五指山小型猪DAZAP2 cDNA的克隆及其生物信息学分析

为了克隆五指山小型猪DAZ相关蛋白2(DAZAP2)cDNA全长并进行生物信息学分析,试验以构建的五指山小型猪外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR方法克隆得到DAZAP2全长cDNA序列,并运用生物信息学软件对其核苷酸序列进行分析,预测其编码蛋白的理化性质及二级结构等。结果表明:五指山小型猪DAZAP2基因的核苷酸序列及其氨基酸序列与人、苏门达腊猩猩、斑马鱼、非洲爪蟾、牛、褐家鼠等动物具有很高的相似性。DAZAP2 cDNA全长943 bp,5’非翻译区长69 bp,3’非翻译区长367 bp,含有1个完整的开放阅读框,编码168个氨基酸。该蛋白的分子质量为17 311 ku,等电点为7.48。     

不同处理对猪精子活率、顶体完整率、DNA含量及精清酶活性的影响

对猪全精进行稀释、保存、冷冻、冷休克处理,测定相关指标.结果表明,精液1:1稀释后,在室温(25℃)保存过程中,精子活率、顶体完整率逐渐下降,精清中GOT活性持续升高,ALP活性变化不明显,LDH活性首先于保存的第24h升高,以后下降.精液1:10稀释后,精子活率急剧降低,顶体完整率没有显著性变化;随室温保存时间的延长,两者呈下降趋势,到室温保存的第24h,除GOT活性升高外,其它两种酶活性变化不明显.精液经冷冻解冻、冷休克处理后,精子活率、顶体完整率大幅度下降,精清中GOT、LDII、ALP活性升高,并随冷休克处理时间的延长而加剧;稀释后再进行冷休克处理,各指标变化幅度减小.本试验结果还表明,猪精液DNA含量为3.14mg/10~9精子,其与精子密度呈正相关(r=0.893),试验中各种处理均未引起精子DNA含量明显变化.     

省力化设施蚕房的构建

随着蚕业规模化的发展,户均规模加大,为使蚕业规模与现有蚕农劳动力适配,省力化科技型养蚕技术的普及和推广是蚕业发展的必然趋势。射阳县经过多年的实践,探索出既能保温保湿,又能通风换气的省力设施大蚕蚕房育,收到了良好的经济效益,成为蚕农增收的助推器。     

山羊BLG基因侧翼区的克隆及序列分析

克隆奶山羊β-乳球蛋白基因5′、3′调控区并对其进行序列分析。从徐淮奶山羊组织中提取基因组DNA,采用高保真长模板PCR法克隆得到山羊β-乳球蛋白基因4.2 kb的5′调控区和1.8 kb的3′调控区。将纯化后的PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体中,经酶切鉴定和序列测定验证克隆的正确性。部分序列分析表明,5′区与GenBank中登录的山羊和绵羊BLG基因5′区同源性分别为100%和95%;3′区同源性则分别为99%和93%。克隆得到的奶山羊BLG调控区与山羊BLG伪基因显著不同,5′区和3′区同源性分别为83%和88%。结果表明,克隆得到的奶山羊BLG调控区可用于构建乳腺特异性表达载体,为指导外源基因在转基因动物乳腺中的高效表达奠定了基础。     

雌蚕无性克隆系的构建及应用研究

基于雌蚕无性克隆后代全雌、基因型完全一致的遗传特性,在家蚕遗传育种及杂种优势机理研究等方面具有重要价值.本文介绍了10余年来在雌蚕无性克隆性状的遗传特性、无性克隆系的构建及应用方面所取得的主要进展.     

中国五个绵羊群体mtDNA D-环遗传多样性研究

为探讨中国绵羊mtDNA D-环遗传多样性,通过PCR扩增和测序技术,对中国五个绵羊群体mtDNA D-环全序列进行研究,发现这五个绵羊群体mtDNA D-环碱基组成:A、T、G、C平均含量分别为34.66%、28.94%、13.90%、22.50%,(A+T)%含量明显高于(G+C)%含量,碱基突变以转换/颠换为主,且在绵羊mtDNA D-环区存在75bp的重复序列,含有4个重复序列是中国绵羊的基本特征;遗传距离分析结果显示,甘肃滩羊与其他中国绵羊群体之间的遗传距离较大,为0.0459～0.0573,其他四个绵羊群体之间遗传距离相对较小,为0.0246～0.0342,核苷酸多样度Pi为0.0323%,说明这五个绵羊群体mtDNA D-环遗传多样性均较贫乏,应该对其遗传资源进行保护.     

鹅细小病毒病的实验室诊断

鹅细小病毒病,在我国又称小鹅瘟,是由鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)引起的一种高发病率和高死亡率的高度接触性传染病。该病主要感染1月龄以内雏鹅,雏番鸭。GPV是细小病毒科、细小病毒属、无囊膜的单链DNA病毒。     

利用DNA条形编码探讨云南野柞蚕的分类学地位

2001年在云南曲靖发现的野生柞蚕(云南野柞蚕,A.pernyiwild)拥有一些与放养型柞蚕(A.pernyi)不同的特性。测定了云南野柞蚕线粒体细胞色素酶C亚基I基因5′端的部分片段(658 bp,GenBank:EU532613),并利用该DNA条形编码探讨其分类学地位。基于Kimura-2-Parameter计算的4个放养型柞蚕品种之间的平均遗传距离仅0.003,而云南野柞蚕与放养型柞蚕之间的遗传距离为0.016,小于已确定分类学地位的放养型柞蚕与印度野蚕(A.rolyii)之间的遗传距离(0.028),但与家蚕(B.mori)同其祖先中国野桑蚕(B.mandarinaChina)之间的遗传距离相近(0.015)。NJ树中云南野柞蚕与放养型柞蚕也最先聚在一起,从分子水平证实其仍属于柞蚕种。初步认为,云南野柞蚕可以考虑成为柞蚕种的一个亚种——野柞蚕亚种。     

线粒体DNA多态性与家畜遗传育种

在线粒体DNA的特点及其限制性片段长度多态性的基础上，阐明了线粒体DNA多态性在家畜育种上的应用。并指出线粒体DNA多态分析在家畜品种资源研究中的意义。     

寄生虫核酸疫苗的研究概况

核酸疫苗是一种将某种保护性抗原的编码基因克隆到真核细胞表达调控序列的质粒中 ,制成 DNA的重组质粒 ,直接给动物注射后质粒 DNA在组织内扩散 ,被宿主细胞摄取 ,随后通过宿主细胞的转录翻译系统 ,表达保护性抗原蛋白 ,在抗原蛋白释放分泌的同时 ,诱导机体发生免疫应答 ,产生对该抗原的保护性免疫 ,以达到治疗和预防疾病的目的。因此核酸疫苗又称基因疫苗 [1]。其包括 DNA疫苗和 RNA疫苗 ,目前研究最多的是 DNA疫苗 ,由于其不需要任何化学载体 ,又称 DNA疫苗。本文就寄生虫核酸疫苗的研究作一综述。1　核酸疫苗的研究概况1 994年 5…