柑橘抗CTV转基因与分子标记研究进展

综述了柑橘抗衰退病基因工程中两方面的研究进展。介绍多种来源于柑橘衰退病毒(Citrustriztezavirus,CTV)核酸序列的转基因柑橘和抗性种质资源中抗性基因的分子标记,以及所涉及的方法和遇到的问题。目前研究表明,虽然已成功实现对病毒衣壳蛋白(CP)等基因的转化和Ctv等抗性基因的标记,但尚未获得对CTV有高度抗性的转基因柑橘,而抗性基因亦不能实现定点克隆和转化。因此上述两方面研究还有待深入。     

组织培养条件下苹果Ty1-copia类逆转座子的转录活性

研究了苹果基因组中Tyl—copia类逆转座子的转录活性、多样性及其甲基化水平。在培养基MS＋2，4-D2mg／L＋BA0．2mg／L＋NAA0．5mg／L上诱导了1个月的愈伤组织中用RT—PCR方法检测到了270bp的目的条带，而对照、继代组培苗和不含2，4-D的愈伤中均没有目的条带的扩增，说明一定浓度的2，4-D可以诱导苹果中Tyl—copia类逆转座子的表达活性。将目的条带回收、克隆和测序后进行分析：所克隆的21条序列虽都为Tyl-copia类逆转座子逆转录酶保守序列，但存在很大的异质性，21个克隆的核甘酸序列变化范围为196—290bp；翻译成氨基酸后存在缺失、插入、移框和终止密码子突变，7个克隆在氨基酸保守序列‘SLYGLKQ’处有1—2氨基酸位点的突变，说明这些序列对应的逆转录酶多数可能已失去了其原有功能。将21条序列进行聚类分析，除ART20外，其它克隆可聚为3类，并分别与GenBank上某些物种的相应序列同源性很高，表明在不同物种间可能存在逆转座子的横向传递作用。甲基化试验表明苹果基因组内Tyl-copia类逆转座子甲基化水平高。这些都表明Tyl-copia类逆转座子对苹果基因型的多样性及基因组的进化具有重要意义。     

荔枝生产相关的水分生理指标远程监测研究

利用植物远程监测系统对荔枝园中的大气温湿度、土壤湿度、光照强度、大气蒸汽压差(VPD)等环境因子和茎干直径微变化、果实生长、叶片温度等树体生理指标进行了监测,发现该系统能准确及时并无伤害地记录他们的实时和周期性变化。据获得的数据初步表明,当果实处于快速膨大期,主茎的加粗生长明显缓慢,一旦果实采收后,茎干加粗生长则有一个迅速上升的变化;当土壤湿度高于33%(v/v)时,主茎的生长受到明显的抑制;VPD白天上升,夜间下降,当夜间VPD始终高于0,就形成所谓的“夜间干燥”,VPD的这种变化对荔枝主茎和果实的生长以及叶气温差(LATD)都有较大的影响,如主茎和果实的日间收缩量随VPD的增大而增大,夜间空气干燥不但抑制了主茎生长,也使日最大LATD下降。据此认为,果实和茎干的生长之间存在竞争关系,土壤湿度过高或者夜间空气干燥对荔枝的生长不利。     

从甜瓜子叶中提取总DNA

用分子标记方法检测甜瓜杂交种子纯度,如果从真叶中提取DNA,检测周期至少需要15d。为了缩短检测周期,我们分别以甜瓜的成熟干种子、吸胀水后“露白”种子、3d龄刚转绿子叶、6d龄子叶、9d龄子叶和12d龄子叶为材料,进行了提取总DNA的研究。结果表明:除了干种子和吸胀水后“露白”种子外,其他的材料都可以提取到DNA,但是DNA的质量因子叶日龄不同而存在很大的差异。不同日龄的子叶中,以3d龄子叶提取的DNA质量好。子叶6d龄时,提取的DNA质量次于3d龄,少量DNA开始出现降解,以后随着子叶日龄的增加,DNA降解加重。另外,与以真叶为材料提取的DNA样品相比较,子叶DNA样品中的蛋白质等杂质含量高,应增加氯仿抽提纯化次数。     

粤优丝瓜的选育

粤优丝瓜是以汕头丝瓜自交系D2为母本,以雅岗丝瓜自交系S12为父本配制而成的一代杂种。早熟,植株生长势及分枝力强,坐果率高,果实棍棒形,匀称,皮色绿白,瓜纵径49.0cm、横径4.8cm,肉厚0.77cm,单瓜质量0.33kg,味清甜,每667m2产量2000~2500kg。抗枯萎病,高抗疫病,耐霜霉病,适宜广东省春秋种植。     

硬肉大果型番茄新品种合作905的选育

合作905番茄是以89-336为母本,以76-5-15为父本配制的一代杂种。无限生长类型,中熟,红果、硬肉,果实圆形,VC含量109.4mg·kg-1,可溶性总糖2.44%,有机酸0.50%,可溶性固形物4.9%。耐贮运,常温货架期30d(天)不变质,抗ToMV、叶霉病。每667m2产量6000kg左右,全国各地保护地、露地均可栽培。     

早熟西瓜新品种大宝的选育

大宝西瓜是以347为母本,355为父本配制的一代杂种,早熟,生长势中等,主蔓第7～8节着生第1雌花。全生育期93d(天)左右,果实发育期28～30d(天),果实椭圆形,果形指数1.3左右,单瓜质量3～4kg。果皮墨绿色,厚0.8～1.0cm,有白霜,坚韧,耐运输。果肉红色,口感好,中心含糖量9.5%～10.0%,最高可达11.0%。中抗枯萎病,适于华北地区早春保护地或露地早熟栽培,每667m2产量2500kg左右。     

黄瓜新品种津优12号的选育

用优良自交系Q12作母本,F51作父本配制的一代杂种津优12号,植株生长势中等,叶色深绿,瓜条顺直,长棒状,长35 cm左右;单瓜质量200g左右,瓜色深绿,有光泽,瘤显著,密生白刺,果肉淡绿色,质脆,味甜,畸形瓜率低;春季主蔓第1雌花着生在第4节左右,雌花节率高.春露地栽培产量可达5 500kg·(667m2)-1左右,秋大棚栽培产量4 200kg·(667 m2)-1.抗枯萎病、霜霉病、白粉病和CMV.适宜华北、东北、西北地区春露地和秋大棚栽培.     

夏秋萝卜新品种丰玉一代的选育

丰玉一代是以雄性不育系4-04A为母本，S30—1为父本配制的一代杂种，属夏秋萝卜类型，生育期70～75d（天），肉质根圆柱形，长25—30cm，粗8—10cm，皮色全白，表皮光滑，含水量适中，肉质细密脆嫩，单根质量1，0—1．5kg。每667m^2产量2500kg左右，适宜山西省夏秋季种植。     

极早熟大白菜新品种豫新50的选育

采用游离小孢子培养双单倍体技术快速育成早熟大白菜杂交一代新品种豫新50。结果表明:豫新50为极早熟耐热品种,从播种到采收50-56d,高抗病毒病和软腐病,抗霜霉病;平均667m2产净菜2716.87kg,株形紧凑,适宜密植;叶球矮桩叠抱,整齐度高,商品性好;质地柔嫩,风味佳,每100g鲜样含粗蛋白质1.19g,粗纤维0.40g,维生素C20.8mg,可溶性糖2.80g。