SCoT标记技术鉴定湖南甜橙变异类型

[目的]根据SCoT多态性对湖南甜橙变异类型进行鉴定和分析。[方法]首先对SCoT反应体系进行优化,并筛选合适的引物,然后对24份试材进行SCoT标记,获得的目的片段克隆测序,通过测序结果探讨其遗传变异。[结果]甜橙SCoT标记的20μl优化反应体系为：DNA模板80ng,Mg2＋1.6mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,引物0.2μmol/L,TaqDNA聚合酶用量1.6U,扩增产物在100～2000bp,扩增条带明亮清晰,反应体系具有良好的稳定性和可重复性。24份试材的测序片段的大小为1090-1091bp,一致性达到99.84%,存在单碱基缺失与替换;利用单碱基变异可以区分其中的12个甜橙变异株系和‘安江香柚’。[结论]本研究将为甜橙的育种工作提供科学的理论依据。     

茶树cDNA-AFLP银染技术体系的建立

为了挖掘安白茶白化期相关的差异基因,建立并优化了茶树叶片cDNA-AFLP扩增反应体系,进行cDNA-AFLP分析。在安吉白茶叶片cDNA-AFLP的试验中,分别对20 μL预扩增和选择性扩增反应体系中的4种反应条件影响因子进行不同梯度优化的研究,包括引物、Mg2+、dNTP及Taq DNA聚合酶的用量。PCR预扩增20 μL反应体系中,引物75 ng/20 μL,Mg2+ 2.0 mM,dNTP 0.2 mM,Taq DNA聚合酶1 U时预扩增效果较好;PCR选择性扩增20 μL反应体系中,引物75 ng/20 μL,Mg2+ 2.5 mM,dNTP 0.2 mM,Taq DNA聚合酶1.5 U时选择性扩增效果较好。通过试验,获得较为理想的预扩增和选择性扩增体系。     

咖啡因生物合成研究进展及在茶树育种中的应用

咖啡因是一种嘌呤生物碱,存在于茶和咖啡中。由于咖啡因对一些人有引起失眠等的副作用,所以培育低咖啡因咖啡和茶树品种具有非常重要的意义。本综述了近年咖啡因生物合成与代谢的研究进展,包括相关酶的基因克隆等,并对培育脱咖啡因茶树可能的途径和存在问题进行了讨论。     

基于电子鼻和分光测色仪技术的茶树叶片氮营养诊断

【目的】利用电子鼻和分光测色仪建立一套快速检测茶树叶片氮含量的无损伤检测方法。【方法】供试样品为茶树顶芽向下第3~4片无损伤叶片。在预实验中优化了气体收集瓶体积、顶空预热温度和顶空时间等参数。采用电子鼻自带Winmuster软件将经过优化后的传感器响应特征值进行主成分分析(principal component analysis,PCA)、线性判别法分析(linear discriminant analysis,LDA)和负荷加载分析(loadings analysis,LA),筛选出灵敏性最好的传感器。同时用分光色差仪对茶树叶片色度值进行测定。样品的测量部位是叶肉区,每组20次重复。色度值主要包括L (表示黑白或者亮暗)、a (表示红绿)、b (表示黄蓝)值。采用Origin 8.0软件对测色仪L、a、b值分别进行一元线性回归分析。利用SPSS 16.0软件采用LSD法进行单因素方差分析(one-way Anova),并进行t检验。对分光测色仪中色差指标进行筛选,以获得相关系数最高的参数。采用凯氏定氮法测定茶叶总氮含量。正式试验第二步是以不同氮含量下的电子鼻和分光测色检测数据为基础,分别建立气味、颜色、气味结合颜色的3种氮含量预测模型,并进行比较分析。【结果】通过预备试验,建立了气体收集器体积为50 mL、顶空预热温度为30℃、顶空时间为30 min的电子鼻检测体系。正式试验第一步确定了以对氮氧化合物灵敏(S2),对甲烷灵敏(S6),对无机硫化物灵敏(S7),对醇类、醛类、酮类物质灵敏(S8),对有机硫化物灵敏(S9)的传感器为主要传感器。根据L、a、b表色系统,b值与叶片缺氮程度呈线性相关。正式试验第二步利用气味、颜色、气味结合颜色建立的3个氮含量预测模型都具有可行性,其中气味结合颜色建立的预测模型准确率最高,达到90%。【结论】用气味结合颜色的预测模型预测茶树叶片氮含量准确度较高,可在实际工作中进行运用。     

高效氯氟氰菊酯与三唑磷对荔枝蒂蛀虫的联合毒力及田间药效

采用浸渍法对三唑磷与高效氯氟氰菊酯混配对荔枝蒂蛀虫的联合毒力,测定共毒系数CTC为183.2～255.0,表现明显的增效作用.据此确定最佳配比,配制成增效混剂21%乳油进行防治荔枝蒂蛀虫的田间试验,结果表明药效良好,用量168～210mg/kg的护梢效果达81.65%～86.87%.虫口防效达85.05%～88.11%,与2.5%高效氯氟氰菊酯水乳剂相当,显著优于40%三唑磷乳油.     

茶树自交花粉管在活体花柱中的不亲和性观察

采用以苯胺蓝染色的荧光显微技术对茶树无性系品种龙井43活体花柱上(中)的自交和异交花粉(管)生长特性进行观察。结果发现,自交花粉可以在柱头上正常萌发生长;授粉后24h内自交与异交花粉管生长特性无明显差异,24h之后自交花粉管生长速度明显慢于异交,最后在花柱基部停止伸长,且伴随产生花粉管顶端形态异常,荧光异常明亮等不亲和(受抑制)现象。由此进一步证实茶树自交花粉管生长受抑制的形态学表现与植物配子体自交不亲和性类型特征相符合。     

白木香立枯病的病原鉴定及生物学特性

对白木香幼苗上发生的1种新病害进行了病原鉴定及生物学特性研究.结果表明:该病害为丝核菌属的立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kuhn)引起的立枯病.病原菌生长的最适宜温度为10～30℃,20～30℃;在查彼克琼脂培养基上生长最快,香石竹PDA培养基上产菌核最多;以可溶性淀粉为碳源,硫酸氨为氮源,有利于菌丝的生长:光照条件下比黑暗条件下菌丝生长好,但差异不明显.     

中华绒螯蟹溞状幼体在生态育苗池中的种群结构

 2001年4~6月对辽宁盘锦辽河三角洲地区中华绒螯蟹生态育苗试验池中的中华绒螯蟹溞状幼体的种群结构进行了研究。结果显示,Z₁~Z₅的变态率分别为(77.8±11.3)%,( 67.9±24.2)%,( 47.5±20.7)%, ( 51.1±32.9)% 和( 63.8±27.5)%; 中华绒螯蟹溞状幼体在池塘中主要集中在上风位,约占43.7%~65.6%,下风位则分布较少,为14.2%~20.1%;在垂直分布方面,Z₁~Z₄系底层>表层, Z₅则相反,表层>底层。中华绒螯蟹溞状幼体昼夜水平移动主要受风向的影响,有风时它们向上风位方向移动,无风时它们则在池塘中分布较为均匀。中华绒螯蟹溞状幼体昼夜垂直移动主要收光照的影响,白天它们主要分布在水体中下层,夜间弱光照或无光时,它们分布较均匀。     

香椿的试管繁殖技术

选取当年生半木质化、具腋芽的香椿茎段作为外植体,诱导腋芽萌发,进行芽苗增殖和生根培养。通过试验,筛选出了各阶段适宜的培养基组成及试管苗移栽条件。结果表明,香椿萌芽诱导中,M S基本培养基效果优于1/2M S;芽增殖阶段,适宜的培养基是M S 6-BA 0.2 m g/L GA32.0,有效增殖倍数为3.38;在1/2M S 1.0 m g/L IBA中,试管苗生根率最高,可达69%;适宜的移栽时间是3~7月初,移栽基质以蛭石或和沙为好。     

车八岭苗圃三种国家二级保护植物的菌根研究

报道了广东省车八岭国家级自然保护区苗圃中观光木（Ｔｓｏｏｎｇｉｏｄｅｎｄｒｏｎ ｏｄｏｒｕｍ）、伞花木（Ｅｕｒｙｃｏｒｍｂｕｓ ｃａｖａｌｅｒｉｅｉ）和伯乐树（Ｂｒｅｔｓｃｈｎｉｅｄｅｒａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）等３种国家二级保护苗木的菌根特点和根际土ＶＡ菌根孢子的主要类型。结果显示,３种植物均可与真全枝－泡囊型菌根（ｖｅｓｉｃｕｌａｒ－ａｒｂｕｓｃｕｌａｒ ｍｙｃｏｒｒｈｉｚａ）,菌根感染率分别为８