金钗石斛SEP3-like基因的克隆及其在春化过程中的表达分析

 通过同源克隆从低温春化处理的金钗石斛腋芽中分离到1个SEP3-like基因的全长cDNA。该cDNA含有长度为684 bp的开放阅读框,可编码由227个氨基酸组成的蛋白质。同源搜索和系统进化分析表明,该蛋白与拟南芥AtSEP3同源,并同属于MADS-BOX 家族的SEP亚家族中的SEP3分支,故将该基因暂定名为DnSEP3-like。与其它的石斛属的SEP3蛋白类似,DnSEP3-like蛋白缺失C–末端的部分基序。DnSEP3-like基因的表达受春化作用的影响,其转录产物随春化时间延长逐渐积累,在春化20 d时达到峰值,暗示该基因可能参与春化调控开花的生物学过程。     

铁皮石斛内生细菌群落结构分析

采集人工种植2年的铁皮石斛,将根、茎和叶研磨为粉末,采用NA培养基分离纯化其内生细菌,酶切去除冗余,利用16S rRNA基因序列同源性分析,对铁皮石斛根、茎和叶中分离得到的49株内生细菌进行分离鉴定。结果表明,获得的49株内生细菌在根、茎、叶中分别有24株、15株和10株,分别属于芽孢杆菌属的5个种、假单孢杆菌属的1个种和沙雷氏菌属的1个种。分离出的内生细菌表现出一定程度的细菌区系相似性,也表现出细菌区系的器官特异性。铁皮石斛内生细菌在石斛根部分布的属、种数量明显比茎、叶多,土壤可能是铁皮石斛内生细菌的主要来源;铁皮石斛不同部位内生细菌群落结构存在一定差异,群落种数根＞茎＞叶。研究获得荧光假单胞杆菌20株,占总内生细菌数量的40.82％,判断其可能为优势菌株。     

不同消毒方法及时间对铁皮石斛茎段污染率及出愈率的影响

研究了不同消毒方法及时间对铁皮石斛茎段污染率及出愈率的影响。结果表明：0．1％HgCl2和吐温20按比例10000：1的混合溶液消毒7min,铁皮石斛茎段效果最佳。     

鼓槌石斛开花习性与人工授粉对结实率的影响

[目的]研究鼓槌石斛开花习性及人工授粉对结实率的影响。[方法]对鼓槌石斛开花期、果实主要特征及种子进行观察,开展种内人工授粉育种试验,采用培养基离体萌发法测定不同花期的花粉活力。[结果]鼓槌石斛开花期为3月上旬~5月上旬,盛花期为3月下旬~4月下旬,从花芽萌发到完全开放需要36~40 d,鼓槌石斛不同唇瓣中心斑块颜色有4种:分别为棕橘色(RHS 165B)、深黑红色(RHS 187A)、深褐红色(RHS 183A)、深棕橘色(RHS 163A);鼓槌石斛有活力花粉比例在花蕾期为32.6%,开花当天为80.5%,开花15 d后为1.8%,直到花谢花粉仍有活力;于开花第2~3天进行人工授粉,异丛异花授粉结实率达92.9%,同丛异花结实率为58.1%,同株异花结实率为41.2%,而自花授粉结实率为20.2%。[结论]鼓槌石斛花粉在整个花期均有活力,通过种内人工辅助授粉可大大提高鼓槌石斛的结实率。     

铁皮石斛组培快繁及移栽技术研究

以红杆铁皮石斛种子为外植体,进行组织培养快繁及移栽技术研究。采用对比试验研究不同培养基、激素浓度配比、基本培养基对铁皮石斛原球茎增殖、分化和生根壮苗的影响,并研究驯化时间与移栽基质对铁皮石斛移栽的影响。结果表明,MS+10％马铃薯泥+20％香蕉泥＋20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂最适合铁皮石斛原球茎增殖;MS+0.5 mg/L NAA+3.0 mg/L BA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂+200 ml/L椰汁最适合原球茎分化;1/2MS+0.5 mg/L NAA+15％香蕉泥+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂最适合铁皮石斛壮苗生根;驯化28 d的铁皮石斛移栽成活率最高,达96%;以松树皮∶椰糠∶石头=1∶1∶1为栽培基质,对其苗长势最佳。     

铁皮石斛的组织快繁研究

研究了不同培养基和不同浓度激素对铁皮石斛组织快繁愈伤组织诱导的影响。结果表明：诱导愈伤组织时,培养基以N6培养基对愈伤组织的诱导效果最好;添加6-BA,浓度以1.0 mg/L诱导愈伤组织效果最好。     

金钗石斛类原球茎转化子选择方式的比较

为确立农杆菌介导法转化金钗石斛类原球茎的适宜的选择体系,利用液体纸基、固体培养基与液体滤纸桥3种培养方式,以0,20,40,50,60,80 mg/L质量浓度的潮霉素(Hyg)梯度试验,发现不同培养方式的选择效果有所差异。当使用液体纸基培养在50 mg/L Hyg的选择压下,20 d后可使材料死亡;使用固体培养基时,60 mg/L Hyg的选择压下,1个月以上才见效;在40 mg/L的选择压下,液体滤纸桥选择需要26~29 d。固体培养基选择需要较高的Hyg质量浓度且选择周期长,液体纸基选择可缩短时间,但容易造成转化细胞的生长抑制甚至死亡,比较而言液体滤纸桥是较好的选择方式。     

铁皮石斛快速繁殖体系研究

以铁皮石斛愈伤组织为试材,比较培养基组分、植物激素种类、浓度及添加剂等对铁皮石斛增殖、壮苗及生根的影响。结果表明:愈伤组织增殖最适培养基为:MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;不定芽诱导的最适培养基:1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;幼苗壮苗的最适培养基为:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁30%;根诱导培养基:MS+IBA0.4 mg/L+NAA 0.3 mg/L。     

西双版纳石斛产业发展探讨

为促进西双版纳石斛产业的发展,分析了石斛的基本情况,以及石斛产业在我国的发展历程、在云南省的发展情况,分析了西双版纳发展石斛产业的优势和存在的问题,并针对存在的问题提出了发展建议。     

石斛兰花期调控研究进展

研究石斛兰花期调控对石斛兰栽培生产和产业发展具有重要意义。笔者简述了石斛兰的生物学分类以及观赏价值,并从光照、温度、植物生长调节剂和营养调控等方面回顾了近年来石斛兰花期调控技术的研究进展和应用现状,指出石斛兰花期调控技术和研究中存在的主要问题,并对以后的发展进行进一步探讨,提出几个具有研究价值的方向,以期为石斛兰花期调控的深入研究提供参考,解决生产上花期与市场需求错位的问题,实现按需供花,促进石斛兰产业的良性发展。