NPY、TSH-β、CaBP-28K基因在鸭繁殖期组织中的表达水平分析

本研究对繁殖期高邮鸭神经肽Y(NPY)、促甲状腺激素β(TSH-β)、钙结合蛋白-D28K(CaBP-28K)基因在中枢神经组织和周围组织表达量进行了实时荧光定量分析。结果表明:NPY基因在下丘脑中表达量显著高于在垂体和在小肠中的表达量(P<0.05),在卵巢、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胰腺、子宫、胸肌、腿肌等9个部位呈痕量表达;TSH-β基因在垂体、小肠中表达量较高,显著高于其他组织(P<0.05);CaBP-28K基因在小肠表达量最多,其次是卵巢和肾脏,但均显著大于垂体中表达量(P<0.05),在其他测定部位呈痕量表达,就生殖轴而言,CaBP-28KmRNA的表达量表现为卵巢>垂体>下丘脑。本研究为了解高邮鸭繁殖期相关基因的表达特征和内分泌机制,指导高邮鸭选种选育提供了理论依据。     

中国监利猪PRLRFSHβ基因的多态性及其与繁殖性能相关性初步分析

采用PCR-RFLP技术,分析了监利猪PRLR基因和FSHβ基因的多态性及其与繁殖性能的关系。结果表明：PRLR基因在监利猪上只检测到AB和BB基因型,基因型频率分别为0．333和0．667,等位基因A、B频率分别是0．167和0．834：FSHβ基因在监利猪也只检测到AA、BB两种基因型,等位基因A、B频率分别为0．861和0．139,与以前的研究相似,中国地方猪种具有较高的A基因频率。从初步统计分析产仔数结果可以看出,监利猪具有较高的产仔数,经产产仔数达到12．33头／胎。FSHβ基因型分布特征暗示监利猪可能具有较好的繁殖性能,是具有较好开发应用价值的地方品种。     

PVP和17β-E2对牛卵泡卵母细胞体外成熟和体外受精的影响

在黄牛和水牛卵母细胞成熟培养液中用0.3%PVP代替10%FBS,卵母细胞的体外成熟率和受精率无显著差异(P>0.05),结果表明,在成熟培养液中用0.3%PVP代替10%FBS是可行的;在黄牛(或水牛)卵母细胞成熟培养液中添加17β-E2时,卵母细胞的体外成熟率和受精率都显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)的高于不添加17β-E2组,试验结果表明,17β-E2对牛卵母细胞的成熟和受精是必要的.同时,本试验对现行的黄牛和黑白花牛体外受精程序应用于水牛体外受精的可行性进行了探讨,结果显示,虽然水牛卵母细胞在体外培养可成熟和受精,但是在同一处理下,水牛卵母细胞的成熟率和受精率都显著(P<0.05)或极显著(P< 0.01)低于黄牛和黑白花牛,这表明,利用现行的黄牛体外受精程序进行水牛的体外受精是有效、可行的,但可能所用的精液或受精过程的某些步骤不太适合水牛卵母细胞,还需进一步改进.     

环糊精修饰的氟苯尼考PLGA纳米粒的制备及其体外释放评价

制备了环糊精修饰的氟苯尼考PLGA纳米粒(FF-2-HP-β-CD-PLGA NPs),筛选出其最优处方并进行评价。采用乳化溶剂挥发法制备FF-2-HP-β-CD-PLGA NPs,通过单因素考察,以乳化剂浓度、药脂比、药物浓度和2-HP-β-CD浓度为考察因素,包封率为考察指标,正交试验筛选最优处方,并对其进行体外释放试验。结果表明,制备FF-2-HP-β-CD-PLGA NPs的最佳工艺为PVA浓度2%,药物与PLGA用量比1∶15,药物浓度2.0 mg·mL^-1,2-HP-β-CD浓度为1.5%。测得平均包封率为(82.02±0.82)%,处方的重现性较好且工艺稳定可行。在体外药物释放试验中,FF-2-HP-β-CD-PLGA NPs释放速率明显较FF慢且平稳(P<0.05),后期可持续平稳释放至72 h,累积释放率为(82.08±1.71)%。结论表明,制备的FF-2-HP-β-CD-PLGA NPs具有较高的包封率,体外释药具有缓释行为。     

米猪与大白猪、长白猪FSHβ基因多态性分布差异分析

采用PCR方法对FSHβ基因在中国地方猪种米猪和外种猪大白、长白这2种群体共193头母猪中的多态性分布进行分析。结果显示:2群体均有2个等位基因A和B,3个基因型AA、AB和BB。米猪各种基因型数量AA型>AB型>BB型,AA型为其优势基因型,等位基因A、B的频率分别为0.841 5、0.158 5。外种猪BB型>AB型>AA型,BB型为其优势基因型,等位基因A、B的频率分别为0.108 1、0.891 9。由此可见,中国地方猪种米猪与外种猪长白猪和大白猪的FSHβ基因多态性分布上有显著差异。     

低聚乳果糖的酶法制备研究进展

低聚乳果糖是一种功能性低聚糖是双歧杆菌的有效增殖因子。具有增殖细菌、低热量、低龋齿、降低血液中的胆固醇、改善血脂、促进钙吸收等特殊的生理功能。低聚乳果糖是以乳糖和蔗糖（1：1）为原料,在节杆菌产的β-呋喃果糖苷酶（EC3．2．1．26）催化作用下生成半乳糖基蔗糖即低聚乳果糖。利用微生物来源的β-呋喃果糖苷酶制备低聚乳果糖具有成本低、稳定性高＼提取方便等特点。不同微生物来源的β-呋喃果糖苷酶具有不同的性质,目前应用比较广泛的是节杆菌产的β-呋喃果糖苷酶。国内对低聚乳果糖做了初步研究,还没有工业化生产的报道,因其具有广阔的应用前景。文章综述了低聚乳果糖的性质、制备、分离、检测及其在饲料、食品、医学等方面的应用。     

山羊BLG基因侧翼区的克隆及序列分析

克隆奶山羊β-乳球蛋白基因5′、3′调控区并对其进行序列分析。从徐淮奶山羊组织中提取基因组DNA,采用高保真长模板PCR法克隆得到山羊β-乳球蛋白基因4.2 kb的5′调控区和1.8 kb的3′调控区。将纯化后的PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体中,经酶切鉴定和序列测定验证克隆的正确性。部分序列分析表明,5′区与GenBank中登录的山羊和绵羊BLG基因5′区同源性分别为100%和95%;3′区同源性则分别为99%和93%。克隆得到的奶山羊BLG调控区与山羊BLG伪基因显著不同,5′区和3′区同源性分别为83%和88%。结果表明,克隆得到的奶山羊BLG调控区可用于构建乳腺特异性表达载体,为指导外源基因在转基因动物乳腺中的高效表达奠定了基础。     

家蚕G蛋白γ1亚基(BmGγ1)的克隆及其谷胱甘肽硫转移酶融合蛋白的表达与纯化

异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导。为了研究家蚕体内G蛋白的生理功能及其作用机制,运用生物信息学方法预测了家蚕G蛋白γ1亚基(Gγ1)的序列,设计引物验证预测序列后,克隆了家蚕Gγ1的序列,再通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+)后,导入E.coliBL21宿主菌中,经异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组谷胱甘肽硫转移酶(glutathione s-transferase,GST)融合蛋白,并亲和层析纯化表达产物。家蚕Gγ1重组GST融合蛋白经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,在分子质量约36 kD处出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白,说明已经成功克隆到家蚕Gγ1基因,并在E.coliBL21中高效表达。     

不同能量水平对母羊繁殖性能的影响

在高、中、低(18.99、14.48、8.81MJ/d)3个不同能量水平饲养条件下,对36只杂交母羊(萨福克♂×小尾寒羊♀)的体重变化,黄体数及激素FSH、LH分泌情况进行了研究分析。结果表明:高能量组的试验羊平均日增重比低能组和中等能量组分别提高235.5g(/(只·d)(P<0.05)、70.6g(/只·d)(P<0.05),黄体数分别增加81.3%(P<0.05)、43%(P>0.05)。同时,低能量组FSH、LH激素水平高于中等能量和高能量组,说明日粮能量水平影响母羊卵泡发育,排卵及黄体形成。     

文昌鸡促卵泡激素β基因内含子1的SNP分析及其与早期产蛋性能的相关性研究

以109只海南文昌鸡为试验动物,利用PCR-SSCP技术检测了促卵泡激素(follicle-stimulating hormone β,FSHβ)基因的多态性,在其内含子1区域内发现了1个SNP,在群体中检测出2种基因型:AA、AB。将不同基因型个体与产蛋数、畸形蛋数、体重和开产日龄等进行了关联分析。结果表明,AA基因型鸡个体的产蛋数比AB基因型个体多9.54枚,畸形蛋数比AB基因型个体少1.54枚,开产日龄比AB基因型个体早2.97 d,且差异均不显著(P＞0.05)。22~26、27~30和31~34周龄的AA基因型鸡的产蛋量显著高于AB基因型(P＜0.05),而18~21和35~39周龄的AA基因型鸡的产蛋量也明显高于AB基因型,但差异不显著(P＞0.05)。AA基因型鸡6、8、14、20周龄的体重高于AB基因型个体,AA基因型个体18周龄的体重却低于AB基因型个体,差异均不显著(P＞0.05)。总体而言,FSHβ基因位点的A等位基因对产蛋数、畸形蛋数、体重和开产日龄的影响均未达到差异显著水平。