灵芝多糖与三萜类的提取纯化工艺研究进展

多糖和三萜两大类活性物质是灵芝的主要药效成分.本文综述了从灵芝子实体、菌丝体和孢子中提取纯化灵芝多糖和三萜类物质的提取纯化工艺研究现状、研究趋势及研究内容.     

桉苗灰霉病初步研究

按苗灰霉病(Botrytis cinerea Pers.ex Fr.)是近年在云南省新发现的病害,过去未曾报道。该病多发生在按苗幼嫩的茎上部和叶片上,可造成按苗迅速死亡。早春连绵阴雨,气温较低,致使该病易造成流行,该病的流行也与管理措施密切相关。采取平衡施肥,加强苗期管理是最有效的预防措施。发病期可施用75%百菌清可湿性粉剂1:500倍;或70%敌克松可湿性粉剂与等量的50%多菌灵可湿性粉剂混用,稀释1000倍常量喷雾,每7~10天一次,连续喷2~3次,可有效地控制按苗灰霉病蔓延流行。     

响应面法优化灵芝子实体多糖提取工艺及其抗氧化活性研究

为确定灵芝子实体多糖最佳提取工艺,通过单因素实验研究料液比、提取时间、浸提温度及溶剂提取次数对灵芝子实体多糖提取率的影响。在此单因素试验的基础上,采用响应面法对灵芝子实体多糖提取工艺进行了优化。实验结果表明,灵芝子实体多糖浸提的最佳提取条件为液固比50:1,提取时间 60min,提取温度100℃,在此条件下灵芝子实体多糖的提取率为2.96%;体外抗氧化测定结果显示,灵芝子实体多糖对 DPPH、OH自由基的 IC50 分别为 0.67mg/mL和0.46 mg/mL,数据表明灵芝子实体多糖具有极强的抗氧化能力。     

狗牙根种质资源营养价值评价

测定了91份狗牙根种质营养期干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、无氮浸出物、钙和磷含量等8个营养成分指标,并以粗蛋白、粗脂肪、粗纤维和无氮浸出物作为判断指标,应用层次分析法对其营养价值进行评价,可将91份种质分为高营养型、低营养型和普通营养型3类.旨在为狗牙根作为饲草的应用价值提供理论依据.     

灵芝免疫调节蛋白基因的克隆和分析

采用同源克隆方法,分别以6个灵芝品种和1个云芝品种的基因组DNA为模板,进行灵芝免疫调节蛋白基因的PCR扩增。扩增产物克隆进T-载体后,进行DNA测序和BLASTn序列分析。结果表明,从赤芝、紫芝、韩芝和甜芝4个菌株中克隆到的PCR扩增片段,含有灵芝免疫调节蛋白基因编码区全长,顺次编号为gimp01,gimp02,gimp03,gimp04。它们已经在国际GeneBank中登记注册,注册号:AY449802,AY449805,AY449804,AY449803。     

西南区野生狗牙根综合形态指标研究

对49份有代表性的西南区野生狗牙根的20个外部形态综合指标进行观测,通过聚类分析,初步筛选出C1,C32,C9三份材料,为野生资源的开发利用提供依据。     

福建省烟草灰霉病的发生与病原鉴定

观察并记述了福建省烟草灰霉病的发生特点和病害症状。结果表明,烟草灰霉病的病原鉴定为灰葡萄孢(Botrytis ci-nerea),接种实验表明该病原菌具有很强的致病力,可以侵染叶片和茎部,致整株烟苗枯萎死亡。     

八种杀菌剂对橡胶树红根病菌的毒力测定

采用生长速率法,在室内测定8种杀菌剂对橡胶树红根病病原菌Ganoderma pseudoferreum（Wakef.）Over.etsteinm GP-010菌株的毒力。结果表明：参试药剂对橡胶树红根病病原菌均具有较高的敏感性,其中12.5%己唑醇WP对橡胶红根病菌生长的抑制作用最强,其EC50值为0.04 mg/L;25%戊菌唑WP、25%丙环唑EC的抑制作用相对较强,其EC50值分别为0.29和0.32 mg/L,其余依次为75%十三吗啉EC、20%三唑酮EC、12.5%烯唑醇WP、25%咪鲜胺EC及25%腈菌唑EC,EC50值分别为0.46、1.38、1.46、2.39和2.94 mg/L。     

灵芝多糖液体发酵条件优化

从一系列灵芝(Ganoderma sp.)菌种中筛选出多糖产量高、生长快的紫灵芝菌株(G.japoncium),研究了不同氮源、碳源及金属离子对紫灵芝产多糖的影响。结果表明,以2%的蔗糖为碳源,0.2%的豆饼粉为氮源,0.2%的FeSO4为培养基可获得较高多糖。发酵罐放大实验表明,采用同样的培养基,每100mL发酵液胞外粗多糖含量可高达181.7mg,每100mL发酵液菌丝体含量可高达151.0mg,发酵过程中pH值的变化比较缓和,相对摇瓶生长,发酵生产可获得更多的灵芝多糖。     

灵芝多糖拌种对小麦抗纹枯病的诱导效应及生长发育影响

【目的】真菌多糖能够调节作物生长,激活植株的防御反应,诱导植株对植物真菌和病毒病害产生抗性,具有广谱性和持效性的特点。通过灵芝多糖拌种的方式,研究灵芝多糖对小麦抗纹枯病的诱导效应及对生长发育的影响。【方法】选用纹枯病高感小麦品种济麦22、中感品种山农23、中抗品种鲁原502,采用室内盆栽的方法每盆混入20 mL相同浓度的纹枯病菌培养液,使用4、8 g a.i./100 kg种子剂量的灵芝多糖进行拌种,用清水处理作为对照组。通过调查植株病情指数,计算相对防治效果以评价灵芝多糖对小麦抗纹枯病的诱导效果,并从叶绿素和丙二醛（MDA）含量、防御酶活性的角度评价其诱导抗性的作用机制。同时测定使用清水和4、8 g a.i./100 kg种子剂量的灵芝多糖进行拌种后各处理的发芽率、株高以及根系活力等生长指标。【结果】小麦纹枯病高感品种济麦22、中感品种山农23、中抗品种鲁原502经灵芝多糖拌种后,小麦的生长发育、小麦抗纹枯病的效果以及小麦体内防御酶活性和MDA的含量等各项指标具有相同的趋势。灵芝多糖拌种对小麦生长指标具有一定的促进作用,4、8 g a.i./100 kg种子剂量的灵芝多糖拌种济麦22的发芽势分别为53.50%和52.75%,显著高于空白对照。在小麦出苗7 d后,经4、8 g a.i./100 kg种子剂量的灵芝多糖处理的3个小麦品种的株高均显著高于对照,并且处理剂量越高,诱导效果越明显。灵芝多糖拌种能够显著提高小麦的根系活力和叶绿素含量,同样处理剂量越高,诱导效果越明显,8 g a.i./100 kg种子剂量灵芝多糖拌种后,济麦22根系活力为0.26 mg·g^-1·h^-1,是空白对照的2.77倍;济麦22的叶绿素a、b含量分别为1.96、0.96 mg·g^-1,是空白对照的1.52、1.44倍。灵芝多糖拌种可以对小麦纹枯病产生一定的防控效果,以高感品种济麦22为例,8 g a.i./100 kg种子剂量的灵芝多糖拌种在小麦完全出苗后7、14和21 d对小麦纹枯病的防效分别为33.7%、31.9%和30.4%。同时,小麦叶片防御酶活性明显上升,MDA含量下降。8 g a.i./100 kg种子剂量灵芝多糖拌种后,济麦22苯丙氨酸解氨酶（PAL）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）的活性分别为60.72 U·min^-1·g^-1 FW、2.45 U·g^-1 FW、135.67 U·min^-1·g^-1 FW,分别是空白对照的1.10、1.32、1.13倍。MDA含量为1.48 μmol·g^-1,比对照组降低26.1%。【结论】灵芝多糖拌种对小麦种子发芽和植株幼苗的生长具有一定的促进作用,增加小麦体内叶绿素的含量,增强根系活力,能够诱导小麦植株抗纹枯病,提高小麦叶片防御酶的活性,降低MDA的含量。