基因型和外植体对小麦离体培养的影响

为建立适合小麦遗传转化的高效离体培养体系,本实验用14个优良小麦新品种(品系)为材料,对不同基因型的小麦进行幼胚离体培养研究,通过培养基激素的变化,寻找最适合遗传转化的基因型及培养基成分;结果表明:不同基因型间差异显著,其中09P200和SH905在小麦离体培养中反应较好,幼胚愈伤组织绿原基分化率和出苗率显著高于其他基因型,可作为幼胚培养和转基因受体材料的优良基因型,在分化培养基中添加100mg/L水解酪蛋白、100mg/L脯氨酸和2.0mg/LKT对愈伤组织诱导分化及成苗效果较好,所有供试基因绿原基分化率、成苗率平均分别为31.93%和14.42%;另外采用4个不同基因型的小麦幼胚和成熟胚为外植体,通过继代次数的改变,筛选各外植体最适合遗传转化的培养条件;结果表明幼胚继代两次、成熟胚继代三次可以获得相对理想的绿原基分化率,且此时的愈伤组织是遗传转化较理想的受体材料。     

沈氏栎组培快繁技术的初步研究

[目的]对沈氏栎组培快繁技术进行初步研究,以期为该物种的快速繁殖和优良性状的保持奠定基础。[方法]以引自北美的沈氏栎(Quercus shumardi'Shumard Oak')为试验材料,从外植体接种试验、试管苗的增殖与生根等技术环节进行了探索,研究沈氏栎瓶内培养技术体系。[结果]用作外植体的理想材料为带腋芽茎段;最佳灭菌方式是用75%的酒精消毒1 min后再用0.1%升汞消毒6 min;试管苗增殖(诱导丛生芽)的最佳培养基为MS+6-BA 0.80 mg/L+NAA 0.45 mg/L;诱导生根的最佳培养基组合为1/2 MS+NAA 0.40mg/L;瓶苗培养的理想温度为26～28℃。[结论]该研究初步建立了沈氏栎瓶内培养技术体系,同时为该物种的快速繁殖和优良性状的保持奠定基础。     

不同种（品种）三叶草愈伤组织诱导及分化影响因素研究

以9个三叶草品种的上胚轴、下胚轴、叶片和子叶为外植体,研究了影响三叶草愈伤组织诱导和再分化的主要因素。结果表明,不同品种不同外植体愈伤诱导率差异较大,下胚轴为较适宜的外植体,其平均愈伤组织诱导率和愈伤分化率为97％和10．3％,改良SH＋2,4-D8．0mg／L＋6-BA0．2mg／L＋KT0．2mg／L为最佳胚性愈伤组织诱导培养基,所形成的愈伤组织的愈伤分化率也最高。     

不同银杏外植体器官的分化

以银杏无菌苗带芽的茎段、幼叶,成熟胚的子叶、根段,雌、雄株嫩茎、雄花粉等为外植体,研究了它们在不同培养上的器官分化情况。结果表明,无菌幼苗茎段可以诱导出双芽体,雌、雄株的当年生嫩茎可以诱导出双芽体或3芽体,不定芽的发生为直接再生;子叶在MS NAA1.0mg/L KT2.0mg/L培养基上诱导出2个不定芽,小苗可长至2.0cm。另外有些子叶在切口基部产生白不定根。30d叶龄的无菌幼苗叶片在MS NAA1.0mg/L BA1.0mg/L或MS NAA1.0mg/L KT0.5mg/L上,有直接发生不定根现象,最高生根率达40%;雄花粉也有不定根的发生。     

苜蓿体细胞胚发生的影响因素

在组织培养过程中诱导苜蓿体细胞胚发生的关键因素有两个：一是植物材料，包括基因型和外植体类型；二是培养基成分。研究结果认为：紫花苜蓿体细胞胚发生能力较强，无菌苗子叶和下胚轴是发生率较高的外植体；2．0mg／L的2,4-D补加适宜浓度的NAA、KT和BA等激素是相对平衡的激素组合，也是必需的。添加一些有机物有利于提高体细胞胚发生率。     

含内生菌外植体红掌组培方法的研究

为了解决组织培养中组织内部带菌的问题,以组织内部带菌的红掌为外植体,采用含有40%的次氯酸钠水溶液消毒10min,然后分别接种到各种含不同浓度的抗生素的培养基上,经过2～3次继代培养后发现:外植体在含有500mg/L的羧苄青霉素、100mg/L硫酸链霉素和1000mg/L的制霉菌素的培养基上生长正常,组织内部所带细菌和真菌得到了较好的抑制和消除。     

4个多用途萱草品种离体快繁体系的建立

[目的]建立4个多用途萱草品种的离体快繁体系.[方法]以4个多用途萱草品种为试材,研究消毒时间对不同外植体的影响,以及不同激素配比的培养基对愈伤组织、增殖培养和生根培养的影响.[结果]消毒时间以10 min最佳,花茎是萱草组织培养的最佳外植体;愈伤组织诱导的最佳培养基为：MS＋ 1.5 mg/L 6-BA ＋0.2 mg/L IBA;在增殖培养中,MS＋ 1.5 mg/L 6-BA＋ 0.2 mg/L IBA为最佳增殖培养基.1/2MS ＋0.3 mg/L IBA和1/2MS＋ 0.3 mg/L NAA培养基为4个品种的最佳生根培养基.[结论]该方法建立了4个多用途萱草品种的离体快繁体系,为萱草的种质资源栽培提供了理论依据.     

药用植物刺五加组织培养关键技术的研究

刺五加为五加科植物刺五加[AcanthopanaxSenticosus(Rupr.etMaxim./farms)]的根及根茎。含有各种刺五加甙。近年来新的研究进展表明:刺五加能有效地抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老,并对心血管有很好的保护作用,还能提高免疫力,是极其珍贵的药物资源。就目前临床供药而言,主要从刺五加根和茎中提取。资源消耗与日俱增,已使刺五加植物濒临灭绝的危险,为实现其永续利用,建立组织培养技术能在短期内繁殖大量苗木,对保护这一珍稀植物物种和合理开发利用这一药源具有重要的现实意义。选用刺五加的叶片、茎尖、当年生根为材料,研究了激素对刺五加愈伤组织继代培养、不定芽发生及生根的影响。结果表明:培养基中激素配比对刺五加愈伤组织的分化和诱导生根有很大影响。刺五加组织培养适宜的分化培养基为BZ NAA3.0 6-BA2.0,适宜的生根培养基为BZ IBA0.2。刺五加愈伤组织再分化能力主要受外植体类型及愈伤组织继代保存时间的长短影响。来源于叶片的愈伤组织的分化能力最强,愈伤组织经30d继代培养后,愈伤组织分化率达73.62%,再生芽分化系数为7.5,并随愈伤组织继代保存时间的延长,愈伤组织的分化能力逐渐降低。     

蚊净香草组织培养技术研究

以蚊净香草的叶片和茎段作为外植体,用0.1%的升汞作为消毒剂,通过试验拟找出最佳的消毒时间及适于外植体的诱导、增殖和生根的培养基。结果表明:0.1%的升汞对两种外植体的最佳消毒时间是5~7min,最适于诱导外植体产生愈伤组织和不定芽,以及不定芽的增殖和生根的培养基分别为:MS 6-BA0.5mg/L(单位下同) IAA0.1 NAA0.3、MS 6-BA0.25 IAA0.5、MS 6-BA0.05 NAA0.5 I-BA0.5。     

药用植物刺五加组织培养关键技术的研究

刺五加为五加科植物刺五加[Acanthopanax Senticosus（Rupr.et Maxim./farms）]的根及根茎。含有各种刺五加甙。近年来新的研究进展表明：刺五加能有效地抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老,并对心血管有很好的保护作用,还能提高免疫力,是极其珍贵的药物资源。就目前临床供药而言,主要从刺五加根和茎中提取。资源消耗与日俱增,已使刺五加植物濒临灭绝的危险,为实现其永续利用,建立组织培养技术能在短期内繁殖大量苗木,对保护这一珍稀植物物种和合理开发利用这一药源具有重要的现实意义。 选用刺五加的叶片、茎尖、当年生根为材料,研究了激素对刺五加愈伤组织继代培养、不定芽发生及生根的影响。结果表明：培养基中激素配比对刺五加愈伤组织的分化和诱导生根有很大影响。刺五加组织培养适宜的分化培养基为BZ+NAA3.0+6-BA2.0,适宜的生根培养基为BZ+IBA0.2。刺五加愈伤组织再分化能力主要受外植体类型及愈伤组织继代保存时间的长短影响。来源于叶片的愈伤组织的分化能力最强,愈伤组织经30d继代培养后,愈伤组织分化率达73.62%,再生芽分化系数为7.5,并随愈伤组织继代保存时间的延长,愈伤组织的分化能力逐渐降低。