中药材贝母DNA不同提取方法的比较

目的探讨中药材贝母DNA的不同提取方法,为中药贝母的分子生物学鉴定提供参考.方法利用苯酚法、CTAB法、SDS法从中药贝母中提取DNA,通过紫外分光光度和琼脂糖凝胶电泳对所得DNA样品含量及纯度进行检测.结果利用3种不同的方法提取,药材贝母DNA的A260/A280在1.80±0.23左右.结论利用3种不同DNA提取方法,均可从贝母样本中提取得到DNA,且CTAB法提取贝母的DNA含量高、纯度好.     

融雪时间对川贝母生长的影响

为了探讨融雪时间对川贝母种子、鳞茎及幼苗发芽生长的影响,在青藏高原东部的高山雪场观察了早融、中融、晚融3个不同融雪时间发生部位上川贝母种子和鳞茎的个体重量、种子数量、种子萌发率及幼苗第一片叶的长度,并对不同融雪部位生长的植株进行了比较.结果表明,随着融雪时间的推迟,川贝母的单花种子数和种子重量逐渐增加,和早融部位生长的植株相比,晚融部位生长的植株单花种子数和种子重量分别增加了40.3％和24.6％;但是鳞茎的重量表现出了相反的趋势,和早融部位生长的植株相比,晚融部位生长的植株鳞茎重量降低了22.4％.另外,川贝母的种子大小对幼苗的萌发率没有显著的影响,但对幼苗的第一片叶子长度有明显的影响,和早融部位生长的植株相比,晚融部位生长的植株第一片叶子长度增加了41.6％.说明晚融的积雪有利于川贝母种子产量的提高,而早融的积雪有利于鳞茎的生长.     

平贝母体细胞胚胎发生早期核酸和蛋白质合成动态的研究

在长期平贝母(Frifiiavia ussuviensis Maxim)组织培养中,建立比较稳定的体细胞胚胎发生体系,应用放射性同位素~3H 的液体闪烁技术测得,体细胞胚 RNA、蛋白质和 DNA 合成分别在诱导培养第5,7,8b 达到高峰。组织细胞学观察表明,体细胞胚胎发生早期的核酸与蛋白质合成的变化与愈伤组织中细胞的胚性化和胚性细胞的增殖相关。     

川贝母多倍体诱导条件的优化及含量测定

采用正交试验法考察秋水仙素浓度、浸泡时间、二甲基亚砜体积分数、处理温度对川贝母(Fritillaria cirrhosa)愈伤组织多倍体诱导的影响.以多倍体诱导率为指标,用正交试验表L9(34)进行试验,筛选最佳诱导条件.在考察的因素中,对川贝母多倍体诱导率影响的大小次序依次为秋水仙素浓度＞浸泡时间＞二甲基亚砜体积分数＞处理温度.多倍体诱导条件的最优组合是秋水仙素浓度为900 mg/L、浸泡时间为48h、二甲基亚砜体积分数为4％、处理温度为20℃,在此条件下,其诱导率可达94.3％;细胞染色体鉴定结果为四倍体染色体数为2n=4x=48,诱导后的愈伤组织为多倍体;对野生、组培二倍体、组培多倍体川贝母鳞茎进行有效药用成分生物碱总含量测定,其中组培多倍体生物碱总含量最高为0.657％.     

平贝母愈伤组织和不定芽诱导研究

目的应用组织培养技术对平贝母进行离体培养,从而得到愈伤组织和不定芽。方法以鳞茎为材料诱导愈伤组织与不定芽,采用正交实验设计确定最佳的激素种类与浓度。结果适当的激素组合及配比可诱导出愈伤组织和不定芽,最高的诱导率可分别达到14%以上、86.7%。结论愈伤组织最佳诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.9mg/L+NAA 0.5mg/L;最佳继代培养基为MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA 0.3mg/L;不定芽最佳诱导培养基为MS+KT 0.8mg/L+NAA 0.3mg/L。     

濒危植物暗紫贝母的开花物候和传粉方式

暗紫贝母(Fritillaria unibracteata)是药材川贝母的基原植物之一,属国家二级保护植物。以自然授粉为对照,采用观察和7种花器操作对漳县荒坡地驯化栽培暗紫贝母开花物候和传粉方式进行了研究,旨在揭示其传粉结实特性,探寻繁种策略,为野生驯化扩繁提供科学依据。结果表明:仿野生农田环境条件下,暗紫贝母株型多样化趋势明显,2013年采用鳞茎播种的暗紫贝母次年3月下旬返青,返青株以单叶株为主,多叶株少量,开花株稀少。随栽培年限延长,多叶株和开花株比率提高,单株开花数增多。开花株5月上旬现蕾,下旬进入盛花期,6月中旬蒴果成形,7月中下旬种子成熟倒苗,花蕾期茎叶持续生长,株高10.18~19.26cm。自然结实率75.0%,去雄套纸袋不结实,人工异交率80%以上,自然异交率70%,自交率低于30%,单果结种子(110±22)粒,百粒鲜重(94.53±53.62)mg。访花昆虫有蜂类、蝇类、蜘蛛和蚂蚁等。说明这种小株植物不存在无融合生殖现象,属异花授粉类型,部分自交亲和,传粉媒介以虫媒为主,风媒为辅,暗紫贝母特有的物候、株形多样化和传粉特性是其长期适应高寒恶劣多变环境的结果。     

甘肃贝母生物量和营养物质生殖分配研究

为了明确甘肃贝母（Fritillaria przewalskii Maxim.）生殖分配随不同物候期的分配规律,以人工栽植6年生及以上处于生殖生长阶段的甘肃贝母植株为试验材料,在各物候期测定植株各器官生物量和营养元素生殖分配。结果表明：甘肃贝母在各物候期的生殖分配分别为13.2%,7.2%,10.1%,10.3%;在整个生殖生长阶段,生殖器官表型可塑性呈现出先减弱后增大趋势;氮和磷元素在生殖器官中的组成百分比在盛花期较现蕾期显著降低,随果实的生长,在果实成熟期显著大于盛花期,而钾元素在整个生殖生长期间保持相对稳定的状态。综合分析表明甘肃贝母种群对有性生殖投资的比例较小,大部分用于营养生长,其有性生殖是各器官生物量积累和消耗各器官营养元素主要保证鳞茎正常生长的过程。     

甘肃贝母种子灌浆特性研究

选用5年生甘肃贝母种株,在盛花期挂牌标记开花一致的植株,从开花后第5天开始测定籽粒千粒鲜、干重和含水量,对种子灌浆特性进行研究,旨在为其种子标准化采收提供理论和技术依据。结果表明,甘肃贝母种子千粒鲜重在开花后66d达到最大,随后迅速下降到接近干重的水平。籽粒干重变化的趋势呈“S”型曲线,符合Logistic方程,快增期在花后41～66d,至花后97d灌浆结束。灌浆速率呈“快-慢-快-慢”规律,因降水出现1次低谷,籽粒脱水速率随灌浆进程而加快,含水量持续下降,籽粒含水量下降最快的时期为灌浆高峰结束期。籽粒干重与脱水速率和灌浆持续期均呈极显著正相关,而与籽粒含水量呈极显著负相关。甘肃贝母种子灌浆速率受天气的影响大,籽粒脱水加快、干重趋于稳定是种子成熟的标志,采收期应在花后77～82d(7月底-8月初),种果尚未开裂,种子含水率在40%以下,茎杆尚未完全枯黄时为最佳。     

不同表型平贝母有效成分含量的比较

[目的]比较不同表现类型平贝母的有效成分总生物碱的含量差别,为育种提供依据。[方法]采用超声法提取法提取平贝母中的总生物碱,并采用比色法测定其含量。[结果]平贝母常见的绿茎绿叶品系的总生物碱含量为0.170 3%,紫茎紫叶和紫茎绿叶分别为0.180 7%和0.183 0%。[结论]不同表现类型平贝母在总生物碱含量上没在明显差异。     

A new alkaloid from Fritillaria ussuriensis Maxim

Pingbeimunone A (1), a new compound, together with the known ussuriedine (2), benzo[7,8]fluoreno[2,1-b]quinolizine cevane-3,6,16,20-tetrol (3), ebeiedinone (4), pingbeimine C (5) and verticine (6) were isolated from Fritillaria ussuriensis. The structure was elucidated on the basis of spectral analysis (IR, NMR and MS spectroscopy). In addition, their AChE inhibitory activities were also tested.