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根据已克隆的堆型艾美球虫(Eimeria acervulina)广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的cDNA序列设计了特异性引物,用PCR方法扩增cSZ1的开放阅读框架(ORF)后克隆至表达载体pET-32a( ),构建了重组表达质粒pET-32a( )-cSZ1,并将其转化至大肠埃希氏菌BL21(DE3)。经IPTG诱导,获得了cSZ1重组抗原在大肠埃希氏菌中的高效表达,表达产物量可达菌体总蛋白的9.3%,融合蛋白的分子质量约为40ku。重组菌诱导表达的产物经SDS—PAGE后,用堆形艾美球虫感染鸡的超免疫血清进行免疫印迹分析,结果为阴性,提示cSZ1所编码的抗原可能主要是T细胞抗原表位。 相似文献
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以猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增外膜蛋白(OMP)5′末端保守区基因片段(OMPc),酶切及核苷酸序列分析鉴定后,与原核表达载体质粒pGEX-6P-1进行连接,构建成重组表达载体pGEX-OM-Pc,转入大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳分析发现,转化了重组质粒的菌株所表达的融合蛋白相对分子量为34 kD,与实际预测相符,命名为GST-OMPc.GST亲和层析柱进行纯化,ELISA方法对纯化蛋白进行检测.结果表明:纯化蛋白GST-OMPc能够与兔抗猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型的阳性血清反应.OMPc蛋白的成功表达为其功能的研究打下基础. 相似文献
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职业学校要根据党和国家对深化职业教育改革的要求,在实践中逐步建立职业学校和企业联合培养技术技能型人才的产教融合校企合作机制,探索职业知识学习与实践技能掌握之间实现良性对接的方式和途径,切实提高学生的学习效率,增强学生就业的适应能力。文章以职业学校平面设计实践课程为例,探索职业学校产教融合智慧课堂构建的基础、方法、原则和特点。在实践中采用校企合作的方式,与企业的生产经营项目有机结合,让智慧课堂教学与企业生产经营项目融合在一起,将传统封闭式课堂教学模式向开放式教学模式转型,激发学生的学习兴趣,变学生被动的学习为积极主动的探究性学习,以职业技能为导向,重视实践动手能力培养,提高职业素质综合能力,实现职业学校学生在校学习与企业岗位需求的"无缝对接"。 相似文献
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