青稞HvnWRKY26基因的克隆及表达分析

WRKY家族转录因子广泛参与植物的生物和非生物胁迫过程。为探索WRKY家族转录因子在青稞抗条纹病过程中的作用,本课题组前期利用条纹病菌分别侵染抗病青稞品种昆仑14号和感病品种Z1141,并进行转录组测序,发现一个在侵染时期差异表达的WRKY基因家族成员。序列分析发现,该基因的开放阅读框为765 bp,可编码255个氨基酸,具有典型的WRKY结构域,属于WRKY基因家族。Uniprot注释结果表明,该蛋白为HvnWRKY26。启动子区域预测表明,该区域含有脱落酸和茉莉酸响应元件以及与干旱、低温、盐胁迫和防御应激等逆境胁迫相关的顺式作用元件。序列比对分析显示,HvnWRKY26蛋白与其他物种中同源蛋白的氨基酸序列一致性均不高,但该蛋白与大麦HvWRKY26蛋白的WRKY结构域序列完全相同。系统进化分析表明,青稞HvnWRKY26与大麦WRKY26的亲缘关系最近;进一步对HvnWRKY26及与其亲缘关系较近的大麦、玉米、水稻WRKY蛋白进行进化分析,发现这些WRKY蛋白被分为A、B和C三大类,其中HvnWRKY26蛋白属于A类。RNA-seq和qRT-PCR分析结果表明,青稞在遭受条纹病菌侵染时,HvnWRKY26基因的相对表达量在抗病品种昆仑14号和感病品种Z1141中均显著上调表达,且抗病品种的表达量显著高于感病品种,推测HvnWRKY26基因在青稞抗条纹病过程中发挥重要作用。     

克服线辣椒连作障碍的施肥方案研究

为了给通过施肥解决线辣椒连作障碍问题提供借鉴,于2005年在辣椒连作问题严重的陕西千阳县连续6 a(2000~2005年)种植线辣椒的田间,研究了施用钾肥、鸡粪、抗重茬剂对线辣椒品种“陕椒2001”叶绿素含量、叶片净光合速率、株高、叶面积指数、单株商品果数、鲜椒产量的效应。结果表明,每公顷施腐熟干鸡粪4 500 kg和3 000 kg的2个处理在减轻连作危害方面效果较好,处理后所有测定指标都显著高于对照,单株商品果数分别比对照增加6个和5.5个,鲜椒产量分别比对照提高28.2%和25.7%,并且基本上达到了关中平原灌区非连作线辣椒的产量水平;每公顷施750 kg硫酸钾的处理可以明显提高线辣椒的叶片叶绿素含量、净光合速率和叶面积指数,但对单株商品果数(平均比对照增加2.3个)和鲜椒产量(比对照提高12.5%)的效应有限;每公顷施375 kg硫酸钾的处理和每公顷施1950 mL抗重茬剂NEB-26的处理对多数测定指标的效应均不明显。     

Transmission of extended-spectrum cephalosporin-resistant Salmonella harboring a blaCMY-2-carrying IncA/C2 plasmid chromosomally integrated by ISEcp1 or IS26 in layer breeding chains in Japan

Dissemination of extended-spectrum cephalosporin (ESC)-resistant Salmonella is a public health concern in the egg production industry. ESC-resistant Salmonella often acquires the bla gene via insertion sequences (ISs). Therefore, this study aimed to assess antimicrobial resistance in Salmonella from Japanese layer breeding chains and egg processing chains, and determine the genetic profiles of IS-like elements in ESC-resistant Salmonella. Antimicrobial susceptibility testing was performed on 224 isolates from 49 facilities involving layer breeder farms, hatcheries, pullet-rearing farms, and layer farms in breeding chains along with egg processing chains. ESC-resistant Salmonella strains were whole-genome sequenced. Among them, 40 (17.9%) were resistant to at least streptomycin, tetracycline, ampicillin, chloramphenicol, cefpodoxime, nalidixic acid, ciprofloxacin, and/or kanamycin despite lacking resistance to azithromycin and meropenem. Moreover, 15 were ESC-resistant Salmonella harboring bla_CMY-2 (Salmonella enterica serovar Ohio, n=12; S. Braenderup, n=1; untypeable with O7:b:-, n=1) and bla_CTX-M-14 (S. Cerro, n=1). IncA/C₂ plasmids containing ISEcp1, IS26, and multiple antimicrobial resistance genes (including bla_CMY-2) were identified in S. Ohio isolates from pullet-rearing and layer farms belonging to the same company. Chromosomal integration of partial or whole IncA/C₂ plasmids was seen with two S. Ohio isolates via ISEcp1 or IS26, respectively. Antimicrobial resistance genes such as bla_CMY-2 might be transmitted among the upper and the lower levels of layer breeding chains via the replicon type IncA/C₂ plasmids containing ISEcp1 and IS26.     

山楂叶悬钩子枯枝病病原菌形态学及分子鉴定

在东北林业大学校园内的山楂叶悬钩子(Rubus crataegifolius Bge.)上发现了1种枯枝病,对其病原菌进行分离纯化,通过PDA菌丝体对健康的山楂叶悬钩子进行柯赫氏证病法验证,20 d后烧伤处理接种病原菌的山楂叶悬钩子枝条上出现典型症状;结合形态学鉴定以及rDNA-ITS、26S rDNA D1/D2、EF-1a序列的比对分析,确认引起山楂叶悬钩子枯枝病的病原菌为火炬树暗葡腔菌(Phaeobotryon rhois),该病害为山楂叶悬钩子的国内新病害。     

M_(26)中间砧对泰山嘎拉苹果果实挥发性成分的影响

采用静态顶空气相色谱-质谱联用技术,研究了M26中间砧对泰山嘎拉果实挥发性成分和香味品质的影响。结果表明:采用M26中间砧嫁接显著提高了泰山嘎拉果实醛类、酯类和香气总量。M26中间砧嫁接泰山嘎拉果实中含有10种特征香气成分,分别为乙酸丁酯、乙酸-2-甲基丁酯、乙酸己酯、丙酸丁酯、丙酸己酯、丁酸乙酯、2-甲基丁酸乙酯、2-甲基丁酸丁酯、2-甲基丁酸己酯、己酸乙酯,未用M26中间砧(对照)嫁接的泰山嘎拉果实中含有11种特征香气成分,除上述10种成分外,还含有己醛。与对照相比,采用M26中间砧嫁接泰山嘎拉的果实中,乙酸-2-甲基丁酯、2-甲基丁酸乙酯、2-甲基丁酸丁酯、己酸乙酯等特征香气成分对数香气值显著升高,而己醛、丙酸己酯对数香气值显著降低,引起泰山嘎拉果实嗅感的变化。     

杂交晚稻“协优赣26号”的选育与应用

以“协青早A”为母本 ,自育恢复系“C1 42 9”为父本进行配组 ,成功选育出杂交晚稻新组合“协优赣 2 6号”。 1 998、1 999年该组合参加南方稻区晚籼中迟熟组区试 ,平均产量分别为 6 .87t/hm2 和 6 .94t/hm2 。在推广和应用中 ,“协优赣 2 6号”表现高产、稳产、米质优、综合抗性强和制种产量高等特点 ,适合江西中南部地区作二晚种植。提出了“协优赣 2 6号”的栽培和制种技术     

西藏开菲尔粒中酵母菌的分离与初步鉴定

西藏开菲尔粒(俗称藏灵菇)是由多种乳酸菌(间或少量醋酸菌)和酵母菌共生而成一种外形酷似菜花的白色或乳黄色团状聚合体,是目前已知的唯一可用于酸奶制作的天然野生菌种资源。采用扫描电镜、分离培养、26S rRNA基因测序与序列分析、荧光原位杂交(FISH)相结合的技术方法,对西藏开菲尔粒中的酵母菌进行了分离培养、鉴定和形态观察。结果显示:西藏开菲尔粒中酵母菌多为球形(2.0~5.0μm)或椭圆形(1.0~3.0×2.0~4.0μm);从西藏开菲尔粒中分离出的16株酵母菌分属于酿酒酵母属(Saccharomyces)、克鲁维酵母属(Kluyveromyces)、亚罗酵母属(Yarrowia)这3个属中的4个种,其中3株是酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae),8株为马克斯克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus),3株为解脂亚罗酵母菌(Yarrowia lipolytica)。     

呼和浩特布鲁氏菌分离株bp26基因的原核表达

目的:克隆布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因并构建原核表达系统.方法:用聚合酶链式反应技术扩增得到布鲁氏菌bp26基因片段,与PEASY-E1载体链接,转入BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后,经SDS-PAGE检测重组蛋白表达,用Western blot鉴定目的蛋白的生物活性.结果:DNA测序结果显示,重组质粒bp26基因的插入位点正确,成功构建了重组质粒PEASY-E1-bp26,经IPTG诱导,表达出大小为27kDa的bp26融合蛋白.结论:获得布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因片段,并在大肠杆菌中表达出具有生物活性的bp26融合蛋白.     

针刺大椎、百会、人中穴对大鼠脑缺血再灌注损伤后ES蛋白表达的影响

目的 探讨针刺大椎、百会、人中穴对内皮抑素（Endostatin,ES）作用于大鼠脑缺血再灌注损伤后的表达变化及影响,研究ES作用于脑保护的部分机制。方法 将50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组各10只,其余30只大鼠参照ZeaLonga线拴法制作大脑中动脉缺血模型,造模成功后再随机分为模型组、依达拉奉组、针刺组,10只/组。正常组、假手术组、模型组仅捆绑,依达拉奉组以3 mg/kg （稀释至1 mL）腹腔注射,针刺组行大椎、人中、百会穴针刺,每12 h行1次治疗,6次后行神经功能缺损评分,再行Western Blot法检测ES表达。结果 （1）神经功能缺损评分对比：治疗后,与正常组、假手术组比较,其余3组评分较高（P<0.01）;与模型组比较,依达拉奉组及针刺组评分下降,差异均有统计学意义（P<0.01）;治疗前后依达拉奉组及针刺组组内比较,差异有统计学意义（P<0.01）。（2） ES比较：治疗后与正常组及假手术组比较,其余3组差异均有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,依达拉奉组及针刺组差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 大鼠脑缺血再灌注损伤后,针刺能使神经功能缺损评分下降,并能在一定程度上减少缺血区域海马组织ES的表达,达到减轻脑缺血再灌注损伤的作用机制,促进脑组织的修复。     

土壤信息系统建造研究--以江苏省大丰市为例

介绍了江苏大丰市土壤信息系统的建造框架及内容;讨论了土壤信息系统的建造技术,特别是有关土壤属性的编码和图形线划的数字化仪输入技术;进行了土壤信息系统的土壤数据处理和分析,并对几个重要的相关问题进行了探讨。