鸡柔嫩艾美耳球虫三价DNA疫苗的构建及鉴定

[目的]构建含鸡柔嫩艾美耳球虫3-1E和CDPK抗原基因及鸡IFN-γ基因的三价DNA疫苗。[方法]应用SOE-PCR将3-1E、CD-PK和鸡IFN-γ共3个基因通过2个（GGGGS）3连接子相连,扩增出IFN-γ/3-1E/CDPK三价融合基因,将其克隆入真核表达载体proVAX中构建三价融合真核表达质粒proIEC,后用双酶切和PCR进行鉴定。阳性重组质粒提取纯化后体外转染PK-15细胞,通过间接免疫荧光技术检测目的基因在转染细胞中的表达情况。[结果]经双酶切和PCR鉴定证实鸡柔嫩艾美耳球虫三价DNA疫苗构建成功,且在PK-15细胞中获得了成功表达。[结论]鸡柔嫩艾美耳球虫IFN-γ/3-1E/CDPK三价DNA疫苗构建成功,为进一步探讨其免疫保护性奠定了基础。     

陕西省杨凌某羊场球虫种类调查及药物治疗试验

采用粪便漂浮法和卯囊培养法对杨凌某羊场道赛特绵羊的球虫感染情况进行了调查和初步鉴定，结果发现。道赛特绵羊体内存在8种艾美耳球虫，即小型艾美耳球虫、颗粒艾美耳球虫、槌形艾美耳球虫、巴库艾美耳球虫、错乱艾关耳球虫、阿撒他艾美耳球虫、绵羊艾美耳球虫、浮氏艾美耳球虫。感染强度平均为1778OPG。结合药物治疗对比试验，确定复方地克珠利对艾美耳球虫的防治有良好的效果。且其价格便宜、用药方便。     

堆型艾美耳球虫生物学特性研究进展

鸡球虫病是一种严重危害养禽业的寄生虫病,其中堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)对鸡致病力较强,在各地养鸡场流行率较高,严重感染时可引起死亡,对鸡的生长发育和饲料转化率有较明显的影响。本文对E.acervulina的流行状况、形态特征、致病性、免疫原性等相关研究进行了综述,为兽医临床有效防治E.acervulina提供理论依据。     

柔嫩艾美球虫SO7重组蛋白对巨型艾美球虫的免疫保护作用

将大肠杆菌中融合表达的柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)SO7重组蛋白,单独或以鸡重组γ-干扰素为佐剂,于5、12、19日龄对雏鸡进行3次免疫,同时设立E.tenella、巨型艾美球虫(E.maxima)口服卵囊免疫组、未免疫、未攻毒组和未免疫攻毒组作对照,于26日龄用E maxima进行攻毒,9 d后统计各组的相对增重率和卵囊减少率,探讨其对E.maxima的交叉保护作用.结果表明:重组蛋白免疫对增重的改善效果与E.maxima口服卵囊免疫组相差不大,γ-干扰素佐剂效应不明显.从卵囊减少率指标角度判断,口服卵囊免疫组效果最佳,为96.35%,重组蛋白免疫组为12.51%,γ-干扰素佐剂组为35.75%.重组SO7蛋白对E.maxima具有一定的交义免疫保护作用,γ-干扰素对SO7抗原的免疫保护效果具有一定的增强作用.     

温州地区家兔球虫病流行病学调查

为掌握温州地区家兔球虫病的流行情况,采用麦克马斯特虫卵计数法(McMasters method)和饱和盐水漂浮法,对采集的595份家兔粪便样品中兔球虫种类和感染情况进行调查分析。结果表明,温州地区兔球虫平均感染率达771%,全部为混合感染,感染球虫种类多为3～5种。各月龄段均有不同程度的感染,以1～3月龄幼兔感染率最高,达977%,多数呈中度或重度感染。调查共检出10种兔艾美耳球虫,以无残艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫、肠艾美耳球虫和大型艾美耳球虫为优势虫种。     

15株柔嫩艾美耳球虫Eimeria tenella对五种抗球虫药的抗药性调查研究

应用 AA 肉鸡,检测了采自我国12个省区的15株 Eimeria tenella 对5种抗球虫药的敏感性。根据最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量和病变记分减少率3项指标综合判定,对莫能霉素、氨丙啉、克球粉、氯苯胍和杀球灵具有不同程度抗药性的虫株分别占80%,66.6%,53.3%,53.3%和0%。不同地区虫株的抗药谱和抗药程度存在差异。多数虫株对2种或2种以上的抗球虫药具有复合抗药性。此外,研究制订了比较适用的检测球虫抗药性的判定方法和判定标准。     

化学致弱柔嫩艾美耳球虫杂交F2株免疫性能研究

采用化学致弱剂致弱柔嫩艾美耳球虫杂交F2株卵囊.将致弱的卵囊分别饲喂3组7日龄从肉仔鸡进行免疫,免疫剂量分别为4×103,8 × 103,16×103个/只.首免7日龄,二免14日龄,二免剂量与首免相同.二免后第7 d用吉林野毒株卵囊进行攻虫,剂量为5 × 104个/只.攻虫后第7 d以存活率、相对增重率、病变值、抗球虫指数(ACI)、卵囊值、粪便计分等指标测定化学致弱剂致弱卵囊后免疫性能.结果表明:采用化学致弱剂致弱杂交F2株卵囊后的免疫效果明显高于非致弱免疫组和对照组,尤其免疫剂量为8×103个/只时致弱杂交F2株卵囊免疫效果最佳.     

温度对鸡早熟艾美球虫孢子囊形成的影响

从混合鸡球虫卵囊中分离单卵囊,感染增殖后收获大量单一种类球虫卵囊,将卵囊分别置于10～36℃、38～39℃、40℃恒温箱内培养,研究了温度对鸡早熟艾美球虫孢子囊形成的影响.结果显示,10～36℃时,孢子囊形成时间随温度提高而提前,每小时孢子囊形成率和增长幅度也随温度的提高而上升.10℃时,77 h初次形成孢子囊,孢子囊形成率达19.047%,经98 h孢子囊形成率达92.360%;36℃时,5 h初次形成孢子囊,孢子囊形成率达26.471%,经8 h孢子囊形成率达94.180%;38～39℃时,孢子囊形成率达一定时就不再上升,且随温度提高孢子囊形成率反而下降.38℃时,最高孢子囊形成率为52.800%,39℃时最高孢子囊形成率为12.500%;40℃时,球虫卵囊不会形成孢子囊,39～40℃是球虫卵囊形成孢子囊的临界温度.将卵囊分别置于40～65℃恒温干燥箱内经0.5 h处理后又经25～30℃培养24 h的结果表明,卵囊经40～50℃处理后仍可形成孢子囊,而经55℃以上温度处理就被杀死,45～50℃是球虫卵囊的生死临界温度.     

纯中药制剂"球宁"对鸡柔嫩艾美尔球虫病的疗效试验

用纯中药制剂球宁(由青蒿、仙鹤草、硫磺等组成)防治鸡球虫病。结果表明纯中药制剂球宁对鸡球虫病有良好的防治作用，以1％添加剂量组最好，ACl为199．6．并能提高增重率。     

柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子表面抗原基因(λMZ5-7)的克隆及序列分析

本文选择E.tenella第2代裂殖子表面抗原基因（λMZ5－7）为侯选抗原基因，利用RT－PCR方法从E.tenella第2代裂殖子中扩增出了λMZ5－7基因，反这一片段克隆到PGEM－T－easy克隆载体上，得到的阳性克隆经PCR鉴定及酶切分析。结果表明，重组子（PGEM－T－λMZ）中含有λMZ5－7基因，且是正向插入的。核苷酸序列分析结果表明，该序列全长984bp，有一个开放阅读（933bp），与国外报道的λMZ5－7基因比较，同源性为98．8％，只是在335～347bp处缺少12bp，基余部分相同，缺少的12bp没有造成氨基酸编码的错位，缺少的4个氨基酸为Thr、Ser、Gln、Gln。克隆出的λMZ5－7基因可用于将来重组疫苗的研究。