＥ）Ｘ和ＴＫ，并确证了ＴＫ基因内存在单一酶切点Ｎ     

利用LBS技术解决ITS的信息通信问题

ITS技术是实现运输业的繁荣与可持续发展的先进技术,信息通信技术则是ITS的核心技术,其功能是使ITS能够有效地在系统中传输和处理信息,最终形成决策.如何解决ITS的信息通信问题,一直是ITS的研究热点,也一直是ITS中优先运用新技术的子系统.本文介绍了LBS(定位信息服务)的起源及相关技术,分析并讨论了利用LBS解决ITS的信息通信问题,提出了基于LBS的ITS系统模型,指出LBS对ITS的推动与发展作用.     

我国一杂交商品猪IgM恒定区CH3-CH4亚区的克隆与表达

目前，国内对猪免疫球蛋白方面的研究较少，赵凯等于1999年对猪IgGH链进行了克隆和表达一。BOSCH等克隆了猪的IgM链，但至今未有关于猪IgM功能区蛋白表达方面的研究报道。本文将对我国一商品杂交品种皮杜猪的IgMCH3-CH4区进行了PCR扩增、克隆、序列测定和分析，并通过表达载体进行表达。其目的是为以后进一步研究IgM抗体亚区的功能打下基础。