浙江种子植物2新记录种

报道了植物资源调查过程中发现的2种浙江地理分布新记录植物,分别为苦苣苔科Gesneriaceae的休宁小花苣苔Chiritopsis xiuningensis X. L. Liu X. H. Guo和小檗科Berberidaceae的黔岭淫羊霍Epimedium leptorrhizum Stearn,其中小花苣苔属Chiritopsis W. T. Wang为浙江分布新记录属。图1参２     

藿乌粉的提取工艺研究

为了优化藿乌粉的提取工艺,研究以乙醇浓度、固液比、提取时间、提取次数为影响因素,以2, 3, 5, 4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B含量以及干膏得率为评价指标,采用层次分析法(AHP)、基于指标相关性的权重确定方法(CRITIC)、AHP-CRITIC混合加权法确定各评价指标的权重系数,根据单因素和正交试验结果优化提取工艺参数。结果表明AHP-CRITIC混合加权法确定出的权重系数更为科学、合理,优选出的最佳提取工艺为12倍量60%乙醇提取2次,每次1.5 h。3次验证试验综合评分均值为89.69,RSD值为0.63%。优选出的藿乌粉提取工艺经验证稳定可行,重复性好,可用于藿乌粉的制备。     

淫羊藿植物DNA指纹图谱的构建

[目的]建立淫羊藿植物的DNA指纹图谱。[方法]对来自贵州、四川等的17种淫羊藿植物进行RAPD标记研究。[结果]从80个引物q-筛选出13个谱带清晰、多态性好的引物,共扩增得到263条谱带,多态性条带259条,多态性百分率为98．5％,建立了17种淫羊藿植物的DNA指纹图谱。[结论]每个物种均有各自特异的共有谱带、特有谱带、缺失谱带,这些谱带可用于淫羊藿的物种鉴定。     

淫羊藿对家兔离体小肠平滑肌生理特性的影响

[目的]观察淫羊藿苷对家兔离体小肠平滑肌收缩活动的影响。[方法]取家兔离体小肠（十二指肠）肠段,将其置于恒温平滑肌槽中,连接张力传感器,信号输入BL-420E生物机能实验系统,加入不同浓度的淫羊藿苷溶液,分别记录小肠平滑肌的收缩活动。结果不同浓度淫羊藿苷（10-4、10-3、10-2mol/L）对小肠平滑肌自发收缩活动有抑制作用,其收缩幅度变化值与用药前比较差异显著。[结论]淫羊藿苷对小肠平滑肌活动有抑制性影响。     

药用植物淫羊藿与富血小板血浆协同对软骨细胞的增殖作用

观察淫羊藿和富血小板血浆(PRP)对SD大鼠软骨细胞增殖作用的影响,探讨两者对软骨细胞的协同作用。取3周龄SD大鼠的膝关节软骨建立软骨细胞体外培养体系,分别采用MTT法、流式细胞术对细胞增殖作用进行检测。结果表明: (1) PRP对软骨细胞增殖有显著的促进作用(P<001);(2)淫羊藿对软骨细胞有一定的增殖作用,但不显著;(3)淫羊藿联合PRP对软骨细胞的增殖作用显著下降,效果低于淫羊藿或PRP组(P<001)。淫羊藿联合PRP对软骨细胞有显著抑制作用(P<001),推断淫羊藿某些成分抑制了PRP中生长因子的活性,从而减弱了PRP对软骨细胞的作用,该推断有待进一步研究确认。     

淫羊藿水提取物联合抗菌药对耐药大肠杆菌的体外抑制效果

【目的】探究淫羊藿水提取物联合抗菌药对耐药大肠杆菌的体外抑菌效果,为兽医临床中西联合用药提供参考依据,也为中药在抑制耐药菌株上的开发研究打下基础。【方法】采用二倍微量肉汤稀释法测定淫羊藿水提取物及各抗菌药对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC),然后以微量肉汤棋盘稀释法测定淫羊藿水提取物与抗菌药联用后的部分抑菌浓度指数(FICI)。【结果】淫羊藿水提取物与粘杆菌素、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻呋、阿莫西林、磷霉素、阿米卡星、氟苯尼考、乙酰甲喹、林可霉素联用后能有效降低药物的MIC,对应的MIC均降低4倍以上,联合用药的FICI分别为0.13、0.26、0.26、0.25、0.51、0.51、0.50、0.75、0.75和0.75,对产ESBLs大肠杆菌的抑制效果表现出协同或相加作用;以其联合诱导产ESBLs大肠杆菌传代,从第1代即能明显降低这些抗菌药的MIC,且稳定至第3代。【结论】淫羊藿水提取物与粘杆菌素、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻呋、阿莫西林、磷霉素、阿米卡星、氟苯尼考、乙酰甲喹、林可霉素联用是通过协同或相加作用而提高抗菌药对产ESBLs大肠杆菌的抑制效果,但不宜与磺胺类、喹诺酮类联合用药。     

高效液相色谱法测定新促孕液中淫羊藿甙的含量

通过流动相筛选和线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收试验和空白试验建立了淫羊藿甙的高效液相色谱法,并测定新促孕液中淫羊藿甙的含量.结果表明,甲醇-水为流动相在6:4时分离度最好,在色谱柱为Kromasil C 18、柱温为室温、流速1 ml/min、检测波长270 nm、进样量20μl的色谱条件下,测定方法稳定可行、精密度较高、线性关系和重复性良好;4批样品中淫羊藿甙的含量在0.106～0.124 mg/ml之间,因而可将含量下限定为0.1 mg/ml,作为控制新促孕液质量的指标之一.     

4种淫羊藿属植物开花结实现象的观测与分析

对淫羊藿属（Epimedium）植物4种106份移植材料的开花结实现象进行了系统观测和分析,记录其开花与结实现象的具体情况。结果表明：淫羊藿属植物移栽成活率高,其开花结实现象可以细分为始花期、盛花期、末花期和结实期4个时期,它们之间存在极显著的相关性;不同种类、同种不同来源的淫羊藿属植物在开花时间上存在一定的差异,但均以3月开花为主,3月中下旬开花的植株结实率高、种子饱满;不同种类淫羊藿属植物的开花期存在着一定的重叠,为淫羊藿属植物的杂交育种创造了条件。     

基于ITS 2序列的15种淫羊藿属药用植物分类鉴定研究

为探讨内转录间隔区2(ITS2)序列及其二级结构在15种淫羊藿属(Epimedium)中的鉴定效率。利用试剂盒提取叶片总DNA,对ITS2序列进行PCR扩展与测序,计算K2P遗传距离,构建系统发育树,预测其二级结构。结果表明,ITS2序列在15种淫羊藿属植物中的通用性好,扩增成功率与测序成功率均为100%。从K2P种间和种内遗传距离看,ITS2在淫羊藿属中的种间变异较小,部分种类种内遗传距离大于种间遗传距离,鉴定成功率约为60%。采用比对法(Blast)分析,ITS2鉴定效率为75%。由ITS2系统进化树可知,淫羊藿属与鬼臼属各为一支,易于分开。除薄叶淫羊藿、竹山淫羊藿、巫山淫羊藿外,其余种类均能较好的进行聚类;除粗毛淫羊藿、保靖淫羊藿外其余均不能与NCBI下载到的序列进行较好聚类。研究表明,15种淫羊藿属植物ITS2序列在ML系统进化树中具较好的鉴别能力,但淫羊藿属各样本种内与种间遗传较为混乱,遗传距离复杂,ITS2二级结构形态结构亦较为相似,将各种间进行区分存在一定难度,不适合单独作为该属条形码使用。     

In vitro shoot regeneration from immature seeds of Epimedium alpinum induced by thidiazuron and CPPU

In vitro propagation of Epimedium alpinum L. was carried out using immature seed explants. The effects of various concentrations of thidiazuron (TDZ) and 1-(2-chloro-4-pyridyl)-3-phenylurea (CPPU), on the induction of organogenic callus, were evaluated. Organogenesis occurred most efficiently when explants were transiently exposed (48 h) to 20 μM CPPU or 80 μM TDZ followed by culture on hormone-free woody-plant medium (WPM). Organogenic callus consisting of white, compact clumps of tissue proliferated slowly on hormone-free WPM. To promote adventitious shoot induction, the effects of different concentrations of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 6-benzyladenine (BA) were investigated. The highest per cent shoot regeneration, 66.7% of explants, and the maximum mean number of shoots, 2.6 per explant, were obtained on WPM containing 1.1 μM 2,4-D and 22 μM BA. Shoots were rooted on hormone-free WPM and well-developed plantlets were successfully transferred to soil.